DC—CIK細胞治療148例老年惡性腫瘤的療效觀察

耿奇 李秀萍 張平

【摘 要】目的：探討DC-CIK聯合培養治療不能手術、不能化療的老年晚期惡性腫瘤患者的臨床療效觀察。方法：觀察148例臨床確診為惡性腫瘤的老年患者的腫瘤標記物、免疫指標和KPS評分的變化。 結果：DC-CIK治療后，腫瘤標記物CEA和CA125 降低，CD3+、 CD4+、CD8+的指標都有顯著提高（P<0.05），KPS評分不同程度的提高。結論：DC-CIK細胞治療不能手術、化療的老年晚期惡性腫瘤患者臨床療效好，改善患者的生活質量，提高患者的生存期。

【關鍵字】免疫治療；樹突狀細胞；CIK；老年人；惡性腫瘤；療效

【中圖分類號】R73 【文獻標識碼】B 【文章編號】1004-7484（2014）02-0565-01

隨著我國人口的老年化，老年惡性腫瘤的發病率和死亡率逐年上升。大部分老年患者由于年紀、身體狀況和合并各種基礎病等原因而不能化療、手術等治療。隨著分子生物學和細胞免疫學的發展，生物免疫療法已成為腫瘤治療的重要方法[1]，其中，CIK細胞聯合DC細胞治療惡性腫瘤，提高患者免疫功能的同時，有協同抗腫瘤的作用[2]。2011年12月～2012年10月148例晚期惡性腫瘤老年患者在我院接受DC-CIK治療，報告如下：

1 材料與方法

1.1臨床材料

經病理學或細胞學確診的癌癥患者148例，男性92例，女性56例。肺癌60例，乳腺癌20例，結腸癌15例，膀胱癌10例，前列腺癌8例，胃癌6例，肝癌5例，食道癌5例，胰腺癌5例，宮頸癌5例，卵巢癌3例，腎癌3例，黑色素瘤3例。患者入選標準：年齡大于60歲； 病理組織學、影像學或細胞學等檢查確診為腫瘤患者；生活自理，KPS評分標準50分以上；預計生存期至少大于3個月；簽署知情同意書。

1.2 方法

采外周血：采血前對患者進行血常規檢查，淋巴細胞與單核細胞的總數≥1×109/L。如不符合此標準，需采用GM-CSF進行刺激造血系統后，采血量為50-60ml，采血前晚患者進食清淡飲食。

DC-CIK分離與體外誘導：將采集的外周血加入葡聚糖梯度離心進行單個核細胞分離，采用虹吸的方式吸出單個核細胞細胞，用含有自體血清、細胞因子和硫酸慶大霉素的1640培養基懸浮，并轉移至75ml的培養瓶內，置于37℃的二氧化碳培養箱中培養。每2天半量換培養液和觀察生長情況，并取培養液送到檢驗科微生物是進行微生物檢測，若發現污染立即停止細胞培養，檢測細胞的CD3+、CD4+、CD8+、分子標記表達水平，要求CD3陽性率大于90% ，CD3/CD8大于 60%，臺盼藍染色計算細胞活力大于85% ； 收集DC-CIK 細胞，注入100ml生理鹽水輸液袋中。

DC-CIK回輸：一般采血后的8～14天開始首次回輸，間隔一天，分4次靜脈回輸完畢。回輸過程如有不適，及時處理癥狀。

觀察指標：由于部分患者因個人原因致無法了解腫瘤體積變化，主要通過觀察患者的腫瘤標志物、免疫指標、生存質量、不良反應、臨床癥狀、食欲、體重等判斷療效。其中臨床癥狀、生存質量、不良反應以患者主訴為依據。

1.3 免疫學相關指標及腫瘤標記物檢測

抽取患者治療前1周和治療結束3天后的外周血，用流式細胞儀檢測T細胞亞群（包括CD3+、CD4+、CD8+、 CD4+/CD8+），治療前1周、治療后1月檢測腫瘤標記物。

1.4 療效判定

生活質量：采用Karnofsky評分標準，提高20分以上為顯效；提高10-20 分為有效；提高10分以下至下降10分以內為穩定；下降10分以上為惡化。

療效評價：病灶完全緩解（CR），病灶部分緩解（PR），病灶穩定（SD），病灶進展（PD）

毒副作用：根據《急性和亞急性毒性反應的表現和分度標（ WHO標準） 評價化療毒副反應。

1.5 統計學處理

數據以均值±方差表示，采用SPSS17.0 統計軟件進行均值比較的方差分析，兩兩比較采用t檢驗，概率的比較采用 x2檢驗，P<0.05表示差異有統計學上意義。

2 結果

2.1 DC-CIK細胞治療前后腫瘤標記物的檢測

檢測148例患者的DC-CIK細胞治療前后的腫瘤標記物癌胚抗原（CEA）和CA125的改變情況：148例中96例下降；39例無變化；13例升高。下降率64.9%

2.2 DC-CIK細胞治療前后免疫系統的影響

148例患者平均接受了細胞回輸，治療后均表現精神狀態良好，治療前后前后患者免疫系統相關指標如表2所示，治療前后患者的外周血中CD3 +、CD4+、 CD8+細胞均有明顯的上升（P<0.05）

2.3 治療前后患者療效評估

對148例患者進行回訪，治療后有110例卡式評分提高10-30分，有29例無變化，有9例下降。92例體重增加，占62.2%。說明治療后患者的生活質量得以提高和改善，其中，病情部分緩解的有（PR）82例，影像學檢驗發現病灶縮小明顯，情況，病情平穩（SD）的有42例，沒有新的病灶轉移，病情進展（PD）有24例。

2.4生存期： 例患者DC-CIK細胞治療后1年生存期為，2年為。隨訪2年的生存期見表3.

2.5 不良反應：148例患者中有18例出現發熱均在輸后1小時內出現，持續不超過3小時，除有3例體溫達38℃，退熱處理后緩解。其余患者回輸后無不良反應。

3 討論

老年腫瘤患者身體機能差、器官功能退化、免疫功能下降，常常同事合并多個系統基礎疾病，導致對手術、化療等的耐受性差。CIK細胞是細胞因子誘導培養獲得的T淋巴細胞，具有在體外快速增殖、非MHC限制的殺瘤活性，廣泛用于各種抗腫瘤治療[3]。DC細胞是人體功能強大的抗原遞呈細胞，在機體預防外來病原均感染和腫瘤發生起重要作用。腫瘤患者體內的DC細胞未能發育成熟能識別抗原但不具有遞呈能力的細胞，所以在體外誘導成熟后回輸給患者，從而啟動抗原遞呈而發揮免疫效應，以防腫瘤細胞的逃逸。

有文獻報道[4] DC細胞和CIK細胞共同培養比CIK單獨培養殺瘤活性更強，且大大縮短培養時間。本研究采用DC細胞和CIK細胞聯合細胞治療148例老年晚期惡性腫瘤患者，并觀察患者治療前后的腫瘤標記物和免疫系統的變化規律，分析治療效果，評估期安全性。

從 DC-CIK細胞治療對患者的腫瘤標記物和免疫系統的影響來看，治療前后腫瘤標志物下降64.9%，免疫細胞數量提高明顯（P<0.05）。免疫球蛋白和相關細胞因子在免疫系統中也起著重要作用，在免功能變化評估中，本研究沒有進行免疫球蛋白和相關細胞因子的檢測，在以后的工作中會逐步開展。

通過療效觀察，回訪時患者治療后精神狀態佳，自我感覺良好。DC-CIK細胞治療后KPS評分提高的患者達到84.3%。綜上所述，DC-CIK細胞聯合治療惡性腫瘤具有廣泛的應用前景，目前，DC-CIK細胞治療已經取得較好的臨床治療效果，毒副作用低，安全性好，預防和減少惡性腫瘤的轉移和復發，為一些對手術、放療、化療已無適應癥的患者提供了一種提高免疫功能，緩解和減輕臨床癥狀，改善生活質量和延長患者生命的新途徑 [5]。

參考文獻：

[1] DeVita VT. Rosenberg SA. Two hundred years of cancer research[J].N Engl J Med.2012.366（23）：2207-2214

[2] Sangiolo D， Mesiano G， Carneval E-Schianca F， et al . Cytokine induced killer cells as adoptive immunotherapy strategy to augment graft versus tumor after hematopoietic cell transplantation. Expert Opin Biol Ther， 2009， 9： 831–840.

[3] Olioso P， GiancolA R， Di Riti M， et al . Immunotherapy with cytokine induced killer cells in solid and hematopoietic tumours： a pilot clinical trial. Hematol Oncol， 2009， 27： 130–139.

[4] Tao Yang， Ying Xiang， Yucheng Li，et al. Clinical study of co-treatment with DC-CIK cells for advanced solid carcinomas*. J Clinical Oncology（Chinese-German）2011， 10：354–359

[5] Zhong GC， Zhang XY， SunY，et al.Autologous tumor antibody-pulsed dendritic cells combined with cytokine -induced killer cells in the clini-cal treatment of lung adenocarcinoma. Tumor （Chinese）， 2010， 5： 395–400.