HPLC法測定鹽酸伊伐布雷定膠囊的含量

呂義強，王俠，張朋言，王長江

（青島國風藥業股份有限公司，山東青島266000）

HPLC法測定鹽酸伊伐布雷定膠囊的含量

呂義強，王俠，張朋言，王長江

（青島國風藥業股份有限公司，山東青島266000）

目的建立高效液相色譜法測定鹽酸伊伐布雷定膠囊含量的方法。方法采用Ultimate XB－C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流動相為0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（用氫氧化鈉試液調節pH值為6.8）－乙腈（70∶30），檢測波長為285 nm，流速為1.0 mL·min－1。結果伊伐布雷定在0.06～0.12 mg·mL－1的濃度范圍內具有良好的線性關系（r＝0.999 8），平均回收率為99.3%，RSD為1.3%（n＝9）。結論本法簡便、快速、準確，可用于鹽酸伊伐布雷定膠囊的質量控制。

高效液相色譜法；鹽酸伊伐布雷定膠囊；含量測定

伊伐布雷定是一種特異性的If離子通道阻斷劑，通過選擇性干預If通道來控制起搏功能，能夠減慢心率［1］。目前常用的β受體阻滯劑雖然亦能減慢心率，但常伴有使心肌收縮力減弱的副作用.而伊伐布雷定則沒有這種副作用［2］。伊伐布雷定口服給藥后，能迅速和較徹底地吸收，在禁食條件下，1 h后能達到血藥峰濃度［3］。并且在冠心病患者人群中具有很好的臨床耐受性［4］。本文建立了RPHPLC法測定鹽酸伊伐布雷定膠囊含量的方法，準確、可靠、簡便、快速，可用于鹽酸伊伐布雷定膠囊的質量控制。

1 儀器與試藥

Agilent1200系列高效液相色譜儀（G1311A四元泵；G1314B VWD檢測器）；電子天平（METTLER，AE240）；乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑為分析純。鹽酸伊伐布雷定膠囊（由青島國風藥業股份有限公司提供，批號：130501、130502、130601），鹽酸伊伐布雷定工作對照品（原料精制后標定，批號：130301，含量為99.5%）。

2 方法與結果［5］

2.1 色譜條件 采用Ultimate XB－C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm）；以0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（用氫氧化鈉試液調節pH值為6.8）－乙腈（70∶30）為流動相，檢測波長：285 nm，流速為1.0 mL·min－1，進樣量10μL。理論板數按伊伐布雷定峰計算不低于3 000。

2.2 溶液的制備 取本品20粒，求出平均裝量，將內容物混勻，精密稱取適量（約相當于伊伐布雷定10 mg），置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。另取鹽酸伊伐布雷定工作對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋制成每1 mL中約含0.1 mg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 系統適用性試驗 取“2.2”項下的供試品溶液及對照品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進行測定，記錄色譜圖；伊伐布雷定峰的理論板數為13 065，與相鄰雜質峰的分離度大于1.5，圖譜見圖1。

圖1 鹽酸伊伐布雷定膠囊含量測定HPLC圖譜

2.4 專屬性試驗 按“2.1”項下的色譜條件，按處方比例稱取空白輔料，加流動相溶解，定容，過濾，取續濾液依法測定，圖譜見圖1，空白輔料對本品的含量測定無干擾。

2.5 線性與范圍試驗 取鹽酸伊伐布雷定工作對照品約53.9 mg（相當于伊伐布雷定50 mg），精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取3、3.5、4、4.5、5、6 mL，置25 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積A對濃度C進行線性回歸，得回歸方程為：A＝20 895C＋896，r＝0.999 8，表明伊伐布雷定在濃度0.06～0.12 mg·mL－1范圍內具有良好的線性關系。

2.6 精密度試驗 稱取鹽酸伊伐布雷定工作對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成濃度為0.1 mg·mL－1的溶液，重復進樣6次。結果，伊伐布雷定峰面積的RSD為0.26%。

2.7 回收率試驗 取鹽酸伊伐布雷定工作對照品適量，精密稱定，并按處方量加入輔料，置研缽中研細混勻，分別精密稱取適量（約相當于含伊伐布雷定16、20、24 mg），各3份，分別置200 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。另取鹽酸伊伐布雷定工作對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成每1 mL中約含0.1 mg的溶液，作為對照品溶液。取上述兩種溶液，按

“2.1”項下的色譜條件，精密量取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。測得平均回收率99.3%，RSD為1.3%（n＝9）。

2.8 穩定性試驗 稱取鹽酸伊伐布雷定工作對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成濃度為0.1 mg·mL－1的溶液，分別于0、1、2、4、6、8 h進樣，測定。結果，伊伐布雷定峰面積的RSD＝0.7%。

2.9 樣品的測定 取“2.2”項下的對照品溶液、供試品溶液，分別精密量取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算含量。3批樣品的含量測定結果見表1。

表1 鹽酸伊伐布雷定膠囊3批樣品含量測定結果

3 討論

取伊伐布雷定對照品溶液，經二極管陣列檢測器檢測，由光譜指數圖可見伊伐布雷定在285 nm波長處有最大吸收，因此選擇285 nm作為檢測波長。對磷酸二氫鉀溶液的濃度及pH值進行了試驗，發現當磷酸二氫鉀溶液的濃度為0.05 mol·L－1、pH值為6.8時峰形最佳；對兩種常用的有機相乙腈和甲醇進行了對比，試驗發現，有機相采用乙腈比甲醇能獲得更好的峰形，與相鄰雜質峰的分離更好；對乙腈與磷酸二氫鉀溶液的比例進行了試驗，以乙腈－0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（30∶70）時最優，保留時間適中，主峰與相鄰雜質峰的分離度符合要求。

綜上所述，本法的專屬性好，精密度、回收率高、操作簡便、準確，可用于鹽酸伊伐布雷定膠囊的含量測定。

［1］梁可，張浩，曹蕾，等.第一個竇房結If電流選擇特異性抑制劑——鹽酸伊伐布雷定的研究進展［J］.中國處方藥，2007，66（9）：18－19.

［2］伊伐布雷定在中國地區的療效臨床實驗即將啟動［J］.心血管病防治知識，2007，12：13.

［3］李楠，曾玉杰，心臟起搏電流抑制劑ivabradine的臨床應用［J］.臨床心血管病雜志，2008，24（12）：957－960.

［4］何躍輝，魏萬林，張靈，等.特異性降低心率藥物——If抑制劑伊伐布雷定在心血管疾病中的應用研究進展［J］.中國偱證心血管醫學雜志，2009，1（5）：308－311.

［5］姚娜，方克忠，劉阿利.HPLC法測定鹽酸伊伐布雷定片的含量［J］.齊魯藥事，2012，31（5）：275－276.

Determ ination of Ivabradine Hydrochloride Capsules by HPLC

LV Yi-qiang，WANG Xia，ZHANG Peng-yan，WANG Chang-jiang
（Qingdao Growful Medicine Co.，Ltd.，Qingdao 266000，China）

ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of Ivbradine Hydrochloride Capsules.MethodsUltimate XB－C18column（4.6 mm×150 mm，5μm）was adopted with 0.05 mol·L－1Potassium dihydrogen phosphate solution（adjust pH to 6.8 with sodium hydroxide）－acetonitrile（70∶30）mixture asmobile phase，detected atwavelength of285 nm and flow rate was 1.0 mL·min－1.ResultsThe ivabradine showed a good linear relationship with the range of0.06～0.12mg·mL－1（r＝0.999 8）.The average recovery was99.3%，and the RSD was1.3%（n＝9）.ConclusionThe method was convenient，rapid and accurate.It can be used for the quality control of Ivabradine Hydrochloride capsules.

HPLC；Ivabradine Hydrochloride Capsules；Determination

R927.2

：A

2095－5375（2014）03－0153－002

呂義強，男，研究方向：新藥研究，E－mail：qiang－1001＠163.com