融水縣家畜布魯氏菌病血清學調查

覃超林

廣西壯族自治區融水縣動物疫病預防控制中心，廣西融水 545300

融水縣家畜布魯氏菌病血清學調查

覃超林

廣西壯族自治區融水縣動物疫病預防控制中心，廣西融水 545300

為進一步了解融水縣家畜布魯氏菌病防控成果，全面了解融水縣家畜布魯氏菌病的流行病學情況，2013年，筆者采用虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗法對轄區內20個鄉鎮的豬100份、牛100份、羊75份血清進行了檢測。結果發現：采用虎紅平板凝集試驗法檢測的275份血清檢出15份陽性（其中豬5份、牛5份、羊5份，且均來自同一個鄉鎮），其余260份血清均為陰性；但采用試管凝集試驗法對虎紅平板凝集試驗陽性的20份樣品進行檢測，結果均為陰性。

布魯氏菌??；家畜；血清流行病學；調查；融水縣

布魯氏菌病（也稱布氏桿菌病，以下簡稱布?。┦怯刹剪斒暇鸬囊愿腥炯倚鬄橹鞯娜双F共患傳染病。家畜中以牛、羊、豬最常發生，感染家畜以流產、不孕、睪丸炎等為特征。融水縣自1971年發現豬布病后，在各級政府的領導和各級業務部門的支持協助下，嚴格按照布病防制程序，采取了“檢、宰、切、健”四大措施，經過多年的努力，1992年11月順利通過自治區布病考核驗收小組的考核驗收，達到穩定控制縣的標準。

控制家畜布病是一項關系到人民群眾身體健康和畜牧業發展的艱巨而長期的任務。為進一步了解融水縣家畜布病防控成果，全面了解融水縣家畜布病的流行病學情況，2013年1～12月，筆者對轄區內20個鄉鎮的豬100份、牛100份、羊75份血清進行了檢測?，F將調查情況報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1）被檢血清。20個鄉鎮，每個鄉鎮隨機抽取未免疫布病疫苗的豬5份、黃/水牛5份、羊5份血清，全縣共采集豬100份、黃/水牛100份、羊75份血清（部分鄉鎮無存欄羊，未采樣），并保存于-20℃待檢。

2）診斷液。布魯氏菌病標準陽性血清、陰性血清，布魯氏菌病虎紅平板凝集抗原，及布魯氏菌病試管凝集抗原均購自青島易邦生物工程有限公司。

1.2 檢測方法及判定標準

1）虎紅平板凝集試驗。先取陽性血清、陰性血清和稀釋液各30 μL分別置于潔凈玻璃片上，各加布病虎紅平板凝集抗原懸液30 μL，攪拌混勻為直徑大小為1 cm，然后搖動1～2 min，于4 min內在黑色背景下觀察結果。當陰性血清對照不凝集（-），陽性血清對照出現凝集（+）時，陰陽性血清對照試驗成立，方可對被檢血清進行判定。被檢血清的檢測與陰陽性血清檢測方法相同，重復上述操作并觀察記錄結果。

結果判定標準：根據凝集反應強度判讀?！?+++”，凝集塊呈菌叢狀，凝塊間液體明顯清亮；“+++”，凝集反應較強；“++”，形成較明顯卷邊，凝集塊間液體稍清亮；“+”，稍有凝集，稍有卷邊形成，凝集物間液體呈紅色；“-”，無凝集，呈均勻粉紅色。以4 min內出現肉眼可見的凝集現象判為陽性（+）；無凝集現象，呈均勻粉紅色者判為陰性（-）。對出現陽性反應的需作試管凝集試驗檢測。

2）試管凝集試驗。抗原作1:20稀釋，被檢豬和羊的血清分別作1:25、1:50、1:100、1:200稀釋，被檢牛血清分別作1:50、1:100、1:200和1:400稀釋，同時設陰、陽性血清對照（陰性血清的稀釋和加抗原的方法與被檢血清相同，陽性血清需稀釋到原有滴度，加抗原的方法與受檢血清相同）。將0.5 mL稀釋后的抗原加入已稀釋好的各血清管中，并振搖均勻，置36～37℃作用24 h，取出觀察并記錄結果。

結果判定標準：按各試管上層液體清亮度判讀?！?+++”，菌體完全凝集，100%下沉，上層液體100%清亮；“+++”，菌體幾乎完全凝集，上層液體75%清亮；“++”，菌體凝集顯著，液體50%清亮；“+”，凝集物有沉淀，液體25%清亮；“-”，凝集物無沉淀，液體均勻渾濁。以產生50%凝集（++）的血清最大稀釋度為受檢血清的效價。牛待檢血清的凝集價在1:100（++）以上者為陽性，1:50（++）為可疑；羊、豬待檢血清的凝集價在1:50（++）以上為陽性，1:25（++）為可疑。對試驗結果為“可疑”的，應在3～4周后重新采血檢驗，以進一步確定檢測結果。

2 結果與分析

1）采用虎紅平板凝集試驗法對所有血清進行初篩，發現275份血清檢出15份陽性（其中豬5份、牛5份、羊5份，且均來自同一個鄉鎮），其余260份血清均為陰性。

2）采用試管凝集試驗法對虎紅平板凝集試驗陽性的20份樣品進行檢測，結果均為陰性。

3討 論

1）本次布病血清學調查中，采用虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗法對融水縣20個鄉鎮的豬100份、牛100份、羊75份血清進行抗體檢測，檢出陽性率為0%。本次所調查的家畜均未免疫過布病疫苗，檢測結果表明所檢測的豬、牛、羊不存在自然感染布病野毒情況，說明融水縣在過去這些年家畜布病的防控工作還是扎實、穩定、有保障的。

2）而對于布病虎紅平板凝集試驗中檢出陽性的樣品為何出現在同一個鄉鎮的原因，筆者經過分析，懷疑采樣材料有問題。經證實，是因該鄉鎮在采樣時由于一次性PE注射器不足，臨時用了該鄉衛生院的十幾支真空采血管，且這些真空采血管內含帶肝素鈉。而抗凝劑可造成布病虎紅平板凝集試驗的假陽性結果[1]。

3）布病的傳播流行影響著畜牧業的可持續發展和人類的身體健康，布病預防和控制工作任重而道遠。在融水縣的這次調查中也發現了一些問題，如：多數養戶文化水平低，對布病了解甚少，不了解布病的傳播途徑和相關防護知識。因此，加強布病防治宣傳、增強自我保護意識、積極采取防控措施，將是融水縣未來布病防控工作的重點之一。

融水縣為布病的老疫區，雖然多年前已經通過了自治區家畜布病控制工作的驗收，但我們仍不能掉以輕心，還應該嚴格實行檢疫制度，對新引進種用家畜進行檢疫，以免造成病原從外地流入。“常規監測+種畜場重點監測、定時+定點監測”，可以做到早發現、早處置，全面掌握疫情動態，為布病防控提供依據，把布病的發生和傳播控制在源頭。

[1]蒙文娟.抗凝劑對布氏桿菌病檢測結果的影響[J].養殖與飼料，2014（7）：10-11.

2014-05-28

覃超林，男，1984年生。