毛細管氣相色譜法測定丹參素冰片酯中有機溶劑殘留*

李 霞 ，李 繼 ，趙新鋒 ，戴 涌 ，劉海靜 ，鄭曉暉

（1.陜西省食品藥品檢驗所，陜西西安 710065；2.西北大學中草藥現代化研究及工程中心，陜西西安 710069）

丹參素冰片酯(簡稱 DBZ)，化學名為3－(3，4－二羥基苯基) －2 －羥基丙酸 －1，7，7－三甲基雙環[2.2.1]－2－庚醇酯，是本課題組應用現代組學研究技術研制開發的一個全新化合物[1]。經藥效學、藥理學研究表明，DBZ具有明顯的抗大鼠急性心肌缺血、降低血壓等作用，有望成為治療心腦血管疾病的理想藥物。國家科技部“十一五”重大新藥創制專項研究項目已將該化合物確認為化學新藥候選化合物。由于該化合物在合成過程中使用了乙醚、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲醇和乙醇等有機溶劑，為控制產品的質量，筆者參照2010年版《中國藥典(二部)》對殘留溶劑測定的相關規定[2]，建立了可同時測定上述6種殘留溶劑的毛細管氣相色譜法。現報道如下。

1 儀器和試藥

Agilent 6890N型氣相色譜儀，FID檢測器，ChemStato in色譜工作站。DBZ原料（由西北大學中草藥現代化研究及工程中心提供，批號為 DBZ2012.01，DBZ2012.02，DBZ2012.03）；甲醇、乙醇、四氫呋喃、乙醚、丙酮和乙酸乙酯均為分析純，N，N－二甲基甲酰胺(DMF)為色譜純。

2 方法和結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Agilent DB－WAX 型毛細管柱（30 m ×0.25 mm，0.25 μm）；柱溫：40 ℃ ；載氣：氮氣，流速：1.0 mL /min；采用分流比，分流比為10∶1；進樣口溫度：190℃，FID檢測器溫度：200℃。在此條件下，色譜圖見圖1，各組分均完全分離，相鄰色譜峰的分離度均大于1.5，理論板數以乙醚峰計算為6 092，拖尾因子均符合要求。

圖1 氣相色譜圖

2.2 溶液制備

分別精密稱取乙醚 0.530 8 g、丙酮 0.512 0 g、乙酸乙酯0.502 8 g、乙醇 0.511 7 g、甲醇 0.5045g、四氫呋喃 0.075 7 g，置100 mL容量瓶中，以DMF為溶劑稀釋至刻度，得混合對照品貯備溶液。精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，用DMF稀釋至刻度作為對照品溶液。稱取樣品約1 g，精密稱定，置10 mL容量瓶中，用 DMF溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液，臨用前用0.5 μm的微孔濾膜過濾后使用。

2.3 方法學考察

線性關系考察：精密量取混合對照品貯備液適量，用DMF配制成系列質量濃度的溶液，在上述色譜條件下分別進樣，每個質量濃度測定3份，記錄色譜圖。以峰面積 A為縱坐標、質量濃度C(mg/L)為橫坐標進行線性回歸。結果見表1。

表1 線性范圍和回歸方程(n＝6)

檢測限測定：逐步稀釋對照品溶液，以信噪比(S/N)≥3確定檢測限。結果各殘留溶劑乙醚、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲醇、乙醇的檢測限分別為 6.48，5.33，4.79，7.43，12.87，4.81 ng。

精密度試驗：取2.2項下對照品溶液，重復進樣6次。結果乙醚、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲醇、乙醇峰面積的 RSD分別為2.7% ，2.3% ，2.8% ，2.5% ，1.6% ，1.1%(n ＝ 6)，表明儀器精密度良好。

重復性試驗：取同一批號的樣品（批號為 DBZ2012.01），按2.2項下方法制備5份供試品溶液，按2.1項下色譜條件分別進樣分析。結果乙醇的平均含量為 0.06%，RSD為 5.6%(n＝5)，其他溶劑均未檢出。

回收率試驗：精密量取混合對照品貯備液 8.0，10.0，12.0 mL，分別置100 mL容量瓶中，加DMF稀釋至刻度，作為對照品溶液A，B，C。精密稱取已知溶劑含量的原料DBZ約1 g，共9份，置10 mL容量瓶中，分別用對照品溶液A，B，C溶解并稀釋至刻度，制得低、中、高3種質量濃度的樣品，各3份，分別進樣測定，計算回收率。結果見表2。

表2 6種溶劑回收率測定結果(n＝3)

2.4 樣品測定

按2.2項下方法制備供試品溶液，按2.1項下色譜條件進樣分析，按外標法計算各有機溶劑殘留量。結果見表3。

表3 樣品中殘留溶劑測定結果(n＝3)

3 討論

本試驗中選用DB－WAX毛細管柱，以FID為檢測器，N2為載氣，10∶1的分流比，6種有機溶劑均達到了基線分離，且分析時間較短，分離效率較高。由于DBZ不溶于水，比較了二甲亞砜（DMSO）和DMF這兩種有機溶劑。結果表明，DMF對待測樣品的溶解性良好，同時對待測有機溶劑峰無干擾。

藥品中有機溶劑殘留量雖有較多報道[3－5]，但不同藥品測定的種類和方法各異。乙醚、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲醇和乙醇等6種有機溶劑均為DBZ合成中使用并且2010年版《中國藥典（二部）》要求檢查的對人體有害的有機溶劑。因此，檢測 DBZ中這6種有機溶劑的殘留，對于DBZ的質量控制和安全使用有著重要意義。

參考文獻：

[1]鄭曉暉，張群正，王世祥，等.β－(3，4－二羥基苯基)－α－羥基丙酸冰片酯、其合成方法和用途.CN:200610042787[P].2006－11－29.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄ⅧP.

[3]余春梅，鄭小鋒，楊秀麗，等.直接進樣氣相色譜法測定硫酸氫氯吡格雷中的有機殘留溶劑[J].中國藥業，2013，22(14):67－68.

[4]韓學靜，袁志芳，杜玉民，等.毛細管氣相色譜法測定間尼索地平原料藥中有機溶劑殘留量[J].藥物分析雜志，2009，29(7):1 193－1 195.

[5]王 輝，常先平，周成鑰，等.氣相色譜法測定非布索坦中殘留有機溶劑含量[J].中國藥業，2013，21(22):57－58.