Graves病患者血清IL-3、IL-2及sIL-2R的表達(dá)研究

章步文，馮云飛

Graves病患者血清IL-3、IL-2及sIL-2R的表達(dá)研究

章步文，馮云飛

目的探討Graves病患者治療前后血清白介素（IL）-3、IL-2及白介素2受體（sIL-2R）的表達(dá)研究。方法

白介素；Graves病；白介素2受體

并且與甲狀腺疾病發(fā)病及病情控制密切相關(guān)[1]。本研究旨在了解甲狀腺疾病患者免疫功能狀態(tài)與IL-3等細(xì)胞因子的關(guān)聯(lián)及其臨床意義，為GD患者診斷與治療中臨床應(yīng)用IL-3等細(xì)胞因子指標(biāo)提供理論依據(jù)。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料初診GD患者均為浙江省湖州市中醫(yī)院2008年10月至2009年6月內(nèi)科門診和住院散發(fā)的無親緣關(guān)系的患者，共37例納入觀察組，其中男14例，女23例；年齡15～63歲，平均（39.2±14.0）歲。另設(shè)健康對照組37例，均為隨機(jī)選取在本院體檢的健康查體者，心、肝、腎功能正常，無甲狀腺疾病及甲狀腺疾病家族史，甲狀腺功能正常，甲狀腺自身抗體陰性。其中男15例，女22例；年齡25～57歲，平均（37.6±12.9）歲。兩組一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05），具有可比性。

根據(jù)臨床表現(xiàn)及檢測血清總甲狀腺素（TT4）、總甲狀腺三碘原氨酸（TT3）、游離甲狀腺素（FT4）、游離甲狀腺三碘原氨酸（FT3）、超敏促甲狀腺素（sTSH）而確診GD。其診斷符合下列標(biāo)準(zhǔn)：（1）有典型的甲狀腺功能亢進(jìn)的癥狀和體征；（2）FT3、FT4均高于正常，TSH低于正常；（3）甲狀腺自身抗體不同程度的陽性。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）其他原因引起的甲狀腺功能異常者；（2）合并浸潤性突眼或合并其他自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、銀屑病、多發(fā)性硬化（MS）及重癥肌無力（MG）等；（3）嚴(yán)重心、肝、腎疾病。（4）其他免疫性或感染性疾病及妊娠婦女。

1.2 研究方法觀察組于治療前早晨8:00空腹采靜脈血5 ml，以3 000 r/min離心，分離血清后分裝，一部分血清在－20℃以下凍存待測外，余送作TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、甲狀腺球蛋白抗體（TGA）、甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）檢查。藥物治療后數(shù)月，病情相對穩(wěn)定，甲狀腺功能恢復(fù)正常后再次采血標(biāo)本。正常對照組在查體時(shí)留取血樣，處理同上。IL-3、IL-2、白介素2受體（sIL-2R）試劑盒（生產(chǎn)批號20090325）為美國Gengyme公司產(chǎn)品，由深圳晶美公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用配對資料檢驗(yàn)；率的比較采用2檢驗(yàn)。＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后甲狀腺功能水平的比較治療前觀察組患者TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TPOAb及TGAb均顯著高于對照組（均＜0.01）。觀察組患者經(jīng)治療后TT4、TT3、FT4、FT3及sTSH均恢復(fù)正常，治療前后差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.01）；TPOAb與TGAb治療前后均在正常范圍內(nèi)，經(jīng)治療后TPOAb顯著下降（＜0.01），TGAb前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（=0.54，＞0.05）。見表1。

表1 兩組治療前后甲狀腺功能水平的比較

2.2 對照組及GD患者治療前后IL-3、IL-2、sIL-2R表達(dá)水平的比較觀察組患者IL-3、IL-2、sIL-2R水平與對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.01）；觀察組患者經(jīng)治療后IL-3、IL-2表達(dá)水平較治療前顯著升高，而sIL-2R的表達(dá)水平較治療前降低，治療前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.05）。見表2。

2.3 觀察組治療前IL-3、IL-2、sIL-2R表達(dá)水平與甲狀腺激素相關(guān)性觀察組治療前患者外周血IL-3、IL-2水平與T T4、TT3、FT4、FT3水平均呈負(fù)相關(guān)（=－0.504、－0.603、－0.624、－0.589、－0.762、－0.654、－0.587、－0.609，均＜0.05），而sIL-2R水平與TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈正相關(guān)（=0.532、0.487、0.614、0.578，均＜0.05）。

表2 兩組治療前后IL-3、IL-2、sIL-2R的表達(dá)

3 討論

甲狀腺細(xì)胞能產(chǎn)生腫瘤壞死因子（TNF-）、干擾素（IFN-）、IL-1及IL-3等細(xì)胞因子[2]。IL-3具有顯著的免疫調(diào)節(jié)作用，已有研究表明IL-3能促進(jìn)外周血T細(xì)胞的增殖。在IL-2存在的條件下，它還能促進(jìn)B細(xì)胞的增殖及分化，并能誘導(dǎo)、激活B細(xì)胞分泌免疫球蛋白，IL-3的這些作用是通過誘導(dǎo)B細(xì)胞表達(dá)IL-2R來實(shí)現(xiàn)的。

IL-2是免疫調(diào)控因子，具有促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖分化，增強(qiáng)Ts細(xì)胞活性作用[3-4]。因此，IL-2減少會(huì)影響Ts細(xì)胞的分化，成熟和增殖，體內(nèi)免疫自穩(wěn)機(jī)制不能有效發(fā)揮監(jiān)視作用。而目前認(rèn)為Ts細(xì)胞下降不能抑制“禁株”細(xì)胞是GD發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，故IL-2減少可能與GD發(fā)病有關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)IL-2受體有二種形式，膜IL-2R（mIL-2R）及sIL-2R。sIL-2R是mIL-2R的主要廓清形式，二者都參與了對II-2的調(diào)節(jié)。sIL-2R可消耗IL-2，抑制IL-2依賴的免疫反應(yīng)，并加重體內(nèi)IL-2的不足，使免疫功能紊亂。因此，IL-2在GD發(fā)病中，還明顯受到受體等多方面的調(diào)節(jié)。IL-2對甲狀腺細(xì)胞的合成、分泌及分化功能有著重要的影響。有學(xué)者對甲狀腺功能異常伴有IL-2水平降低的高甲狀腺素血癥患者，給予外源性的IL-2補(bǔ)充治療，使患者的甲狀腺激素水平降至正常，并避免部分患者復(fù)發(fā)[5]。直接測量血清IL-2的水平，可以幫助進(jìn)一步證實(shí)由GD引起的甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)。

IL-2/IL-2R與甲狀腺疾病的相關(guān)研究已有報(bào)道[6-7]，甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥未經(jīng)治療組及甲亢未治療合并有突眼的患者血清slL-2R明顯升高，IL-2明顯降低。患者經(jīng)過抗甲狀腺藥物治療后sIL-2R明顯降低；Graves病患者血清slL-2R均與FT3呈正相關(guān)。高水平的sIL-2R是淋巴細(xì)胞激活的產(chǎn)物，并且可控制這一免疫功能失常。T細(xì)胞釋放受體，同時(shí)降低可利用的IL-2水平。在體外細(xì)胞培養(yǎng)中，也發(fā)現(xiàn)GDsIL-2R增加而IL-2水平下降。這種降調(diào)節(jié)可能為GD發(fā)病過程中免疫調(diào)控失衡時(shí)迅速建立反饋性相互制約。本研究中GD患者sIL-2R值增高，IL-2水平降低，與大量國內(nèi)外研究一致[7]，表明細(xì)胞大量活化，增高的sIL-2R與IL-2結(jié)合，可阻礙IL-2與膜IL-2R結(jié)合，從而避免Th細(xì)胞的進(jìn)一步增殖，有助于減輕免疫反應(yīng)強(qiáng)度，這也是機(jī)體自我保護(hù)的一種機(jī)制。研究還表明，GD患者sIL-2R水平與甲狀腺激素包括TT4、TT3、FT4、FT3均呈顯著正相關(guān)，并且隨著甲狀腺激素水平的升高或降低，sIL-2R水平亦呈相應(yīng)的變化趨勢；但是有研究證明，不僅GD患者血清sIL-2R水平升高，其他原因所致的甲亢如毒性多結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、毒性甲狀腺瘤、橋本氏甲狀腺炎伴甲狀腺功能亢進(jìn)患者血清sIL-2R水平均明顯升高。因此認(rèn)為sIL-2R與自身免疫性有關(guān)，sIL-2R可能作為體內(nèi)淋巴細(xì)胞激活的一項(xiàng)獨(dú)立指標(biāo)，而不只是繼發(fā)于高甲狀腺素血癥的改變，并且其與疾病的活動(dòng)性密切相關(guān)，定期隨訪sIL-2R水平對于GD的病情監(jiān)測可能有重要意義。

本研究發(fā)現(xiàn)，GD患者初發(fā)時(shí)較健康對照組研究對象其血清sIL-2R水平顯著增高，而IL-2及IL-3水平顯著降低，隨著甲狀腺功能的恢復(fù)，IL-2及IL-3水平逐漸升高，sIL-2R水平降低。IL-3、IL-2水平與TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈負(fù)相關(guān)，而sIL-2R含量與TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈正相關(guān)。說明GD初發(fā)時(shí)高甲狀腺素血癥與血清中IL-2、IL-3水平降低有關(guān)。治療后IL-3水平上升非常明顯，組間較治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這一現(xiàn)象不僅能反映自體免疫反應(yīng)的動(dòng)態(tài)，同時(shí)也能反映甲狀腺細(xì)胞的功能狀態(tài)，因此認(rèn)為IL-3有可能作為了解GD病情的檢測指標(biāo)，同時(shí)提示動(dòng)態(tài)觀察血清IL-3水平或許對判斷GD的轉(zhuǎn)歸具有一定的臨床價(jià)值。當(dāng)然，該研究樣本量少，細(xì)胞因子在GD發(fā)生發(fā)展中的確切作用仍需進(jìn)一步研究。

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10.3969/j.issn.1671-0800.2014.04.029

R581

A

1671-0800(2014)04-0423-03 Graves病（簡稱GD）又稱毒性彌漫性甲狀腺腫或Basedow病，是一種伴甲狀腺激素（TH）分泌增多的器官特異性自身免疫病。已有研究提示，細(xì)胞因子對于甲狀腺細(xì)胞具有重要的免疫調(diào)節(jié)和免疫穩(wěn)定作用。細(xì)胞因子的不平衡能夠直接或間接地導(dǎo)致甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞（TEC）生長、分化的異常和免疫功能的紊亂，從而導(dǎo)致甲狀腺疾病，特別是自身免疫性甲狀腺病（ATID）的發(fā)生和發(fā)展，

浙江省衛(wèi)生廳資助項(xiàng)目（2009B058）

313000浙江省湖州，湖州市中醫(yī)院(章步文)；浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院（馮云飛）

章步文，Email：1046993395@qq.com

37例初診Graves病的甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥患者，在甲亢治療前后分別抽血檢測IL-3、IL-2及sIL-2R，余送作總甲狀腺素（TT4）、總甲狀腺三碘原氨酸（TT3）、游離甲狀腺素（FT4）、游離甲狀腺三碘原氨酸（FT3）、超敏促甲狀腺素（sTSH）、甲狀腺球蛋白抗體（TGA）及甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb），比較治療前后IL-3、IL-2及sIL-2R的表達(dá)水平。健康對照組37例，進(jìn)入研究時(shí)抽血檢測IL-3、IL-2及sIL-2R，余送作TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TGA及TPOAb水平。結(jié)果治療前甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)患者血清TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TPOAb、TGAb以及IL-2、IL-3、sIL-2R水平與健康對照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.05）。甲狀腺功能亢進(jìn)癥患者經(jīng)治療后IL-3、IL-2表達(dá)顯著升高，sIL-2R的表達(dá)水平降低，治療前后IL-3、IL-2、sIL-2R的表達(dá)水平有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.01）。IL-3、IL-2表達(dá)與甲狀腺激素水平呈負(fù)相關(guān)，sIL-2R與甲狀腺激素水平呈正相關(guān)（＜0.05）。結(jié)論甲狀腺功能亢進(jìn)癥患者經(jīng)治療后IL-3、IL-2表達(dá)顯著升高，sIL-2R的表達(dá)水平降低。口服抗甲狀腺藥物有免疫調(diào)節(jié)作用，可能與IL-3的免疫調(diào)節(jié)相關(guān)。