鼠誘發性肝癌模型的研究進展

曹滌非，王 雷，王東凱，吳 瓊，李 瑤，黃國慶，姜 洋，黃婷婷，趙金海，侯婉瀅

（1.黑龍江省科學院高技術研究院，哈爾濱150020;2.建華醫院，黑龍江 齊齊哈爾 161000）

肝癌（HCC）是我國發病率較高的惡性腫瘤之一，近幾年來，肝癌的發病率呈上升狀態，已占我國惡性腫瘤的第2位［1］。肝癌的發生發展過程是多因素作用的結果，目前肝癌的致病機理尚未研究清楚，沒有安全有效的治療手段，因此深入探討發病機理是治療肝癌的重要基礎。實驗動物癌癥模型是人類癌癥研究中建立的能夠模擬人類癌癥表現的模型，可分為自發瘤型、誘發型、移植型和轉基因動物等［2］。因此利用鼠模型研究肝癌的發病原因和致病機理，是對肝癌研究的重要手段，本文將對誘發性鼠肝癌模型的研究進展進行綜述。

1 給藥途徑

主要有經口給藥法和注射給藥法兩種。經口給藥法又包括自動口服給藥和強制灌胃給藥，自動口服給藥是通過飲水或飼料攝取，灌胃給藥是將誘癌劑給鼠灌胃。注射法是將誘癌劑注射給藥，其中腹腔注射最常見，根據不同的誘癌劑可選擇不同的注射部位與方法。

2 誘癌劑的種類

誘癌劑有很多，本文將對以下幾種常用誘癌劑進行論述。

2.1 二乙基亞硝胺（diethylnitrosamine，DEN）

誘發大鼠肝癌模型:第一，DEN水溶液按10 mg/kg體重用量0.25%的濃度灌胃每周1次，其余時間按0.025%的濃度飲水，約4個月可誘導肝癌的發生，5～6個月80%以上可發生癌癥［3］;亦可用濃度為0.05%的 DEN飲水8個月誘發肝癌［4］。第二，Solt-Farber誘癌模型的方法［5］:第1 d根據大鼠體重換算按200mg/kg一次性腹腔注射DEN，2周后開始飼喂2－乙酰氨基芴（2－acetylaminofluorene，2-AAF）飼料含有0.02%的DEN 2周，在第3周末做2/3肝切除術，第4周末恢復標準飼料喂養，在第4周顯微鏡下觀察可見肝內出現變異肝細胞灶。第三，選用體重200 g的雄性Wistar大鼠，根據體重換算200 mg/kgDEN腹腔注射，然后給予濃度為0.05%的 DEN飲水，12周誘癌成功［6］。第四，選用體重200 g的雄性Wistar大鼠，通過應用DEN 自由飲水，16 周誘癌成功［7］。

2.2 黃曲霉素B1（AflatoxinB1，AFB1）

誘癌方法:第一，用含AFB1 4～5 g的飼料連續飼喂大鼠6周，3個月誘癌率可達100% 。此方法AFB1最低劑量達 0.001 ～ 0.005 g/d［8］。第二，用二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide DMSO）溶解AFB1，根據體重換算400 g/kg，每天腹腔注射1次，連續14 d后停注 AFB1，改飼含濃度為0.015%的2-AAF飼料30 d（實驗第21 d開始切除大部分肝臟）;或根據體重換算0.75～1.5 mg/kg AFB1，一次性注射，14 d后給予2-AAF加肝大部分切除，此方法建立的AFB1是肝癌的短期實驗模型［9］。第三，用含2%的DEM水溶液和0.004%的AFB1 DMSO溶液交替灌胃7周，可誘發大鼠肝癌［10］。

2.3 亞胺基偶氮甲苯（o-aminoazotoluene，OAAT）

誘癌方法:第一，用濃度為1% 的OAAT苯溶液在鼠的兩肩胛間皮膚上涂抹2～3滴，每隔1 d 1次，大約涂100次。給藥后2個月可出現腫瘤結節，7個月以上可誘發小鼠肝腫瘤，誘癌率約55%［11］。第二，用濃度為2.5 mg的OAAT溶于植物油中，皮下注射4次，每次間隔2周，可誘發肝癌。此方法多用于病因學、發生學、發病機制和遺傳學方面的研究［12，13］。

2.4 二甲基氨基偶氮苯（p-dimethylaminoazobenzene，DAB）

誘癌方法:一般用濃度為0.06% 的DAB添加到飼料中喂養大鼠，同時限制鼠的維生素B2的攝取量（不超過1.5 ～2 mg/kg體重），經4 ～6 個月可誘發出肝癌［14，15］。

2.5 2－乙酰氨基芴（2-acetylaminofluorene，2-AAF）

誘癌方法:以濃度為0.05% 的2-AAF添加到飼料中喂養SD大鼠，21 d后可出現癌變。顯微鏡下觀察可見細胞變性，有大小不等的增生性結節和癌巢結節形成［16］。此方法還適用于兔、狗、雞等動物的肝癌模型［17］。

3 展望

鼠肝癌模型會隨著肝癌的治療手段的發展和臨床基礎研究的日益深入和發展而不斷改進、完善。利用分子生物學技術，繼續研究更適合肝癌的多種生物學特性的鼠模型，建立更穩定的新品種模型;減少或消除個體差異，提高實驗的可行性和準確性，尋求一種更適的模型建立方式，這些可能成為鼠肝癌模型的發展方向。

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