多潘立酮片的微生物限度方法學(xué)驗證

解艷　呂文博

摘 要 目的：建立多潘立酮片的微生物限度檢查法。方法：采用平皿法。結(jié)果：建立了多潘立酮片的微生物限度檢查的驗證方法。結(jié)論：方法學(xué)研究結(jié)果符合規(guī)定，多潘立酮片可以采用平皿法進行微生物限度檢查。

關(guān)鍵詞：多潘立酮片；平皿法；驗證

微生物限度檢查法分為平皿法和薄膜過濾法。當(dāng)供試品具有抑菌活性時，應(yīng)消除抑菌活性后，再依法檢查，常用方法為：稀釋法、離心沉淀法、薄膜過濾法、中和法。

1 實驗條件

1.2 培養(yǎng)基

2.1 細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法合格標(biāo)準(zhǔn)

在3次獨立的平行試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率（稀釋劑對照組的平均菌落數(shù)占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率）應(yīng)不低于70%。若試驗組的菌回收率（試驗組的平均菌落數(shù)減去供試品對照組的平均菌落數(shù)的值占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率）均不低于70%，照該供試液制備方法和計數(shù)法測定供試品的細菌、霉菌及酵母菌數(shù)。

2.2 控制菌檢查方法合格標(biāo)準(zhǔn)

陰性菌對照組不得檢出該試驗菌。試驗組檢出試驗菌，按此供試液制備方法和控制菌檢查法進行供試品的該控制菌檢查。

2.3 菌液的制備

接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物用0.9% 無菌氯化鈉溶液制成50-100cfu/ml的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物用含0.05% （ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化納溶液制成50-100cfu的孢子懸液。

菌液制備后在室溫下放置，于2 小時內(nèi)使用。菌液制備后在2～8℃保存，在24 小時內(nèi)使用。

3 樣品制備

4.1.6實驗檢查結(jié)果：3次獨立的平行試驗中試驗組的菌回收率均大于70%，稀釋劑對照組的菌回收率也均大于70%，結(jié)果符合規(guī)定。

4.2 控制菌檢查法的驗證

控制菌檢查方法驗證用菌種：大腸埃希菌。

4.3 菌液制備：（同菌液的制備2.3）。

4.4 大腸埃希菌的驗證

4.4.1試驗組

取供試液10ml及50～100cfu大腸埃希菌1ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，混勻，按照《中國藥典》2010年版中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范中控制菌檢查方法驗證項下方法進行檢查。

4.4.2 陽性對照組

取50～100cfu試驗菌1ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，依試驗組項下方法進行大腸埃希菌檢查。

4.4.3 陰性對照組

取稀釋液10ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，依試驗組項下方法進行大腸埃希菌檢查。

4.4.4 實驗檢查結(jié)果：：試驗組均應(yīng)能檢出該試驗菌，陽性對照組檢出試驗菌，陰性對照組無菌生長。結(jié)果符合規(guī)定。

5 結(jié)束語

試驗表明：多潘立酮片的細菌、霉菌及酵母菌的計數(shù)方法驗證結(jié)果符合規(guī)定，大腸埃希菌的方法驗證結(jié)果也符合規(guī)定。多潘立酮片的微生物限度方法學(xué)驗證結(jié)果符合規(guī)定，可以采用藥典中片劑的微生物限度方法檢查微生物限度。

參考文獻

[1]《中國藥典》2010年版.

[2]《中國藥典》2010年版中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范.endprint

摘 要 目的：建立多潘立酮片的微生物限度檢查法。方法：采用平皿法。結(jié)果：建立了多潘立酮片的微生物限度檢查的驗證方法。結(jié)論：方法學(xué)研究結(jié)果符合規(guī)定，多潘立酮片可以采用平皿法進行微生物限度檢查。

關(guān)鍵詞：多潘立酮片；平皿法；驗證

微生物限度檢查法分為平皿法和薄膜過濾法。當(dāng)供試品具有抑菌活性時，應(yīng)消除抑菌活性后，再依法檢查，常用方法為：稀釋法、離心沉淀法、薄膜過濾法、中和法。

1 實驗條件

1.2 培養(yǎng)基

2.1 細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法合格標(biāo)準(zhǔn)

在3次獨立的平行試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率（稀釋劑對照組的平均菌落數(shù)占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率）應(yīng)不低于70%。若試驗組的菌回收率（試驗組的平均菌落數(shù)減去供試品對照組的平均菌落數(shù)的值占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率）均不低于70%，照該供試液制備方法和計數(shù)法測定供試品的細菌、霉菌及酵母菌數(shù)。

2.2 控制菌檢查方法合格標(biāo)準(zhǔn)

陰性菌對照組不得檢出該試驗菌。試驗組檢出試驗菌，按此供試液制備方法和控制菌檢查法進行供試品的該控制菌檢查。

2.3 菌液的制備

接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物用0.9% 無菌氯化鈉溶液制成50-100cfu/ml的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物用含0.05% （ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化納溶液制成50-100cfu的孢子懸液。

菌液制備后在室溫下放置，于2 小時內(nèi)使用。菌液制備后在2～8℃保存，在24 小時內(nèi)使用。

3 樣品制備

4.1.6實驗檢查結(jié)果：3次獨立的平行試驗中試驗組的菌回收率均大于70%，稀釋劑對照組的菌回收率也均大于70%，結(jié)果符合規(guī)定。

4.2 控制菌檢查法的驗證

控制菌檢查方法驗證用菌種：大腸埃希菌。

4.3 菌液制備：（同菌液的制備2.3）。

4.4 大腸埃希菌的驗證

4.4.1試驗組

取供試液10ml及50～100cfu大腸埃希菌1ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，混勻，按照《中國藥典》2010年版中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范中控制菌檢查方法驗證項下方法進行檢查。

4.4.2 陽性對照組

取50～100cfu試驗菌1ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，依試驗組項下方法進行大腸埃希菌檢查。

4.4.3 陰性對照組

取稀釋液10ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，依試驗組項下方法進行大腸埃希菌檢查。

4.4.4 實驗檢查結(jié)果：：試驗組均應(yīng)能檢出該試驗菌，陽性對照組檢出試驗菌，陰性對照組無菌生長。結(jié)果符合規(guī)定。

5 結(jié)束語

試驗表明：多潘立酮片的細菌、霉菌及酵母菌的計數(shù)方法驗證結(jié)果符合規(guī)定，大腸埃希菌的方法驗證結(jié)果也符合規(guī)定。多潘立酮片的微生物限度方法學(xué)驗證結(jié)果符合規(guī)定，可以采用藥典中片劑的微生物限度方法檢查微生物限度。

參考文獻

[1]《中國藥典》2010年版.

[2]《中國藥典》2010年版中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范.endprint

摘 要 目的：建立多潘立酮片的微生物限度檢查法。方法：采用平皿法。結(jié)果：建立了多潘立酮片的微生物限度檢查的驗證方法。結(jié)論：方法學(xué)研究結(jié)果符合規(guī)定，多潘立酮片可以采用平皿法進行微生物限度檢查。

關(guān)鍵詞：多潘立酮片；平皿法；驗證

微生物限度檢查法分為平皿法和薄膜過濾法。當(dāng)供試品具有抑菌活性時，應(yīng)消除抑菌活性后，再依法檢查，常用方法為：稀釋法、離心沉淀法、薄膜過濾法、中和法。

1 實驗條件

1.2 培養(yǎng)基

2.1 細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法合格標(biāo)準(zhǔn)

在3次獨立的平行試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率（稀釋劑對照組的平均菌落數(shù)占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率）應(yīng)不低于70%。若試驗組的菌回收率（試驗組的平均菌落數(shù)減去供試品對照組的平均菌落數(shù)的值占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率）均不低于70%，照該供試液制備方法和計數(shù)法測定供試品的細菌、霉菌及酵母菌數(shù)。

2.2 控制菌檢查方法合格標(biāo)準(zhǔn)

陰性菌對照組不得檢出該試驗菌。試驗組檢出試驗菌，按此供試液制備方法和控制菌檢查法進行供試品的該控制菌檢查。

2.3 菌液的制備

接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物用0.9% 無菌氯化鈉溶液制成50-100cfu/ml的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物用含0.05% （ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化納溶液制成50-100cfu的孢子懸液。

菌液制備后在室溫下放置，于2 小時內(nèi)使用。菌液制備后在2～8℃保存，在24 小時內(nèi)使用。

3 樣品制備

4.1.6實驗檢查結(jié)果：3次獨立的平行試驗中試驗組的菌回收率均大于70%，稀釋劑對照組的菌回收率也均大于70%，結(jié)果符合規(guī)定。

4.2 控制菌檢查法的驗證

控制菌檢查方法驗證用菌種：大腸埃希菌。

4.3 菌液制備：（同菌液的制備2.3）。

4.4 大腸埃希菌的驗證

4.4.1試驗組

取供試液10ml及50～100cfu大腸埃希菌1ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，混勻，按照《中國藥典》2010年版中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范中控制菌檢查方法驗證項下方法進行檢查。

4.4.2 陽性對照組

取50～100cfu試驗菌1ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，依試驗組項下方法進行大腸埃希菌檢查。

4.4.3 陰性對照組

取稀釋液10ml加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，依試驗組項下方法進行大腸埃希菌檢查。

4.4.4 實驗檢查結(jié)果：：試驗組均應(yīng)能檢出該試驗菌，陽性對照組檢出試驗菌，陰性對照組無菌生長。結(jié)果符合規(guī)定。

5 結(jié)束語

試驗表明：多潘立酮片的細菌、霉菌及酵母菌的計數(shù)方法驗證結(jié)果符合規(guī)定，大腸埃希菌的方法驗證結(jié)果也符合規(guī)定。多潘立酮片的微生物限度方法學(xué)驗證結(jié)果符合規(guī)定，可以采用藥典中片劑的微生物限度方法檢查微生物限度。

參考文獻

[1]《中國藥典》2010年版.

[2]《中國藥典》2010年版中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范.endprint