“半蔞貝蘞及攻烏”反藥組合對制川烏鎮痛作用的影響*

賴曉藝，莊朋偉，盧志強，李麗娟，張騰，王萍，賈佳明，張艷軍

（1.天津中醫藥大學中藥學院，天津 300193；2.天津市中藥藥理重點實驗室，天津 300193）

“半蔞貝蘞及攻烏”反藥組合對制川烏鎮痛作用的影響*

賴曉藝1，2，莊朋偉1，2，盧志強1，2，李麗娟1，2，張騰1，2，王萍1，2，賈佳明1，2，張艷軍1，2

（1.天津中醫藥大學中藥學院，天津 300193；2.天津市中藥藥理重點實驗室，天津 300193）

[目的]考察“半蔞貝蘞及攻烏”反藥組合對制川烏鎮痛效果的影響。[方法]采用輻射熱刺激甩尾法檢測給藥前及給藥后不同時間點小鼠的痛閾值，明確“半蔞貝蘞及攻烏”各單味藥的鎮痛效果；在此基礎上，將制川烏與各單藥以1∶1配伍，考察反藥組合對制川烏鎮痛效果的影響。[結果]制川烏在含生藥4 g/kg劑量下，15 min時鎮痛效果最佳，與給藥前相比差異有統計學意義；法半夏、瓜蔞、白及單獨使用有一定的鎮痛作用，與給藥前相比差異有統計學意義，但起效時間晚于制川烏；川貝母、白蘞鎮痛作用與給藥前相比差異無統計學意義；法半夏、川貝母、白及與制川烏配伍后可使制川烏的鎮痛起效時間延后；瓜蔞與制川烏配伍使鎮痛作用起效時間提前，并可持續一定時間（約30 min）；白蘞與制川烏配伍后可顯著降低制川烏的鎮痛效果。[結論]降低烏頭的鎮痛作用或延遲起效時間可能是“半蔞貝蘞及攻烏”反藥組合相反的具體表現之一。

制川烏；配伍；甩尾法；鎮痛

川烏為毛茛科植物烏頭（Aconitum Carmichaeli Debx．）的干燥母根，味苦、辛，大熱，有大毒，善祛風除濕、溫經散寒、行瘀止痛，廣泛用于風濕麻痹、關節疼痛、心腹冷痛、寒病作痛等癥[1]。傳統中醫理論認為川烏不可以與半夏、瓜蔞、貝母、白蘞、白及同用[2]，認為反藥組合使用可能增加川烏的毒性或是降低川烏的藥效[3]，但目前關于減效的說法尚缺乏系統的研究。因此，對“半蔞貝蘞及攻烏”反藥組合對制川烏鎮痛作用的影響進行了研究，現報道如下。

1 實驗材料

1.1 藥物的制備將藥材粉碎成粗顆粒，稱取一定量的制川烏（四川江油），法半夏（江蘇泰州），瓜蔞（江蘇洪澤），川貝母（四川康定），白蘞（安徽六安），白及（貴州凱里），制川烏與各單藥1∶1配伍（上述各藥經本校中藥鑒定教研室鑒定均符合飲片標準）。蒸餾水浸泡1 h，回流提取2次，第1次為10倍量蒸餾水煎煮1.5h，第2次為8倍量蒸餾水煎煮1.5 h，8層紗布過濾，合并2次濾液，60℃左右減壓蒸餾，濃縮至浸膏狀，置4℃冰箱保存備用。

1.2 實驗儀器XR-YLS-12A型鼠尾光照痛測痛儀（上海欣軟信息科技有限公司）。

1.3 實驗動物ICR小鼠，SPF級，體質量18～22 g，雌雄各半。購于北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證編號：SCXK（京）2009－0004。

2 實驗方法

2.1 分組及劑量ICR小鼠，采用分層隨機分組方法隨機分組，每組10只，雌雄各半，實驗前禁食不禁水12 h。實驗分為制川烏低劑量組（含生藥0.4g/kg）、制川烏中劑量組（含生藥2 g/kg）、制川烏高劑量組（含生藥4 g/kg）、法半夏組、制川烏配伍法半夏1∶1組、瓜蔞組、制川烏配伍瓜蔞1∶1組、川貝母組、制川烏配伍川貝母1∶1組、白蘞組、制川烏配伍白蘞1∶1組、白及組、制川烏配伍白及1∶1組。

2.2 給藥及檢測按照設計的給藥劑量對小鼠灌胃給藥，給藥體積為0.02 mL/g，檢測給藥前及給藥后5、15、30、60、120 min的痛閾值，計算痛閾提高百分率。具體實驗方法參照中藥藥理實驗方法學輻射熱刺激法略加改進[4]：將小鼠置于自制的圓筒內，使其不能自由活動，鼠尾由筒后的圓孔穿出，讓其自由下垂，待動物保持安靜后開始實驗。測痛時透光漏斗外部緊貼鼠尾下部1/3處，借電子秒表記錄從照射開始至出現甩尾時作為痛閾值。實驗選擇22 V、280 W、16 mm的照射條件，每只小鼠測定2次，取其平均值作為痛閾值[5-7]，且選用5 s左右甩尾的小鼠，小于3 s或大于10 s的小鼠表示反應過敏或遲鈍，舍棄不用；給藥后，若照射12.5 s仍不甩尾時，即停止照射，以免燙傷，并以12.5 s計。

2.3 統計方法采用SPSS 18.0統計軟件，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組內比較采用配對t檢驗，組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

3 實驗結果

3.1 制川烏鎮痛作用結果制川烏在含生藥0.4g/kg的給藥劑量下，給藥前后小鼠的痛閾值無顯著性變化；在含生藥2 g/kg的給藥劑量下，鎮痛效果在30 min左右可達到最大值，與給藥前相比差異有統計學意義；在含生藥4 g/kg的給藥劑量下，能迅速起效，15 min可達到最大值，與給藥前相比差異有統計學意義，與中劑量組比較差異有統計學意義，隨后藥效逐漸降低，在2 h內鎮痛作用逐漸消失，結果見圖1、表1。

3.2 制川烏與法半夏配伍鎮痛作用結果制川烏與法半夏配伍可顯著降低制川烏的鎮痛效果，并能延遲制川烏的起效時間，30 min可達到最大值，與給藥前比較差異有統計學意義；法半夏在含生藥4 g/kg的給藥劑量下，30 min時鎮痛效果最佳，與給藥前相比差異有統計學意義。結果見圖2、表2。

3.3 制川烏與瓜蔞配伍鎮痛作用結果制川烏與瓜蔞配伍在15 min可顯著降低制川烏的鎮痛效果，但可使鎮痛效果提前達到最大值，5 min時鎮痛效果最佳，與給藥前相比差異有統計學意義，并持續一段時間（30 min左右）；瓜蔞在含生藥4 g/kg的給藥劑量下，在30 min時鎮痛作用可達最大值，與給藥前相比差異有統計學意義。結果見圖3、表3。

3.4 制川烏與川貝母配伍鎮痛作用結果制川烏與川貝母配伍可延遲制川烏鎮痛作用達峰時間，30 min時鎮痛效果最佳，與給藥前比較差異有統計學意義；川貝母在含生藥4 g/kg的給藥劑量下，給藥后2 h內鎮痛作用與給藥前相比差異無統計學意義。結果見圖4、表4。

3.5 制川烏與白蘞配伍鎮痛作用結果制川烏與白蘞配伍在15 min時可顯著降低制川烏的鎮痛效果；白蘞在含生藥4 g/kg的給藥劑量下，給藥后2 h內鎮痛作用與給藥前相比差異無統計學意義。結果見圖5、表5。

3.6 制川烏與白及配伍鎮痛作用結果制川烏與白及配伍后藥效達峰時間明顯延后，60 min時達到最大值，與給藥前相比差異有統計學意義；白及在含生藥4 g/kg的給藥劑量下，在15～60 min表現出穩定而持久的鎮痛作用，與給藥前相比差異有統計學意義。結果見圖6、表6。

4 討論

圖1 制川烏鎮痛作用結果

圖2 制川烏與法半夏配伍鎮痛作用結果

圖3 制川烏與瓜蔞配伍鎮痛作用結果

圖4 制川烏與川貝母配伍鎮痛作用結果

圖5 制川烏與白蘞配伍鎮痛作用結果

圖6 制川烏與白及配伍鎮痛作用結果

表1 制川烏鎮痛作用結果（±s，n＝10）

表1 制川烏鎮痛作用結果（±s，n＝10）

注：與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；高劑量組與中劑量組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組別劑量（含生藥g/kg）藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）5 min15 min30 min60 min120 min低劑量0.45.21±0.955.31±1.195.42±0.835.47±1.105.31±1.045.16±1.22中劑量24.98±1.225.68±1.096.03±0.72*6.77±1.30**6.27±1.01*5.23±1.31高劑量45.08±1.676.86±1.21*△8.13±0.51**△△6.50±0.99*5.79±1.325.28±1.09

表2 制川烏與法半夏配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

表2 制川烏與法半夏配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

注：與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；烏半組與制川烏組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組別劑量（含生藥g/kg）藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）5 min15 min30 min60 min120 min制川烏45.08±1.676.86±1.21*8.13±2.11**6.50±0.99*5.79±1.325.28±1.09法半夏45.05±1.455.30±1.345.56±2.016.31±1.50*5.35±1.165.20±2.00烏半（1∶1）4∶45.11±1.565.88±0.99Δ6.03±1.85*ΔΔ7.61±1.87**6.39±2.14*5.62±1.36

表3 制川烏與瓜蔞配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

表3 制川烏與瓜蔞配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

注：與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；烏瓜組與制川烏組比較，ΔP＜0.05。

組別劑量（含生藥g/kg）藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）5 min15 min30 min60 min120 min制川烏45.08±1.676.86±1.21*8.13±2.11**6.50±0.99*5.79±1.325.28±1.09瓜蔞45.10±2.015.61±0.696.53±1.32*8.72±1.86**6.32±1.64*5.46±2.10烏瓜（1∶1）4∶44.96±1.277.14±1.50**6.84±1.93*Δ6.75±1.47*5.85±1.535.46±1.82

表4 制川烏與川貝母配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

表4 制川烏與川貝母配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

注：與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；烏貝組與制川烏組比較，ΔΔP＜0.01。

組別劑量（含生藥g/kg）藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）5 min15 min30 min60 min120 min制川烏45.08±1.676.86±1.21*8.13±2.11**6.50±0.99*5.79±1.325.28±1.09川貝母44.88±1.464.98±1.455.08±1.415.12±1.505.32±2.044.83±1.71烏貝（1∶1）4∶44.93±1.036.11±2.12*5.92±0.96*ΔΔ7.10±1.38**5.47±0.925.37±1.26

表5 制川烏與白蘞配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

表5 制川烏與白蘞配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

注：與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；烏蘞組與制川烏組比較，ΔP＜0.05。

組別劑量（含生藥g/kg）藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）5 min15 min30 min60 min120 min制川烏45.08±1.676.86±1.21*8.13±2.11**6.50±0.99*5.79±1.325.28±1.09白蘞44.95±0.635.30±1.935.15±2.055.15±1.305.00±0.914.85±1.50烏蘞（1∶1）4∶45.11±1.226.39±1.74*6.59±1.65*Δ6.29±1.13*5.67±1.525.98±1.64

表6 制川烏與白及配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

表6 制川烏與白及配伍鎮痛作用結果（±s，n＝10）

注：與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；烏及組與制川烏組比較，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。

組別劑量（含生藥g/kg）藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）5 min15 min30 min60 min120 min制川烏45.08±1.676.86±1.21*8.13±2.1**6.50±0.99*5.79±1.325.28±1.09白及44.94±0.795.53±1.447.11±1.93**6.87±1.66**7.01±0.91**5.78±0.73烏及（1∶1）4∶45.21±0.836.20±2.02*6.93±1.64*Δ7.45±1.82**7.87±0.84**ΔΔ5.68±0.86

“半蔞貝蘞及攻烏”屬于“十八反”的范疇，“十八反”是中醫藥界認定的配伍禁忌，并被編成歌訣，廣為流傳。上至《神農本草經》，下至現在的《中藥學》、《方劑學》、《中國藥典》等著作都是言之鑿鑿[8]，然而，其相反的具體表現并不清楚。川烏在治療風濕痹痛的諸多寒熱藥中的應用比例較高，療效也很顯著[9]；現代藥理研究也證實，川烏具有顯著的鎮痛作用[10]。經本課題組前期對川烏毒性的考察，制川烏含生藥4 g/kg的給藥劑量為安全劑量，無毒副作用，實驗中為了更好的反映藥組合對制川烏鎮痛效果的影響，選擇該給藥劑量。本研究針對川烏鎮痛效果，探討了“半蔞貝蘞及攻烏”反藥組合對制川烏鎮痛效果的影響，結果表明川烏與各單藥配伍后鎮痛作用降低或起效時間延遲，與傳統“十八反”理論相符。

[1]張琦.十八反“半蔞貝蘞及攻烏”物質基礎及毒性研究[D].長春:長春中醫藥大學,2010.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].北京:中國醫藥科技出版社，2010:36-37.

[3]肖成榮,陳鵬，王宇光，等.半樓貝蘞及配伍烏頭對大鼠肝細胞色素P450酶含量的影響[J].天津中醫藥,2004, 21(4):311-314.

[4]李儀奎.中藥藥理實驗方法學[M].第2版.上海：上海科學技術出版社,2006：242-243.

[5]盧瓏,沈麗，王雪妮，等.紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠鎮痛作用比較研究[J].天津中醫藥大學學報,2012，31（3）：163-165.

[6]曾春萍.桃葉鴉蔥抗炎鎮痛作用的實驗研究[J].天津中醫藥,2010,27（6）：515-516.

[7]高嵐，張仲一，張莉，等.薏苡仁湯鎮痛消炎作用的實驗研究[J].天津中醫藥大學學報,2005,24(1)：17-19.

[8]王世民,王永吉.對中藥“十八反”—“株連”現象的思考[J].湖南中醫藥大學學報，2007,27(S1):314-315.

[9]彭欣,秦林.附子類配伍防己在痹證中的應用與研究展望[J].光明中醫，1997，12(6):33-35.

[10]江蘇新醫學院.中藥大辭典[S].上海:上?？茖W技術出版社,1986:569-983.

Impact of contrary medicine combination on analgesia effect of processed Aconiti Radix before and after combination with Pinellia,Snakegourd Fruit,Fritillary,Ampelopsis Japonica Makino and Rhizoma Bletillae

LAI Xiao-yi1,2,ZHUANG Peng-wei1,2,LU Zhi-qiang1,2,LI Li-juan1,2,ZHANG Teng1,2, WANG Ping1,2,JIA Jia-ming1,2,ZHANG Yan-jun1,2
（1.College of TCM,Tianjin University of TCM,Tianjin 300193,China;2.Tianjin Key Laboratory of Pharmacology of Chinese Medicine,Tianjin 300193,China）

[Objective]To study the impact on analgesia of processed Aconiti Radix analgesia before and after combination with Pinellia,Snakegourd Fruit,Fritillary,Ampelopsis Japonica Makino and Rhizoma Bletillae. [Methods]Using the tail-flick method by radiant heat stimulation the pain threshold of the mice was detected at different time before and after oral administration.The analgesic effect of every single herb was cleared.On this basis,the Processed Aconite Radix was combined with every single herb at 1∶1 and then the impact of anti-drug combination on Processed Aconite Radix analgesic effect was detected.[Results]Processed Aconite Radix could significantly increase the pain threshold in mice at 15 min compared with that before administration under the dose of 4 g crude drug/kg;Pinellia,Snakegourd Fruit and Rhizoma Bletillae used alone had some analgesic effect.The difference was significant compared with that before administration,but the onset time was more delayed than Processed Aconite Radix;For Fritillaria,Ampelopsis Japonica Makino in analgesic effect.There was no significant difference compared with that before administration.Pinellia,Fritillaria and Rhizoma Bletillae could delay the onset time of Processed Aconite Radix and Snakegourd Fruit could make the onset time in advanced and sustainable for a certain period of time(about 30 min).Ampelopsis Japonica could significantly reduce the analgesic effect of Processed Aconite Radix.[Conclusion]Reducing the analgesic effect of Aconitum or delaying the onset time may be one of the specific performance of processed Aconite Radix after combination with Pinellia,Snakegourd Fruit, Fritillary,Ampelopsis Japonica Makino and Rhizoma Bletillae.

Processed Aconite Radix;compatibility;Tail-Flick method;analgesia

R285.5

A

1673-9043（2014）01-0032-04

10.11656/j.issn.1673-9043.2014.01.11

2013-09-08）

國家重點基礎研究發展規劃（973計劃）（2011CB 505300，2011CB505302）。

賴曉藝（1987-），女，碩士研究生，主要從事中藥藥理研究。

張艷軍，E-mail:zyjsunye@163.com。