鴨病毒性肝炎Ⅰ型疫苗中和抗體效果實(shí)驗(yàn)

徐新紅 屠益平 黃忠/上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

鴨病毒性肝炎Ⅰ型疫苗中和抗體效果實(shí)驗(yàn)

徐新紅 屠益平 黃忠/上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

鴨病毒性肝炎是由鴨肝炎病毒(DHV)引起的一種雛鴨高度致死性傳染??；該病主要侵害4周齡以內(nèi)的雛鴨，特別是不足一周齡的無(wú)母源抗體的雛鴨最易感，病鴨突然發(fā)病，病程短促，數(shù)小時(shí)即死亡，死亡率高達(dá)90%。DHV有三種血清型，無(wú)交叉保護(hù)作用。目前，I型呈世界性分布，II型和III型鴨病毒性肝炎分別局限于英國(guó)和美國(guó)，在國(guó)內(nèi)，以I型鴨病毒性肝炎流行為主，目前國(guó)內(nèi)對(duì)鴨病毒性肝炎主要是以治療為主，當(dāng)雛鴨發(fā)病時(shí)使用鴨肝炎抗體進(jìn)行治療，這樣會(huì)增加飼養(yǎng)成本并影響雛鴨的生長(zhǎng)性能。由于此病發(fā)病急，死亡率高，目前最好的方法還是以預(yù)防為主。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）在臨床上的應(yīng)用，使用雞胚中和試驗(yàn)對(duì)不同劑量鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）雛鴨的血清進(jìn)行抗體檢測(cè)，，以確定該疫苗株在臨床應(yīng)用的效果情況，同時(shí)確定鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）適用于該地區(qū)雛鴨的最佳免疫劑量。

一、材料

1.鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司提供。

2.雞胚無(wú)特定病原(SPF)由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司提供。

3.孵化器、照蛋器、微量移液器、37℃孵化器、微量注射器。

二、方法

1.分組。廣州某櫻桃谷種鴨養(yǎng)殖場(chǎng)，種鴨沒(méi)有注射鴨病毒性肝炎I型疫苗，1日齡雛鴨6000只，分為A、B兩個(gè)組，每個(gè)組3000只，A組1日齡雛鴨頸部皮下注射鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）1羽份，B組1日齡雛鴨鴨頸部皮下注射鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）1.5羽份。在接種完疫苗后3、7、10、14、21天分別在兩個(gè)組隨機(jī)抽取30只雛鴨，取血，分離血清待檢測(cè)。

2.方法。雞胚中和實(shí)驗(yàn) 將待檢測(cè)血清樣品混勻后進(jìn)行1∶2倍比稀釋（1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128），稀釋鴨肝炎病毒至200ELD50/0.2 ml（CH60株，5000倍稀釋），不同稀釋倍數(shù)的血清與病毒1:1混勻，37℃作用1h，每個(gè)血清滴度接種9日齡SPF雞胚5枚，雞胚尿囊腔接種，接種0.2ml/胚，同時(shí)設(shè)置5枚生理鹽水接種雞胚對(duì)照，接毒后針孔封蠟，37℃孵化器繼續(xù)孵化7 d，Reed-muench法計(jì)算中和效價(jià)。

三、結(jié)果分析

表-1 不同劑量鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）免疫后中和抗體效價(jià)

結(jié)果分析：結(jié)果表明使用劑量1羽份與1.5羽份時(shí)，接種后在3日齡就有保護(hù)力，7日齡達(dá)到堅(jiān)實(shí)的保護(hù)力，到21日齡對(duì)雛鴨仍可完全保護(hù)，注射1.5羽份劑量疫苗比1羽份劑量疫苗的中和抗體效價(jià)值要略高。

四、討論

鴨病毒性肝炎是雛鴨的一種高致病性的，傳播迅速的病毒性傳染病。而我國(guó)各地區(qū)主要是以Ⅰ型鴨病毒性肝炎流行為主，廣東是以Ⅰ型鴨病毒性肝炎流行為主，我們所在廣東某種鴨場(chǎng)，該養(yǎng)殖場(chǎng)種鴨沒(méi)有接種鴨病毒性肝炎I型疫苗，每一批雛鴨在3日齡左右開(kāi)始發(fā)病，每次發(fā)病都要使用鴨肝炎抗體進(jìn)行治療，但是到了10日齡左右雛鴨又開(kāi)始發(fā)生鴨病毒性肝炎，還有使用鴨肝炎抗體進(jìn)行治療。而這樣的模式導(dǎo)致養(yǎng)殖場(chǎng)增加飼養(yǎng)成本，同時(shí)會(huì)使櫻桃谷鴨生長(zhǎng)緩慢，有的雛鴨還會(huì)變成僵鴨，影響出欄時(shí)間。

我們對(duì)該櫻桃谷鴨養(yǎng)殖場(chǎng)，1日齡雛鴨分別使用1羽份和1.5羽份的鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株），從使用疫苗后開(kāi)始觀察鴨群情況，從1日齡到21日齡，雛鴨沒(méi)有發(fā)生鴨病毒性肝炎，而且從臨床上觀察用鴨病毒性肝炎I型疫苗的雛鴨比之前沒(méi)有使用疫苗的雛鴨生長(zhǎng)情況要好。由于該養(yǎng)殖場(chǎng)鴨病毒性肝炎是一種常發(fā)疫病，所以我們?cè)诮臃N疫苗時(shí)使用了2個(gè)不同的劑量，以確定能保護(hù)雛鴨的最佳免疫劑量，從臨床觀察和雞胚中和試驗(yàn)結(jié)果看，1.5羽份劑量雖然比1羽份的抗體效價(jià)要高一些，但是1羽份已經(jīng)可以保護(hù)雛鴨。在現(xiàn)地檢測(cè)的雛鴨中和抗體效價(jià)與我們?cè)趯?shí)驗(yàn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)所檢測(cè)的抗體要略低一些，這與養(yǎng)殖場(chǎng)的環(huán)境和飼養(yǎng)條件有關(guān)。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)證明在現(xiàn)地中鴨病毒性肝炎I型疫苗（CH60株）可以很好的預(yù)防鴨病毒性肝炎的發(fā)生。

（略）