清熱藥解熱作用的文獻再評價

張 涓，李曉會，馬麗娜，張恩戶

(陜西中醫學院藥理教研室，陜西 咸陽 712046)

清熱藥是以清解里熱為主要作用的藥物，主要用于熱病高熱、痢疾、臃腫瘡毒、以及目赤腫痛、咽喉腫痛等各種里熱證候。大部分清熱藥都有解熱作用，對實驗性熱證的各個環節都有抑制作用。全國高等中醫藥院校研究生規劃教材《中藥學》收載的清熱藥有抗病原體、抗細菌毒素、解熱、抗炎、調節免疫功能、抗腫瘤等作用。為了驗證清熱藥解熱作用的可靠性，本文以該教材中一部分清熱藥的解熱作用為研究對象，通過文獻查閱、歸納、整理，根據藥物解熱作用的評價原則，進行文獻再評價，以明確其解熱作用。

1 藥物解熱作用評價

1.1 發熱的原因

發熱是由發熱激活物作用于機體，激活內生致熱原細胞產生和釋放內生致熱原(endogenous pyrogen，EP)，再經一些后繼環節引起體溫升高。外源性致熱原的種類甚多，主要包括：(1)各種微生物病原體及其產物，如細菌、病毒、真菌及細菌毒素等；(2)炎性滲出物及無菌性壞死組織；(3)抗原抗體復合物；(4)某些類固醇物質，特別是腎上腺皮質激素的代謝產物原膽烷醇酮；(5)多糖體成分及多核苷酸、淋巴細胞激活因子等。內源性致熱主要是一些是由免疫細胞和部分非免疫細胞合成和釋放的細胞因子，具有細胞間信息傳遞、免疫調節作用的一大類小分子蛋白質或多肽。外源性致熱原通過激活血液中的中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和單核-吞噬細胞系統，使其產生并釋放內生致熱原，又稱白細胞致熱原，如白介素(IL-1)，腫瘤壞死因子(TNF)和干擾素等。通過血-腦脊液屏障直接作用于體溫調節中樞的體溫調定點，另外可通過交感神經使皮膚血管及豎毛肌收縮，停止排汗，散熱減少，體溫升高而引起發熱。

此外，還有如體溫調節中樞直接受損以及甲亢等引起產熱增多或心力衰竭等散熱減少的疾病，亦可引起發熱。總之，發熱是由于各種原因導致產熱增多或散熱減少所致。

1.2 藥物解熱作用的評價方法

通過查閱文獻可知，常用的解熱作用實驗方法為：先在正常的動物體內注入一定量的致熱原，造成動物發熱模型，然后給予受試藥物治療，觀察受試藥物有無解熱作用，解熱強度如何。常用致熱源有生物刺激因子(如傷寒、副傷寒疫苗、細菌培養液、啤酒酵母混懸液等)或化學刺激因子(如內毒素、二硝基苯酚、松節油、蛋白胨等)，采用皮下或靜脈注射給藥，引起動物發熱。實驗動物常用兔和大鼠。

雖然絕大多數引起發熱的方法都是通過機體產熱增加，散熱降低，體溫升高，但畢竟不同的外熱原致熱因子在起始階段作用途徑不同，加之定量藥理學研究所要求的致熱刺激的強度應盡可能穩定且易于控制，因而實驗中必須根據所研究的目的和條件選擇相應的致熱方法。如酵母性發熱、硝基苯酚性及內毒素性發熱在我國解熱實驗研究中使用較多。另外，實驗動物的選擇也對實驗結果有著一定的影響，如國內大鼠對內毒素所致發熱反應一般不恒定，個體差異大，內毒素量不宜控制，一定劑量下引起發熱，而劑量稍大則體溫反降。故評價清熱藥解熱作用的方法有酵母致熱法、2,4-二硝基苯酚致熱法、內毒素致熱法、三聯菌苗致熱法、及細菌致熱法等。

2 再評價方法

2.1 文獻收集

文獻收集以新世紀全國高等中醫院校規劃教材《中藥學》記載的具有解熱作用的清熱藥為對象，查閱有關實驗性研究文獻，以讀秀duxiu.com學術搜索、中國知網http：//www.cnki.net文獻數據庫(1994-2013年)、萬方WANFANG DATA數據庫為主(1998-2013年)，西文生物醫學期刊和pubmed其他數據庫為輔進行檢索、查閱。以“清熱作用”、“解熱作用”、“清熱”、“解熱”為關鍵詞檢索，查閱1993年至2013年間公開發表的相關清熱藥單味中藥解熱作用的實驗研究期刊文獻。

2.2 文獻整理

詳細查看文獻信息，內容包括供試藥制備、給藥途徑與劑量、動物品系、實驗方法、陽性藥結果、實驗結果與結論、作者及工作單位、刊物與發表年代等信息。研讀文獻，摘錄相關信息并填入表格，進行分析(結果見表1)。

2.3 中藥解熱作用的評定標準

評價藥物解熱作用的實驗方法較多，大多數選用外源性致熱原致熱的方法，但因不同的致熱原致熱因子在起始階段作用途徑不同，因此，單用一種方法評價藥物的解熱作用，帶有片面性。另外，中藥藥理作用復雜，藥理作用間也會相互影響，所以中藥藥理作用的評價應符合綜合評價和重復性等原則。根據上述原則，確定評定標準：應采用3種以上(包括3種)不同的模型，每種評價方法應進行不少于2次的重復性實驗，結果均為有效。

3 結果

結果表明，黃芩[1-4]、柴胡[5-8]、青蒿[9-11]、板藍根[12-13]、金銀花[14-15]解熱作用的研究文獻均超過10篇，而且同一實驗方法重復5次以上。其中有關柴胡解熱作用的研究文獻最多，以酵母致熱法、LPS誘導致熱法和內毒素致熱法為主，每種實驗方法重復5次以上，均對發熱大鼠的體溫有顯著的抑制作用。柴胡的相關實驗研究文獻有47篇，對發熱大鼠均具有明顯的解熱作用。青蒿，板藍根，金銀花的文獻數分別為15、13、17篇，對酵母致熱及內毒素致熱的實驗大鼠體溫均有明顯抑制作用。說明上述5味中藥解熱作用確切。連翹[16]有研究文獻7篇，且同一實驗方法重復了5次，表明連翹有解熱作用。

表1 清熱藥解熱作用研究文獻一覽表

注：-表示未見原始研究文獻，*表示解熱作用弱或沒有解熱作用

大青葉[17]有7篇文獻，且分別采用了酵母致熱法，傷寒副傷寒菌苗混合制劑致熱法和內毒素致熱法，每種方法都重復了2次，但是研究文獻比較少，實驗證據不足。忍冬[18]有3篇文獻采用酵母致熱法進行，實驗方法較單一。玄參[19]、地骨皮[20]、石膏[21]、梔子[22]、黃連[23]、丹皮[24]、半枝蓮[25]只采用了1～2種實驗方法，且文獻數較少。故上述9種清熱藥實驗依據不足。黃柏解熱方面的研究文獻只有一篇，且實驗結果表明黃柏沒有明確的解熱作用。知母，苦參，生地黃，蒲公英未見相關研究文獻。

4 討論

《中藥學》(中國中醫藥出版社，2009)中收載的具有解熱作用的20味清熱藥解熱作用的研究文獻共搜索到158篇，柴胡類論文有47篇，為最多，有的藥物未見相關研究文獻。從已有文獻分析可以看出，大多數的實驗研究方法主要集中在對外源性致熱原致熱后解熱效應的觀察。在這些文獻中，酵母致熱法約占總數的48.7%，二硝基苯酚致熱法占8.22%，內毒素致熱法占25.3%，傷寒副傷寒菌苗混合制劑致熱法占11.4%。有些文獻憑借一兩種實驗就下結論，缺乏可重復性；有些有統計學問題。因此有必要規范中藥解熱作用的評價方法，如實驗方法、供試藥制備、給藥途徑、重復次數等。鑒于此，本文確定中藥解熱作用的評定標準：應采用3種以上(包括3種)的不同的模型，每種模型應有不少于2次的重復性實驗，結果均為有效。按照此標準對《中藥學》教材收載的具有解熱作用的20種清熱藥進行文獻再評價結果表明，黃芩、柴胡、青蒿、板藍根、金銀花、連翹作用確切，黃連、半枝蓮、地骨皮、忍冬、玄參、石膏、大青葉、牡丹皮、梔子實驗依據不足，黃柏無解熱作用，知母、苦參、蒲公英、生地黃、赤芍未見相關研究文獻。單味藥未見相關研究文獻，一則可能是該中藥解熱作用實驗依據不足，二則可能是該中藥臨床通常是配伍應用，所以沒有單味藥的實驗研究，下一步應該深入研究。在本文研究中，該評定標準可行，可操作性強。

發熱的產生是多因素、多途經綜合作用的結果。從已有文獻來看，清熱藥解熱作用及其機理的研究還比較孤立和分散，缺乏某一水平的多位點或從外周到中樞縱向通路的綜合研究，且中藥的劑量及起效時間的長短，均不一致，藥理作用復雜，有可能相互影響，亦受實驗條件的限制。因此對具有解熱功效的中藥進行解熱作用評價時，要根據主治病癥、發熱類型等選擇適當的動物模型進行綜合評價，最好按照盲法設計實驗。

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