羅格列酮對糖尿病大鼠腎臟Smad7、TGF-β1及Ⅳ型膠原表達的影響及意義

陳寬林，方明明，張玉穎，張麗莉

(江蘇建康職業(yè)學院 1內(nèi)科教研室， 2教務處，南京 210029)

糖尿病腎病是糖尿病常見慢性并發(fā)癥，研究顯示與高血糖所致相關炎性因子導致腎臟轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)合成增加，誘導成纖維細胞過度增殖、膠原高表達有關，并且通過Smads家族介導[1]。羅格列酮因其可能誘發(fā)或加重心力衰竭而曾備受爭議，但最新研究證實其在無基礎心臟疾病的糖尿病患者中應用的安全與可靠性，而且還可以抑制糖尿病腎病發(fā)生與發(fā)展[2]。為了進一步了解羅格列酮在糖尿病腎病發(fā)病機制中的作用，本研究觀察了羅格列酮對鏈脲佐菌素誘導的糖尿病SD大鼠腎臟Smad7、TGF-β1和Ⅳ型膠原的表達，以及糖基化血紅蛋白A1c(glycosylated hemoglobin A1c，GHbA1c)水平，以觀察和探討羅格列酮對糖尿病大鼠腎臟保護作用及機制。

1 材料和方法

1.1動物 鼠齡3個月左右SD雄性大鼠若干(購自南京盛名科研動物中心，清潔級)，體質(zhì)量210～250 g，對其先行室溫、自然光下正常飼養(yǎng)1周，以0.1 mmol/L、pH4.8無菌磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered solution,PBS)配置濃度為2%的鏈脲佐菌素注射液，按照60 mg/kg體質(zhì)量進行一次性腹腔注射，分別在注射后24 h和48 h兩次測量尾靜脈血糖，連續(xù)兩次血糖水平在16.7 mmol/L以上者作為實驗性糖尿病大鼠成功模型。選擇制模成功的20只大鼠隨機分為羅格列酮組10只，生理鹽水對照組10只。

1.2方法

1.2.1主要試劑與儀器

1.2.1.1試劑 Smad7(編號BA1399)、TGF-β1(編號BA0290)、Ⅳ型膠原(編號BA2174)免疫組織化學試劑，即用鏈霉親和素-生物素復合物(streptavidin biotin complex，SABC)(編號SA1025)、5%小牛血清蛋白封閉液、生物素標記二抗(以上試劑為SABC配套試劑盒)、二氨基聯(lián)苯胺(編號AR1022)顯色劑等試劑盒均購自武漢博士德(Boster)生物工程有限公司；……