張 波,傅祖紅,胡振紅
(廣州軍區武漢總醫院呼吸內科,武漢 430070)
骨骼是肺部腫瘤轉移的好發部位,由于原發肺癌的部位和病理類型各不相同,其肺癌骨轉移的發生率也不同[1]。臨床上發生骨轉移患者的病灶以多發為主,病程通常已經發展為中晚期,因此常規的腫瘤放化療療效差,隨著以細胞和細胞因子為核心的免疫治療技術的加速發展,免疫治療為這類患者的痊愈帶來了新的可能。而腫瘤免疫治療的核心就是Th淋巴細胞[2]。本研究主要分析經病理證實的94例肺癌患者的Th細胞變化與肺癌骨轉移的關系。現報道如下。
1.1一般資料 選擇2011年1月至2014年1月廣州軍區武漢總醫院經病理證實的肺癌患者94例作為試驗組,男72例、女22例,年齡23~65(45.7±7.8)歲。其中腫瘤未轉移患者53例,其中接受化療者25例,尚未化療者28 例;腫瘤轉移患者41例,其中接受化療者23例,尚未化療者18 例。在發生轉移并化療者中,先化療后轉移者5例,先轉移后化療者18例,所有骨轉移患者作全身骨放射性核素掃描、磁共振成像、X線平片以確診疾病。來自本院的80例健康志愿者作為正常對照組,男65例、女15例,年齡20~71(46.2±8.3歲)。
1.2儀器及相關細胞分析軟件 流式細胞儀為FACS- Calibur(美國BD公司產品),氬離子激光器功率為15 mW,激發光波長為488 nm。用BD公司提供的Cellquest軟件程序獲取細胞和分析淋巴細胞中CD25+和CD3+/ CD4+細胞的百分率。每份樣品分別獲取2×104個細胞。
1.3方法 采集受檢者靜脈血1 mL,肝素抗凝,取抗凝全血100 μL,加入10 μL單克隆抗體帶熒光標記試劑(CD25-FITC或CD4-FITC/CD8-PE/CY5PE),在室溫下反應30 min,然后加入2 mL溶血劑,5 min后離心去上清液,再加0.15~1.0 mL磷酸緩沖鹽溶液液稀釋,混勻后上機檢測并分析CD25+細胞百分率或CD3+/ CD4+細胞百分率。……