葛根飲片包裝貯藏方法及其質量評價研究*

★ 鐘凌云 馬冰潔

(江西中醫藥大學藥學院 江西 南昌 330004)

中藥具有藥源廣泛,價格低廉,副作用小且療效可靠的優點，故廣受患者的青睞，但由于歷史原因的影響，中藥在包裝、調劑、貯藏保存過程中依然存在不少問題,這直接影響中藥的質量和療效,甚至還可能因為包裝運輸不當而造成藥品污染或產生不同程度的變質現象[1]。葛根是藥食兩用品種之一，作為一種流通及消耗量較大的大宗藥材，其包裝材料及儲存條件的選擇顯得尤為重要。目前小包裝飲片是飲片包裝發展的重要趨勢，本文模擬市售小包裝飲片劑量，對葛根飲片從包裝材料、包裝條件以及貯藏條件等方面進行研究，并通過水分含量、浸出物含量、葛根素含量及微生物含量等構建葛根飲片小包裝質量評價體系，為確立葛根飲片的包裝貯藏條件奠定基礎。

1 儀器與材料

1.1 儀器

封口機(周口佳特包裝制品有限公司)，Sartorius萬分之一電子天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)，JZX-9070MBE數顯鼓風干燥箱(上海博迅實業有限公司醫療設備廠)，Sartorius萬分之一電子天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)，Raytek Raynger ST20紅外測溫儀(美國雷泰公司(raytek))，中藥粉碎機(長沙旭朗粉碎機械有限公司)，50目標準篩(浙江省上虞市鑑湖儀器篩具廠)，高效液相色譜儀(Dionex ΜLtiMate3000)；PDA-3000二極管陣列紫外檢測器；Chromeleon工作站。

1.2 材料

葛根飲片購自樟樹天齊堂藥業，經江西中醫學院范崔生教授鑒定為豆科葛屬多年生落葉藤本植物野葛Puerarialobata(wilId.)Ohwi的根；聚乙烯塑料袋，紙袋，鋁箔袋。水為超純水，氯化鈉-蛋白胨緩沖液，乙醇為分析純，葛根素對照品購自中國藥品生物制品檢定所，甲醇為色譜純。

2 實驗方法

2.1 葛根根飲片包裝貯藏條件

2.1.1 葛根飲片小包裝 根據2010版《藥典》中葛根項下關于葛根飲片用量的規定，模擬市售小包裝，每袋包裝重量選為10g。分別采用聚乙烯塑料真空Ⅰ、聚乙烯塑料非真空Ⅱ、鋁箔真空Ⅲ、鋁箔非真空Ⅳ、紙袋非真空Ⅴ進行包裝[2]，以高溫封口機封口使密封，60Co輻照，2k Gy滅菌。

2.1.2 儲藏條件 中藥飲片在生產、流通、貯藏過程中，保存條件一般可分為常溫和低溫兩種，本課題結合實際需要，選定低溫穩定性和常溫穩定性兩個方面對葛根飲片進行貯藏條件研究。

2.1.3 低溫長期穩定性試驗貯藏條件 不同包裝材料和包裝方法的葛根小包裝飲片放置在冰箱內，溫度設定為2～10℃，分別于于0，1，2，4，6，9，12個月檢測水分、浸出物、葛根素含量及微生物限量。

1.2.4 常溫長期穩定性試驗貯藏條件 同包裝材料和包裝方法的葛根小包裝飲片放置在常溫留樣室內，溫度設定為10～30℃，室內具有一定的通風、光線及防蚊、防蠅、防鼠等設施，分別于0，1，2，4，6，9，12個月檢測水分、浸出物、葛根素含量及微生物限量。

2.2 葛根飲片包裝貯藏的檢測研究[3]

2.2.1 水分測定研究 取供試品(先破碎成直徑不超過3mm的顆粒)5g,平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中(厚度不超過5mm)精密稱定，打開瓶蓋在105℃干燥5h，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30min，精密稱定，再在上述溫度干燥1h，冷卻，稱重，至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失的重量，計算供試品中含水量。

2.2.2 浸出物含量測定研究 取供試品3克，精密稱定，置于200mL的錐形瓶中，精密加入30%乙醇100mL，密塞，稱定重量，靜置1h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，并用水補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25mL，置已干燥至恒重的蒸發皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量，得出浸出物含量。

2.2.3 葛根素含量測定研究[4]

2.2.3.1 色譜條件 色譜柱：Diamonsil C18(4.6mm×250mm,5μm)；流動相：甲醇∶水(75∶25)，檢測波長：250nm，柱溫：30℃，流速：1.0mL/min。

2.2.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取葛根素對照品2.5mg，置25mL容量瓶中，加30%乙醇溶液至刻度，搖勻，配成0.1mg/mL的溶液，作為對照品溶液。

2.2.3.3 供試品溶液的制備 取各樣品粉末(過三號篩)約0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入30%乙醇50mL，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用30%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，得供試品溶液。

2.2.3.4 標準曲線制備 精密吸取上述對照品溶液對照品溶液分別進樣2.5，7.5，12.5，17.5，22.5μL以葛根素濃度X(μL/mL)為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，繪制標準曲線。得回歸方程為Y=0.045X-0.8086(r=0.9997)。

2.2.3.5 精密度試驗 精密吸取“2.2.3.2”項下對照品溶液10μL，按照上述色譜條件連續測定5次，記錄峰面積，RSD為1.05%。

2.2.3.6 穩定性試驗 取同一樣品溶液，在相同的色譜條件下，在0，6，12，18，24h分別進樣10μL,記錄峰面積，RSD為0.91%。

2.2.3.7 重復性試驗 精密稱取同一樣品5份，按“2.2.3.3”項下供試品的制備方法制備，分別測定，每次進樣品10μL，RSD為1.42%。

2.2.3.8 加樣回收率試驗 精密稱定已知含量的樣品0.1g，精密添加一定量的葛根素對照品，按供試品的制備方法制備，依法測定，結果平均回收率為99.91%，RSD為0.31%。

表1 葛根素加樣回收率試驗

2.2.4 微生物含量測定研究 以無菌操作稱取檢樣5g，放入含45mL滅菌水的具玻塞錐形瓶中，振搖30min，即為1∶10稀釋液。用滅菌吸管吸取1∶10稀釋液10mL，注入滅菌試管中，另用1mL滅菌吸管反復吹吸50次，使霉菌孢子充分散開。取1∶10稀釋液1mL注入含有9mL滅菌水的試管中，另換一支1mL滅菌吸管吹吸五次，此液為1∶100稀釋液。

按上述操作做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸管，根據對樣品的污染情況估計，選擇三個合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋液的同時，吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋液做2個平皿，然后將涼至45℃左右的培養基注入平皿中，并轉動平皿使之與樣液混勻，待瓊脂凝固后，倒置于25℃～28℃溫箱中，3d后開始觀察，共培養觀察5d。

計算方法：通常選擇菌落數在10～150之間的平皿進行計數，同稀釋度的兩個平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數，即為每克檢樣中所含霉菌和酵母菌數。

2.3 結果

不同包裝材料、包裝方式和貯藏條件下水分、浸出物、葛根素和微生物含量結果見圖1-6。

圖1 低溫條件下葛根飲片水分含量趨勢圖

圖2 常溫條件下葛根飲片水分含量趨勢圖

從低溫及常溫條件下水分含量可以看出，紙袋包裝的葛根飲片水分含量較高，其他包裝材料及條件的葛根飲片水分含量差別不大；不同包裝貯藏條件下葛根飲片水分含量隨時間變化不明顯。

圖3 低溫條件下葛根飲片浸出物含量趨

圖4 常溫條件下葛根飲片浸出物含量趨勢圖

從低溫及常溫條件下葛根飲片浸出物含量可以看出，浸出物含量整體趨勢隨著時間變化而減少，但減少幅度不大，基本能符合2010版藥典中關于葛根飲片浸出物含量的要求。

圖5 低溫條件下葛根飲片葛根素含量趨勢圖

圖6 常溫條件下葛根飲片葛根素含量趨勢圖

從低溫及常溫條件下葛根飲片葛根素含量變化可以看出，不同包裝貯藏條件下葛根飲片中葛根素含量差別不大，其中常溫下鋁箔真空包裝含量較高，低溫下紙袋包裝含量較高；不同包裝貯藏條件下葛根飲片中葛根素含量隨時間變化不明顯。

表2 不同包裝貯藏樣品中霉菌和酵母菌量(cfu/g)

從低溫及常溫條件下葛根飲片微生物變化可以看出，葛根飲片中霉菌和酵母菌含量經過一段時間貯藏后顯著減少。

3 小結與討論

從低溫及常溫條件下水分含量、浸出物、葛根素含量和微生物限量結果可以看出，除了紙袋包裝的葛根飲片水分含量變化較大外，其他包裝材料及條件的葛根飲片水分含量差別不大，隨時間變化不明顯；浸出物含量整體趨勢隨著時間變化而減少，但減少幅度不大，基本能符合2010版藥典中關于葛根飲片浸出物含量的要求；葛根素含量差別不大，其中常溫下鋁箔真空包裝含量較高，低溫下紙袋包裝含量較高；霉菌、酵母菌量貯藏一段時間后，飲片中微生物的量急劇減少。綜合經濟因素考慮，選擇塑料非真空包裝、常溫貯藏可作為葛根小包裝飲片的包裝貯藏條件。

中藥小包裝飲片有利于飲片的保管、貯藏、運輸，還能保證飲片的質量和衛生[5]。目前的小包裝飲片包裝材料有很多，以聚乙烯塑料使用為多.塑料透明度高，便于飲片質量檢查及性狀鑒別，但是長期存儲可能會與飲片成分產生化學性反應，同時塑料還存在著一定的致癌、環境污染等安全隱患[6]。本課題僅針對12個月內葛根飲片的包裝貯藏方法及進行質量評價研究，但對于長期貯藏對其質量的影響尚未開展研究，還有待于進一步考察。此外，飲片生產企業則應從保證飲片產品質量和方便消費者使用這兩點出發，根據飲片的成分、性狀、使用等多方面綜合考慮飲片包裝材料的選擇及適宜的貯藏條件，為中藥飲片小包裝的推廣應用奠定基礎。

[1]朱衛星,李愛光,陳方,等.中藥包裝貯藏的研究概況[J].時珍國醫國藥,2006,17(11):2 304-2 305.

[2]王添生,何新榮.對中藥飲片小包裝規格的探討[J].廣東藥學院學報,2004,20(2):107-108.

[3]國家藥典委員會.中國藥典．一部[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010．

[4]黃建鋒,周清,戚海英,等.廣東不同產地葛根中葛根素和大豆苷元的含量測定[J].廣東藥學院學報,2013,4:013.

[5]何玉華.中藥飲片小包裝與中藥調配[J].中國醫院藥學雜志,2007,27(4):549-550.

[6]樓步青,林華.中藥飲片小包裝的質量控制[J].時珍國醫國藥,2008,19(12):3 071-3 071.