2013年萊州市感染性腹瀉病原菌檢測分析

劉宗東　史玲杰　胡彬

【摘 要】目的：了解萊州市感染性腹瀉病原譜的構成及在不同時間、人群中的分布狀況，為制定綜合防治措施提供依據。方法：采集2013年萊州市腹瀉患者標本，檢測病原菌。結果：檢測295份腹瀉患者標本，檢出病原菌90株，檢出率為30.51%，病原譜包括沙門氏菌30株（30.33%）、副溶血性弧菌19株（21.11%）、銅綠假單胞菌12株（13.33%）、致瀉大腸桿菌11株（12.22%）、河弧菌6株（6.67%）、氣單胞菌5株（5.56%）、志賀氏菌4株（4.44%）、擬態弧菌、類志賀鄰單胞、創傷弧菌各1株（1.11%），未檢出霍亂弧菌和耶氏菌。不同人群中男性為31.71%（52/164），女性為29.01%（38/131），差異無統計學意義（χ2 =0.25，P>0.05）；年齡組31～40歲為44.86%（13/29），41～50歲為42.42%（14/33），不同年齡組差異有統計學意義（（χ2 =10.32，P<0.05）），10.8、9月檢出率依次為50.00%（16/32）、39.39%（26/66）、35.85%（19/53），不同月份差異顯著（χ2=18.39，P<0.05），結論：萊州市感染性腹瀉病原菌種類繁多。但主要以沙門氏菌和副溶血性弧菌為主，腹瀉多發生在夏秋季節，應繼續加強檢測工作。

【關鍵詞】感染性腹瀉；病原菌；病原譜

【中圖分類號】R472 【文獻標識碼】B 【文章編號】1004-7484（2014）02-0906-02

萊州市疾病預防控制中心自2010年起承擔山東省腹瀉癥候群檢測工作，每年5～10月份對哨點醫院腸道門診腹瀉病例采集糞便樣本，進行病原菌分離鑒定。為了解萊州市感染性腹瀉病原譜的構成，今后防控病原菌引起腹瀉病提供依據，我們對 2013年萊州市腹瀉患者病原菌檢測結果進行分析。

1 材料與方法

1.1 材料 標本來自2003年萊州市16個鄉鎮醫院腸道門診，選擇每日排便3次或以上、且大便性狀有改變（呈稀便、水樣便、粘膿便或膿血便等）的門診病例。

1.2 方法

1.2.1 標本采集與處理 用5支無菌棉拭多點采集糞便標本，插入50ml旋蓋密封離心管的C-B運輸培養基中（購自杭州天和微生物試劑有限公司），12h內送萊州市疾病預防控制中心進行沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉大腸桿菌、銅綠假單胞菌、耶氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌、河弧菌、氣單胞菌、擬態弧菌、類志賀鄰單胞、創傷弧菌等病原菌檢測。在裝有標本的培養基中，將棉簽分別放入堿性蛋白胨水（APW）、mEC、SBG、改良PBS增菌液，同時直接接種麥康凱（Mac）和XLD平板。

1.2.2 分離培養 于增菌液中，選擇生長最茂盛的培養基表面或菌膜下表層，取2～3滴加入霍亂01、0139膠體金試紙中，同時取一接種環APW增菌液分別劃線接種硫代硫酸鹽檸檬酸鈉膽鹽蔗糖瓊脂（TCBS）、慶大瓊脂、科瑪嘉弧菌顯色培養基和康凱瓊脂（Mac）（北京陸橋技術有限責任公司產品），自mEC增菌液接種0157顯色培養基，SBG增菌液接種沙門氏顯色培養基，改良PBS4℃增菌后接種耶氏菌選擇培養基和MAC平板。自從慶大瓊脂上選擇5～10個可疑菌落做霍亂弧菌血清凝集實驗；從TCBS瓊脂、科瑪嘉弧菌顯色培養基上選擇5～10個單菌落，做其他弧菌鑒定實驗；從Mac、XLD平板上選擇單菌落做氣單胞菌和類志賀鄰單胞菌、大腸桿菌的鑒定實驗。

1.2.3 生化檢測 自培養基平板上挑取可疑菌落接種（KIA/MIU）進行生化初篩、粘絲實驗和氧化酶實驗陽性者初步鑒定為弧菌，保存于半固體中進一步集中篩選【1】，菌株經VITEK 2 COMPACT（法國BioMérieux公司）生化系統鑒定。

1.2.4數據統計分析 數據采用E xcel2003軟件進行統計分析和χ2檢驗。

2 結果

2.1 病原譜特點 2013年5～10月共檢測295份腹瀉患者標本，檢出病原菌90株，檢出率為30.51%，其中沙門氏菌30株（30.33%）、副溶血性弧菌19株（21.11%）、銅綠假單胞菌12株（13.33%）致瀉大腸桿菌11株（12.22%）、河弧菌6株（6.67%）、氣單胞菌5株（5.56%）、志賀氏菌4株（4.44%）、擬態弧菌、類志賀鄰單胞、創傷弧菌各1株（1.11%），未檢出霍亂弧菌和耶氏菌。

2.2 不同月份病原菌檢出情況 病原菌檢出率， 5月為13.04%（3/23），6月為20.37%（11/54），7月為22.39%（15/67），8月為39.39%（26/66），9月為35.85%（19/53），10月為50.00%（16/32），差異有統計學意義（χ2=18.39，P<0.05），見表1。

2.3 不同人群病原菌檢出情況 病原菌檢出率，男性為31.71%（52/164），女性為29.01%（38/131），差異無統計學意義（χ2 =0.25，P>0.05）；2天～10歲為28.33%（17/60），11～20歲為18.75%（6/32），21～30歲為18.60%（8/43），31～40歲為44.86%（13/29），41～50歲為42.42%（14/33），51～86歲為32.65%（32/98），差異有統計學意義（χ2 =10.32，P<0.05），見表2。

3 討論

萊州市感染性腹瀉患者以中青年為主，病原譜的種類繁多，及時準確檢測引起腹瀉的病原菌，減少患者病痛和制定防治措施有著十分重要意義[2]，本次檢測總陽性率為30.51%，不同于青銅峽市[3]（15.22%），表明感染性腹瀉病原譜有著本地地域特點。檢出的90株細菌，以沙門氏菌檢出率最高位30.33%，沙門氏菌引腹瀉或食物中毒的來源是動物性食品，特別是肉類，也可以是家禽、蛋類、奶類食品，以6月和10月檢出較高，12.96%、43.75%，這與夏秋季氣溫高、濕度大，細菌繁殖能力強，食物容易受到細菌污染有關，溫度濕潤的環境有利于沙門氏菌生長和傳播[4]，另外夏秋季節蚊蠅孳生繁多，導致食物受污染的機會增多，增加了人群感染沙門氏菌的機會。因此，沙門氏菌感染患者的增加，提示在日常生活中應加強鹽腌漬制品和熟食冷葷類管理，注意蔬菜水果蛋類食品衛生，做好對食品的加工、儲存、運輸等各個環節監督。在年齡分布上，31-40歲、51-85歲年齡組檢出率較高，與何戰英[5]等人研究大致相同。

副溶血弧菌為革蘭氏陰性嗜鹽性海洋細菌，于1950年從日本一次暴發性食物中毒中分離發現[6]。該菌常存在于近海岸的海水、海底沉積物、海產品及鹽漬食品中，主要引起食物中毒和急性腹瀉，是我國沿海地區食物中毒中最常見的致病菌[7] ，萊州市西鄰渤海萊州灣，人群中不同性別檢出率無差異，主要原因是該市市民歷來有喜食水產品的習慣，副溶血弧菌感染的機會大致均等。帶菌水產品是誘發副溶血弧菌的原因食品[8]，因此，市民在食用時應煮熟、煮透，如果水產品生食或加工不當，易造成疾病的發生，故除加強監測外，對市民依據據病原菌特點采取有針對性的健康教育和相關知識宣傳培訓，增加市民食品安全意識，徹底煮熟以動物和水產品為源的食物，特別是禽類、肉類、蛋類和海產品類食物，以減少病原菌引起的食源性疾病的發生，保障居民的身體健康具有重要意義。

參考文獻：

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[2] 楊元娟，楊元梅，劉紹英. 128例小兒急性腹瀉糞便病原菌的培養分析 [J]. 重慶醫學， 2000，29（4）：342-343.

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[6] 周正任. 醫學微生物學 [M]. 第6版. 北京：人民衛生出版社， 2006.

[7] 方偉，楊杏芬，柯昌文. 副溶血性弧菌分型研究進展 [J]. 中華疾病控制雜志， 2008，12（5）：468-472.

[8] 李映霞，吳琪，黃芳，等.廣州市海珠區水產品副溶血性弧菌污染狀況調查分析[J]。中國衛生檢驗雜志，2012，21（5）：1175-1176.

基金項目：課題編號：2012ZX10004-201-002.國家科技重大專項課題，

子課題：癥候群細菌學研究