腹壁切口子宮內膜異位癥患者病灶組織中Ki67和血清CA125的測定及意義

朱紅麗　仝進毅

●臨床研究

腹壁切口子宮內膜異位癥患者病灶組織中Ki67和血清CA125的測定及意義

朱紅麗仝進毅

【摘要】目的檢測腹壁切口子宮內膜異位癥患者病灶組織中Ki67的表達和血清CA125水平，探討其臨床意義。方法收集住院手術經病理檢查證實為腹壁切口子宮內膜異位癥患者38例（研究組），盆腔子宮內膜異位癥患者57例（對照組），用免疫組化方法測定兩組患者病灶組織中Ki67的表達，放射免疫法測定血清CA125水平，分析其臨床資料并進行隨訪。結果研究組患者Ki67陽性率（52.6%）顯著高于對照組（24.6%）（P＜0.05），兩組Ki67陽性患者的血清CA125水平均顯著高于陰性患者（均P＜0.05）。研究組無復發病例，而對照組復發率為21.4%（P＜0.05）。結論腹壁切口子宮內膜異位癥的發病機制可能與盆腔子宮內膜異位癥不同；子宮內膜異位癥患者Ki67的表達與CA125水平存在一定的正相關。

【關鍵詞】Ki67CA125腹壁切口子宮內膜異位癥

腹壁切口子宮內膜異位癥是一種典型的醫源性疾病，也是子宮內膜異位癥的發病機制中種植理論的依據。近年來，隨著剖宮產率的提高，腹壁切口子宮內膜異位癥的發病率顯著增加，已成為普通婦科目前最關注的問題之一。但腹壁切口子宮內膜異位癥的發病機制是否與盆腔子宮內膜異位癥一致，目前仍然存在爭論。為此，本文通過檢測腹壁切口子宮內膜異位癥患者病灶組織中增殖細胞核抗原Ki67的表達以及血清CA125水平，并與盆腔子宮內膜異位癥患者進行比較，分析其差異，以探討腹壁切口子宮內膜異位癥的發病機制，為臨床診治提供幫助。

1　對象和方法

1.1對象選擇2010-01—2013-12在我院手術經病理檢查證實為腹壁切口子宮內膜異位癥患者38例為研究組，年齡20～45（34.2±5.5）歲；均為剖宮產術后發現腹壁切口瘢痕處疼痛性包塊,且本次未發現合并盆腔子宮內膜異位癥；經知情同意后，每例患者術中取1份病灶組織標本，經10%甲醛溶液固定、石蠟包埋后作免疫組化檢測。選擇同期我院住院手術經病理檢查證實為盆腔子宮內膜異位癥患者57例為對照組，年齡24～41（32.1±7.2）歲；其病灶組織標本經10%甲醛溶液固定、石蠟包埋后作免疫組化檢測。所有患者在術前6個月內未服用過性激素類藥物。兩組患者年齡的差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2方法

1.2.1病灶Ki67表達水平的測定采用EnVision免疫組化二步法，常規石蠟包埋的標本經4 μm厚連續切片后，用鼠抗人單克隆抗體Ki67 Antigen（產品編號GK400105）；1∶250稀釋（福州邁新生物技術有限公司生產）檢測Ki67的表達。具體操作按照試劑盒說明書步驟進行。石蠟切片脫蠟至水后行高壓熱修復，滴加過氧化氫10min阻斷后每張切片滴加第一抗體50μl，室溫下孵育1h，再滴加二抗EnVisionTM50μl，室溫下孵育1h，最后經二氨基聯苯氨（DAB）顯色，蘇木素復染。

1.2.2Ki67免疫組化染色結果判定Ki67免疫組化染色以細胞核中出現棕黃色顆粒為陽性判定標準，根據著色的程度將表達強度分為無著色細胞（-）；陽性細胞＜5%，著色淡（+）；陽性細胞≥5%，＜35%，中度著色（++）；陽性細胞≥35%，著色深（+++）。

1.2.3血清CA125水平的測定取已保存的患者血清，應用放射免疫方法測定，采用瑞士羅氏公司1010型電化學發光免疫分析儀自動完成，檢測試劑及反應杯均由羅氏公司提供專用，嚴格按藥盒說明進行操作。

1.3隨訪兩組患者均進行門診隨訪3年，術后3個月復查一次，之后每半年復查，觀察癥狀、體征、血清CA125及盆腔B超情況。

1.4療效判斷和復發的定義癥狀緩解：痛經、性交痛、盆腔疼痛、陰道后穹隆觸痛，其中1項或全部癥狀消失或緩解；體征緩解：子宮直腸窩結節明顯縮小或消失或結節觸痛明顯改善或消失；復發：手術或規范藥物治療后，病灶減滅或縮小，癥狀消除或緩解后，再次出現臨床癥狀且恢復至治療前水平或加重，或B超檢查再次發現子宮內膜異位病灶。

1.5統計學處理采用SPSS 16.0統計軟件，測得計量資料以表示，組間比較采用t檢驗；計數資料組間比較采用χ2檢驗。

2　結果

2.1兩組患者病灶Ki67表達陽性率和血清CA125水平的比較見表1、圖1-3。

表1　兩組患者病灶Ki67表達陽性率和血清CA125水平比較

圖1　盆腔子宮內膜異位癥病灶Ki67陰性（免疫組化染色，×400）

圖2　腹壁子宮內膜異位癥病灶Ki67陰性（免疫組化染色，×400）

圖3　腹壁子宮內膜異位癥病灶Ki67陽性（免疫組化染色，×400）

由表1可見，研究組Ki67的陽性表達率顯著高于對照組（P＜0.05）。研究組血清CA125水平顯著低于對照組（P＜0.05）。

由圖1-3可見，兩組患者Ki67的表達均出現在子宮內膜腺體及上皮間質中。

2.2兩組Ki67表達陽性與陰性患者血清CA125水平的比較見表2。

由表2可見，兩組Ki67表達陽性患者血清CA125水平均顯著高于陰性患者（均P＜0.05）。

2.3兩組患者病灶Ki67表達水平與復發的關系研究組隨訪期間未發現復發病例。對照組有4例復發，復發時間為術后10～31個月，經婦科檢查及B型超聲檢查診斷。對照組Ki67表達陽性的14例患者中有3例復發，復發率為21.4%；Ki67表達陰性的43例患者中1例復發，復發率為2.3%，兩者比較有統計學差異（P＜0.05）。

表2 兩組Ki67表達陽性與陰性患者血清CA125水平的比較（IU/m）

3　討論

在接受腹腔鏡檢查或腹腔探查的76%～90%的生育期婦女可見月經的反流，然而子宮內膜異位癥的發生率僅為6.2%～8.2%，提示尚有其他因素決定子宮內膜異位癥的發生，如子宮內膜異位細胞與上皮細胞免疫親和因素，局部盆腔環境因素等[1]。

腹壁切口子宮內膜異位癥患者均有盆腔手術史，在腹壁瘢痕的部位出現硬結，月經期發生疼痛，硬結增大，往往認為是手術時子宮內膜直接種植所致。術后隨訪3年,切口無月經周期痛，無復發病例。而盆腔內異具有侵襲性強及復發率高等特點[2-3]。

Ki67是目前較為肯定的核增殖標志基因，也是應用最廣泛的細胞增殖標志物，編碼基因定位于第10號染色體。它的合成、表達與增殖細胞的增殖周期有關，在有絲分裂中，起著維持DNA規則結構的重要作用。本研究表明腹壁切口內異病灶的Ki67陽性率高于盆腔內異病灶，提示腹壁異位子宮內膜細胞的增殖能力比盆腔異位子宮內膜細胞強，但復發率低于盆腔子宮內膜異位癥患者。分析其原因可能有：（1）病灶細胞生長特性存在差異，Scotti等[4]研究表明盆腔子宮內膜異位的上皮細胞不是過度增殖，而是顯現細胞形態消失，顯示一個侵襲特性。（2）盆腔子宮內膜異位癥的發生、發展存在細胞增殖能力以外的因素，如免疫因素，上皮化生因素，盆腔高濃度雌激素因素。（3）腹壁子宮內膜異位癥較為局限，能完整切除包塊，而盆腔子宮內膜異位癥由于周圍臟器的粘連，導致部分粘連嚴重的患者子宮內膜異位癥囊腫殘留，引起術后復發。

血清CA125水平在盆腔子宮內膜異位癥診斷的臨床應用價值已被廣泛研究[5-8]，盆腔子宮內膜異位癥患者血清CA125水平顯著升高，認為與子宮內膜異位癥的嚴重程度和復發相關。本研究發現盆腔子宮內膜異位癥病灶組織中Ki67的表達水平與血清CA125的值呈正相關，表明CA125水平可能與細胞增殖密切相關，與疾病的發生、發展有關。此外，腹壁子宮內膜異位癥組血清CA125水平均在正常范圍內，提示臨床檢測腹壁子宮內膜異位癥血清CA125水平對疾病嚴重程度及復發與否的判斷意義不大。

本研究發現，Ki67在腹壁切口與盆腔子宮內膜異位癥病灶的表達水平不同，提示腹壁切口子宮內膜異位癥的發病機制可能與盆腔子宮內膜異位癥不同。Ki67在腹壁切口子宮內膜異位癥中表達率顯著高于盆腔子宮內膜異位癥，提示腹壁異位子宮內膜細胞的增殖能力比盆腔異位子宮內膜細胞強。Ki67表達陽性的子宮內膜異位患者CA125水平高于Ki67表達陰性的子宮內膜異位患者，提示Ki67的表達與CA125水平存在一定的正相關。盆腔子宮內膜異位癥患者中Ki67表達陽性的患者復發率高于陰性組，驗證了Ki67與細胞的增殖能力相關。

4　參考文獻

[1]Bulun.Endometriosis[J].N Engl J Med,2009,360(3):268-279.

[2]Kahyaoglu I,Kahyaoglu S,Moraloglu O,et al.Comparison of Ki-67 proliferative index between eutopic and ectopic endometrium:a case control study[J].Taiwan J Obstet Gynecol,2012,51(3): 393-396.

[3]Abrao M S,Neme R M,Carvalho F M,et al.Histological classification of endometriosis as a predictor of response to treatment[J].Int J Gynaecol Obstet,2003,82(1):31-40.

[4]Scotti S,Regidor P A,Schindler A E.Reduced proliferation and cell adhesion in endometriosis[J].Mol Hum Reprod,2000,6(7): 610-617.

[5]Harada T,Kubota T,Aso T.Usefulness of CA19-9 versus CA125 for the diagnosis of endometriosis[J].Fertility and Sterility,2002,78 (4):733-739.

[7]Toki T,Kubota J,Lu X.Immunohistochemical analysis of CA125, CA19-9,and Ki-67 in stage III or IV endometriosis:positive correlation between serum CA125 level and endometriotic epithelial cell proliferation[J].Acta Obstet Gynecol Scand,2000,79(9): 771-776.

[8]Kurata H,Sasaki M.Elevated serum CA125 and CA19-9 due to the spontaneous rupture of ovarian endometrioma[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,2002,105(1):75-76.

（本文編輯：沈昱平）

收稿日期：（2014-04-14）

作者單位：310006杭州市第一人民醫院婦產科通信作者：仝進毅，E-mail：tongjinyi@sohu.com

Ki67 expression in women with abdominal incisional endometriosis

【Abstract】ObjectiveTo investigate Ki67 expression in abdominal incisional endometriosis and its significance.Methods Patients with endometriosis(EMS)admitted in Hangzhou First People's Hospital from January 2010 to December 2013 were enrolled in the study,including 57 cases with pelvic endometriosis and 38 cases with abdominal incisional endometriosis.The expression of proliferating cell nuclear antigen(Ki67)in tissue was detected with immunohistochemical method and serum CA-125 levels were measured with radioimmunoassay.ResultsKi67 expression in abdominal wall endometriosis was significantly higher than that in pelvic endometriosis(P＜0.05).Serum CA125 levels in abdominal wall endometriosis was significantly lower than that in pelvic endometriosis(P＜0.05).Serum CA125 was significantly different between groups of different Ki67 expression(P＜0.05).Cumulative recurrence rate in abdominal wall endometriosis was significantly lower than that in pelvic endometriosis. CA125 level was higher in EMS with positive Ki67 expression than that in EMS with negative Ki67 expression.ConclusionKi67 is differently expressed in abdominal incision and in pelvic endometriosis,suggesting that the pathogenesis of abdominal incision endometriosis and pelvic endometriosis may be different;and Ki67 expression may be related to relapse of pelvic endometriosis.

【Key words】Ki67CA125Pelvic endometriosisAbdominal wall endometriosis