凝固酶陰性葡萄球菌的特性及其發(fā)展

蘭桂梅

（湖南省邵陽市新寧縣人民醫(yī)院，湖南 邵陽 422700）

凝固酶陰性葡萄球菌的特性及其發(fā)展

蘭桂梅

（湖南省邵陽市新寧縣人民醫(yī)院，湖南 邵陽 422700）

目的研究凝固酶陰性葡萄球菌的特性及其發(fā)展情況。方法將采集的384株凝固酶陰性葡萄球菌標本經(jīng)培養(yǎng)，首先經(jīng)行涂片染色，觀察染色特性；經(jīng)分離，固體培養(yǎng)觀察群落生長分布狀態(tài)，群落特征；增殖培養(yǎng)再分離培養(yǎng)后做分離鑒定試驗、藥敏試驗、抵抗力試驗。結(jié)果該類細菌為球形或近似球形，呈葡萄串狀排列，無鞭毛，無芽孢，經(jīng)革蘭染色呈紫色陽性反應(yīng)。該類細菌屬于需氧型細菌，耐鹽，對營養(yǎng)要求度不高，液體培養(yǎng)呈均勻混濁生長分布。群落成中等大小，圓形，凸起邊緣整齊光滑，成黃白色油狀。血平板培養(yǎng)部分出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。該類細菌主要包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人型葡萄球菌、腐生葡萄球菌32株、華納葡萄球菌等。該類細菌對抗生素有很高的耐藥性，對青霉素、氨芐西林等耐藥性高達90%；環(huán)丙沙星、阿莫西林、克林霉素等耐藥性在70%以上；頭孢唑啉、頭孢呋辛、頭孢曲松、四環(huán)素等耐藥性在50%左右，對頭孢呋辛、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、利福平等耐藥性較低，對利奈唑胺、萬古霉素沒有耐藥性。該類細菌對外界因素的抵抗力強，耐干燥，耐熱，對龍膽紫敏感。結(jié)論該類細菌特性成典型的葡萄球菌特性，其致病性低于致病性葡萄球菌，但耐藥性很高。

凝固酶陰性葡萄球菌；分類；耐藥性；群落特性

凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）一般被認為是人體正常菌群，1880年被首次鑒定，因不產(chǎn)生凝固酶因而稱為凝固酶陰性葡萄球菌[1,2]。此類細菌耐藥性強，造成了治療上的極大困難，已成為臨床面臨的一個非常棘手的問題[3]。本文旨在通過研究凝固酶陰性葡萄球菌的特性和發(fā)展情況，為臨床防治該類細菌的感染提供參考依據(jù)。

表1 凝固酶陰性葡萄球菌的分型比例表

1 資料與方法

1.1 菌株來源

384株凝固酶陰性葡萄球菌來自醫(yī)院2012年～2013年的臨床標本，包括血液、尿液、傷口分泌物、痰液、糞便。經(jīng)過分離，初步鑒定，保存于半固體培養(yǎng)基備用。

1.2 方法

標本經(jīng)培養(yǎng)，直接涂片染色；經(jīng)分離培養(yǎng)觀察群落生長分布狀態(tài)，群落特征；增殖培養(yǎng)再分離培養(yǎng)后做分離鑒定試驗、藥敏試驗、抵抗力試驗。

1.3 儀器與材料

細菌鑒定：梅里埃ATB細菌鑒定儀，藥敏試驗：K-B紙片擴散法，藥敏試紙由中國生物制品研究所提供。

1.4 細菌分離與藥敏試驗

細菌分離與藥敏試驗按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》操作。藥敏檢測結(jié)果判讀根據(jù)CLSI/NCCLS標準，量取的抑菌圈直徑來判斷凝固酶陰性葡萄球菌對該藥物的敏感性形式，共分為敏感、/中介、耐藥三個檔次。數(shù)據(jù)分析 采用WHONET 5.0 軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié) 果

2.1 形態(tài)與染色

通過對細菌經(jīng)行培養(yǎng)觀察可得，該類細菌為球形或近似球形，呈葡萄串狀排列，無鞭毛，無芽孢，一般沒有莢膜。經(jīng)革蘭染色呈紫色陽性反應(yīng)。

2.2 培養(yǎng)特性

該類細菌屬于需氧型細菌，耐鹽，在普通培養(yǎng)基上生長良好，經(jīng)液體培養(yǎng)基觀察可得該類細菌呈均勻混濁生長分布。經(jīng)普通固體培養(yǎng)基培養(yǎng)可見中等大小菌落，圓形，凸起邊緣整齊光滑，成黃白色油狀。血平板培養(yǎng)部分出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。

2.3 分類及分型

經(jīng)過分離培養(yǎng)的，384株凝固酶陰性葡萄球菌的分類鑒定結(jié)果顯示，表皮葡萄球菌214株（55.73%），溶血葡萄球菌49株（12.76%），人型葡萄球菌23株（6.00%），腐生葡萄球菌32株（8.33%），木糖葡萄球菌10株（2.60%），華納葡萄球菌26株6.77，其他30。詳見表1。

2.4 細菌藥敏結(jié)果

通過藥敏試驗測試可知，在常用的17種抗生素中，青霉素、氨芐西林、紅霉素等耐藥性高達90%；環(huán)丙沙星、阿莫西林、克林霉素等耐藥性在70%以上；頭孢唑啉、頭孢曲松、四環(huán)素等耐藥性在50%左右，對頭孢呋辛、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、利福平等耐藥性較低，對利奈唑胺、萬古霉素沒有耐藥性，可見該類細菌的耐藥性問題已經(jīng)很嚴重了，詳見表2。

2.5 抵抗力特性

經(jīng)抵抗力試驗發(fā)現(xiàn)該類細菌對外界因素的抵抗力強于其他無芽胞菌，耐干燥，耐熱，對龍膽紫敏感，耐藥性強。

3 討 論

通過對該類細菌的藥敏試驗發(fā)現(xiàn)，該類細菌已經(jīng)對抗生素產(chǎn)生了普遍的耐藥性，對目前常使用的青霉素、氨芐西林等耐藥性高達90%；環(huán)丙沙星、阿莫西林、克林霉素等耐藥性在70%以上；頭孢唑啉、頭孢曲松、四環(huán)素等耐藥性在50%左右，對于我院常用的頭孢呋辛、復(fù)方新諾明等抗生素耐藥性較低，使用該類抗生素治療該類細菌感染有不錯的效果。對利奈唑胺、萬古霉素沒有耐藥性。該類細菌耐藥性普遍增高是由于人們對抗生素的濫用造成的，特別是β-內(nèi)酰胺類藥物這樣的廣譜抗生素醫(yī)院內(nèi)的廣泛使用。凝固酶陰性葡萄球菌可分為MSCNS和MRCN S兩類，MRCNS攜帶mecA基因。研究顯示MSCNS的耐藥程度明顯低于MRCNS[4]。MRCNS的耐藥性高的原因是，mecA基因能夠編碼低親和力青霉素結(jié)合蛋白，該蛋白能夠產(chǎn)生對苯唑西林和所有頭孢菌素、青霉素類及酶抑制劑的復(fù)合抗菌藥物的耐藥性[5]。凝固酶陰性葡萄球菌的致病性不取決于菌種，而是由細菌染色體上的細胞間黏附基因（ica）和mecA基因、aac（6'）基因、等耐藥性基因[6]。

表2 凝固酶陰性葡萄球菌的耐藥性研究

由于抗生素的濫用，該類細菌感染的耐用性普遍較高，頭孢呋辛、復(fù)方新諾明、利福平等是治療該類細菌感染的不錯選擇，使用萬古霉素是最后的治療方案。

[1] 余續(xù)發(fā).耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌醫(yī)院感染的調(diào)查[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2005,12(4):313-314.

[2] 李勝利,張嬰之,吳菊芳,等.葡萄球菌醫(yī)院感染的調(diào)查研究[J].中國醫(yī)院感染學(xué)雜志,2007,8(2):65-67.

[3] Smith K,Hellmark B,Sderquist B.Characterization of SCCmec elements in methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis isolated from blood cultures from neonates During Three decades [J].APMIS,2011,119(12):885-893.

[4] 張永標,梁彩倩,張扣興,等.凝固酶陰性葡萄球菌菌譜與藥敏譜調(diào)查[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,2006,10(18):395-396.

[5] 洪秀華.臨床微生物學(xué)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2004:180.

[6] Ardic N,Sareyyu Poglu B,Ozyu RTM,et al.Investigation of aminoglycoside modifying enzyme genes in methicillin-resistant staphylococci[J].Microbiol Res,2006,161(1):49-54.

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1671-8194（2014）09-0039-02