血清藥物化學在理氣藥中的應用進展*

★ 肖小梅 胡志方 郭慧玲 胡律江 郭三保 趙曉娟

(1.江西中醫藥大學 江西 南昌 330004；2.江西中醫藥高等專科學校 江西 撫州 344000)

氣為一身之主,升降出入,外而肌腠,內而臟腑, 是肌體的動力，與血共存，氣可運血，血可載氣。循環反復將營養物質源源不斷輸送到肌體的四肢百骸，推動肌體生長發育、肌體的新陳代謝、臟腑運動、物質的運輸。但勞倦過度，情志失調，飲食失節，寒溫不適等，均可使氣的升降失常，引起氣滯證或氣逆證。故《素問·舉痛論》說:“百病生于氣也。”[1]因此,如何靈活應用好理氣藥,是臨床上一個重要的問題。理氣藥主要用于治療“氣滯”引起的胸腹疼痛等證候。 以疏通氣機、消除氣滯、平降氣逆為主要作用的一類中藥。又稱行氣藥。多辛、苦，性溫，氣味芳香，具有行氣消脹，解郁止痛、降逆等功效[2,3]。理氣藥是中國的傳統藥物，有著上千年的應用歷史，尤其是復方理氣藥，依據“君臣佐使”的原則配伍組方，在疾病的臨床治療上發揮重要作用。但由于中藥成分復雜，其藥效不穩定，毒性不清楚，藥效物質基礎不明確，藥物作用機理不清等原因直接制約了我國中藥的發展和中藥現代化的進程。

藥物口服后其有效成分可經由胃、小腸等部位直接吸收入血，或在肝臟經肝微粒體酶 (P450)代謝為有活性的代謝產物，或誘發機體產生激素等某些生理活性物質。無論經過何種途徑，藥物的有效成分必須以血液為介質輔送到各組織、器官、系統等病變的靶點，從而發揮相應的作用[4]。因此，給藥后的血清才是真正發揮藥效的成分，血清中含有的成分才可能是中藥的體內直接作用物質。

血清藥物化學是從含有真正有效成分的血液中分取血清進行藥物學研究，最早是由日本學者田代真一于1988年提出來的[5,6]。中藥血清藥物化學是以傳統藥物化學方法為基礎，綜合應用多種現代技術，建立給藥樣品的全成分指紋圖譜，通過中藥指紋圖譜建立療效與化學成分的聯系，分析鑒定進入體內后血清中移行成分，從而可以為中藥及復方的配伍、藥效物質基礎、作用機制及藥動學等方面的研究奠定一定的基礎。

1 單味理氣藥中的應用

中藥具有行氣或降氣作用，能疏暢氣機，以治療氣滯證或氣逆證為主，臨床上常用的理氣藥主要有陳皮、青皮、厚樸、枳實、枳殼、木香、烏藥、香附、沉香等。基于它們良好的臨床療效, 采用血清藥物化學的方法追蹤其體內直接作用物質, 并以其中主要成分作為指標, 建立含量測定方法, 對這類理氣藥進行內在質量控制。

李曉玲等[7]對茶枝柑皮提取物進行血清藥物化學研究。采用HPLC方法測定分析茶枝柑皮提取物給藥后的含藥血清，鑒定茶枝柑皮提取物灌胃后大鼠血中移行成分。結果表明在茶枝柑皮提取物含藥血清中發現了17個入血成分，其中5個為原型成分，其他的可能為代謝產物。其入血原型成分主要為多甲氧基黃酮、陳皮素和桔皮素等成分，深入研究其血清藥物化學的表征，將有助于探索茶枝柑皮提取物的功效物質基礎，探明其中的功能因子。

聶子文等[8]對烏藥揮發油的血清藥物化學進行研究，通過建立 HPLC 色譜分析方法，分析烏藥揮發油給藥前后血漿樣品與其體外烏藥揮發油的成分變化，鑒定血中移行成分。結果表明體外烏藥揮發油在 11.6min 處有吸收峰，給烏藥揮發油后 0.5，1，1.5，2，4，6h 的血漿與空白血漿相比，在 11.6min 和 46.5min 有新成分被測出。

郭楠等[9]通過建立 HPLC 色譜分析方法，對香附有效成分 α-香附酮進行血清藥物化學和藥物動力學研究。針對進入血液中的香附成分進行分析，從而初步篩選出其產生作用的物質基礎，探討其體內直接作用物質，為進行有效治療控制和提取純化工藝研究奠定基礎。

2 復方理氣藥中的應用

復方的血清藥物化學研究，多是在分析全方、單味藥及其相應的動物含藥血清指紋圖譜的基礎上，比較各移行成分來自于那種單味藥或為哪幾種藥物綜合代謝的產物，從而探究其藥效物質基礎。

肖秋元等[10]通過建立大承氣湯水煎劑及大鼠口服給藥后血清的HPLC-DAD指紋圖譜色譜分析方法，對大承氣湯的血清藥物化學方法進行研究。結果顯示大承氣湯復方體外可以明確標出的成分有58個，而其血中移行成分有37個，其中29個成分來源于復方中的原型成分，另外的8個為代謝物和新產生的物質。此血清藥物化學研究方法適用于大承氣湯的物質基礎研究，其結果初步確定了復方血中移行成分的來源，也在一定程度上說明了大承氣湯中的配伍關系，為進一步研究大承氣湯物質基礎奠定了基礎。

枳術丸系張元素根據仲景《金匱要略》治水飲的枳術湯演化而成, 方中白術用量倍于枳實, 二藥為細末, 荷葉煎水泛為丸, 主治腹脹、心下痞、胃脘痛等癥,應用歷史悠久。王喜軍等[11]應用血清藥物化學的方法, 對口服枳術丸后血清中移行成分進行分析,結果表明口服給藥后，從大鼠血清中檢測到了13個化合物，其中6個為枳丸中原型成分，7個為代謝產物，柏皮普、橙皮營及新橙皮普等為枳術丸主要體內直接作用物質，實驗同時建立了枳術丸中入血成分柏皮營、橙皮昔的含量測定方法并以此對枳術丸進行內在質量控制。

柴芩清肝湯是由柴胡、黃芩、白芍和甘草等制成的中藥湯劑。付克等[12]采用HPLC-UV法建立柴芩清肝湯體外樣品和灌胃前后大鼠血清樣品的指紋圖譜，分析柴芩清肝湯口服給藥后大鼠體內血中移行成分，通過三者之間的比較確定柴芩清肝湯血中移行成分。結果檢測到大鼠血中移行成分14個，8個為柴芩清肝湯中原型成分，6個為代謝產物。該研究為進一步闡明柴芩清肝湯藥效物質基礎奠定了基礎。

3 中藥血清藥物化學發展前景

中藥是中國的國粹，其可貴之處在于中藥之間的綜合作用，但其有很多成分未明確, 如何有效的開展中藥血清化學研究, 這是一個學術界值得探討的問題。目前, 有效化學指標成分的分析及檢測是影響中藥藥物血清深入研究的難點, 今后的重點也應該結合藥物血清的藥理效應，分析和檢測有效的化學成分并探討其代謝規律與藥理效應的關系,以闡明藥物血清藥理效應的物質基礎, 使中藥藥物的血清研究上一個新臺階[13,14]。同時血清藥物化學研究方法亦有不足之處:(1)從胃腸吸收的藥物在體內是進入血漿, 而非血清;(2)有些藥物進入體內會有首過效應，肝臟的肝微粒體酶可能降解某些中藥成分;(3)使用有機溶劑制備血清過程中可能會導致中藥成分與中藥介導體內釋放物質損失,影響中藥成分的測定。因此，血清藥物化學的研究應考慮以下問題。

3.1 分析與評價方法 給藥樣品成分分析及質量評價應該建立給藥樣品的全成分指紋圖譜, 明確給藥樣品中所含原型成分和代謝產物, 測定主要成分的含量, 明確發揮藥理效應的物質。

3.2 實驗動物的選擇 根據研究中藥所含的主要成分來選擇實驗動物, 從動物對藥物作用的選擇性出發,選擇與人體代謝行為相同或相似的動物, 真正模擬藥物的體內過程[15,16]。

3.3 血清樣品的處理方法 含藥血清樣品的制備運用有機溶劑萃取法、重金屬鹽沉淀蛋白法、有機酸沉淀蛋白法及超濾法等方法, 渦旋，再高速離心，使血中移行成分富集并純化,減少干擾物質的影響。

3.4 血清樣品的檢測分析方法 血清樣品的分析綜合運用高效液相色譜法、液-質聯用法、氣-質聯用法、薄層掃描法、原子吸收光譜法等現代分析方法, 確定血中移行成分，進行藥效相關性研究, 揭示藥效物質基礎。

3.5 多組分物質的綜合評價分析 中藥及復方的藥代動力學研究以體內直接作用物質為指標, 多成分同時分析,從單方藥和復方中藥的藥動學相關性出發，給藥方案個體化[17,18]。

4 展望

隨著科學技術的發展，血清藥物化學在近十幾年的實踐研究中取得眾多卓越的成績, 有力推動了中醫藥現代化的進程。其研究方法的建立, 開創了中藥復方研究的新局面, 為研究中藥藥效物質基礎和闡明中藥作用的物質基礎提供技術支持[19]。中藥指紋圖譜現已成為中藥物質基礎研究的一種新模式。隨著研究的不斷深入，從體內出發描述的指紋圖譜應用于中藥質量控制和評價的領域在不斷的延伸，已滲透到中藥評價體系的各個方面, 包括中藥化學指紋圖譜(真實性鑒定)、生物指紋圖譜和代謝指紋圖譜(有效性評價和安全性評價)。建立血清藥物化學動態圖譜來反映中藥化學成分群在體內的動態變化規律及其與藥物原型成分之間的相關性，可以更加清楚地闡述中藥的藥效物質基礎。

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