辛伐他汀對阿霉素致心衰兔心功能的影響

殷國田等

【摘要】 目的：探討不同劑量辛伐他汀對阿霉素所致心衰兔保護作用及其抗心衰的機制。方法：雄性新西蘭大耳白兔60只，隨機數字表法分為正常對照組（CON）、CHF模型組（CHF）、CHF+辛伐他汀低劑量組（LD-SIM）、CHF+辛伐他汀中劑量組（MD-SIM）、CHF+辛伐他汀高劑量組（HD-SIM）。正常對照組（CON）給予耳緣靜脈等體積生理鹽水，每周1次，共10周。其余組均給予生理鹽水注射液稀釋的鹽酸阿霉素，按4 mg/kg，每周1次，共10次，而辛伐他汀干預組同時給予低、中、高劑量辛伐他汀灌胃治療，劑量分別為0.3 mg/（kg·d），

1.5 mg/（kg·d），3.0 mg/（kg·d）。10周后測定大鼠心功能左室肥厚指數、ELISA測定血清中hs-CRP和MMP-13含量。結果：各藥物治療組可不同程度改善左室肥厚，其中辛伐他汀大劑量組與CHF模型組比較差異有統計學意義（P<0.01），而辛伐他汀中劑量組與其比較差異有統計學意義（P<0.05），而小劑量治療組與之比較差異無統計學意義（P>0.05）；大中劑量治療組心功能指標（±dp/dtmax）明顯優于模型組，差異有統計學意義（P<0.01），辛伐他汀大劑量組與中劑量組比較差異無統計學意義（P>0.05），而小劑量治療組與模型組比較差異無統計學意義（P>0.05）；各藥物治療組能降低血清中CRP、MMP-13含量（P<0.01或P<0.05）。結論：辛伐他汀能夠預防左心肥厚，降低血漿CRP、MMP-13濃度，從而減緩細胞外基質（ECM）的降解改善心功能，這可能是辛伐他汀抗心衰作用機制之一。

【關鍵詞】 辛伐他汀； 阿霉素； 心力衰竭； 左室重構； MMP-13； hs-CRP

心力衰竭（heart failure，HF）是由諸多原因造成心肌損傷或壞死，繼而引發心臟結構和功能改變，最終導致心室舒張和/或收縮功能低下，不能滿足全身各器官的代謝需求并導致體/肺循環淤血。盡管數十年來得益于理念、技術和藥物的進步，然慢性心衰（chronic heart failure，CHF）5年存活率不足50%，已給全社會和患者家庭帶來沉重的經濟負擔，成為心血管領域需要攻堅的最后堡壘。因此如何及早防控HF發生發展尤為重要。迄今研究表明，HF發生發展的基本機制是心室重塑。其中，基質金屬蛋白酶（MMPs）是一組降解基質蛋白的水解酶，在心室重塑過程中具有重要作用，可降解所有細胞外基質（ECM）成分[1]。C反應蛋白（CRP）是非特異性急性反應蛋白，HF時其血漿中水平升高，是判斷組織損傷程度的較敏感的指標，亦是判斷心肌受損程度的重要指標。辛伐他汀作為降膽固醇藥物在臨床廣泛應用，近20年來，關于其降脂外的多效性被廣為研究，如辛伐他汀抑制心肌細胞肥厚從而預防心衰的作用受到廣泛關注[2-4]。鑒于此，本文探討辛伐觀察辛伐他汀對慢性心力衰竭的心功能的影響和辛伐他汀抗心力衰竭的分子機制，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 清潔級雄性新西蘭大耳白兔60只，體質量（1200±30）g，由新鄉醫學院動物中心提供。全部動物飼養在正常晝夜周期的環境中，自由飲水，室溫控制在（22±2）℃。

1.2 主要儀器與試劑 美國Bio-rad imark酶標儀，高速冷凍離心機（德國Heraeus公司），RM6240多道生理信號采集處理系統（成都儀器廠），不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫療器械廠），精密電子天平（FA1004）（上海精宏電子儀器有限公司），微量加樣器（德國eppendorf公司），辛伐他汀片購自河南省迪康醫藥有限責任公司，氯化鈉注射液（河南天方藥業股份有限公司），鹽酸阿霉素（上海研生生化試劑有限公司），兔子MMP-13 ELISA試劑盒、兔子hs-CRP ELISA試劑盒（R&D）。

1.3 方法

1.3.1 動物模型制作及取材 60只雄性新西蘭大白兔適應性喂養1周后隨機分為正常對照組（CON組，12只）、心衰模型組（CHF組，7只）、CHF+辛伐他汀低劑量組（LD-SIM，8只）、CHF+辛伐他汀中劑量組（MD-SIM，9只）、CHF+辛伐他汀高劑量組（HD-SIM，9只）。正常對照組（CON組）給予耳緣靜脈等體積生理鹽水，每周1次，共10周。其余組均給予生理鹽水注射液稀釋的鹽酸阿霉素，按4 mg/kg，每周1次，共10次，而辛伐他汀干預組同時給予低、中、高劑量辛伐他汀灌胃治療，劑量分別為0.3 mg/（kg·d），1.5 mg/（kg·d），3.0 mg/（kg·d）。藥物干預10周后，將兔稱體重（BW）后麻醉致死，迅速取血液、心臟及血管標本并分別進行相應標本處理。

1.3.2 心功能測定 動物稱重后，用3%戊巴比妥鈉

（30 mg/kg）腹腔注射麻醉，切開頸部、分離右頸總動脈，將之切開后并逆行插入內充0.1%肝素-生理鹽水的導管至左心室，停置20 min后，利用RM6240多道生物信號采集處理系統，記錄壓力曲線，計算出mLVSP（平均心室收縮壓）、mLVDP（平均心室舒張壓）、mLVP（平均心室內壓）、HR（心率）、mdP/dtmax（平均心室內壓最大上升速率）、m-dP/dt max（平均等容舒張期室內壓最大下降速率）、mt-dP/dtmax（平均心室開始收縮至發生dp/dtmax的間隔時間）。

1.3.3 心肌肥厚指數計算 處死兔子并取血后，迅速取出心臟，分離心底部大血管、心房及右心室，用預冷的生理鹽水充分沖洗，濾紙吸干，用分析天平稱取心肌重量（HW），左心室（含室間隔）濕重（LVW），以全心/體重和左心室濕重/體重計算心肌重量指數（CPI，HW/BW，mg/g）和左心室心肌肥厚指數（LVHI，LVW/BW，mg/g）。

1.3.4 血漿中CRP、MMP-13濃度的測定 按ELISA試劑盒說明配制標本處理所需的抗凝劑，肝素10 U/mL，動物處死后立即取血注入預冷的內含肝素的試管中，混勻后即刻放入冰水中冷卻，隨后4 ℃ 3000 rpm離心15 min，取上清液，分別按試劑盒步驟檢測CRP、MMP-13的濃度。endprint