幾種生物農(nóng)藥對三七黑斑病防效及與三七質(zhì)量關系研究

王 勇，陳昱君，楊建忠，劉云芝，張文斌， 向飛軍

（1.文山學院 文山三七研究院，云南 文山 663000；2.云南省三七農(nóng)業(yè)工程實驗室， 云南 文山 663000；3.文山苗鄉(xiāng)三七實業(yè)有限公司， 云南 文山 663000；4.文山華信三七股份有限公司，云南 文山 663000；5. 康美藥業(yè)股份有限公司，廣東 普寧 515300）

幾種生物農(nóng)藥對三七黑斑病防效及與三七質(zhì)量關系研究

王 勇1，2，3，陳昱君1，4，楊建忠1，2，3，劉云芝1，4，張文斌1，2， 向飛軍5

（1.文山學院 文山三七研究院，云南 文山 663000；2.云南省三七農(nóng)業(yè)工程實驗室， 云南 文山 663000；3.文山苗鄉(xiāng)三七實業(yè)有限公司， 云南 文山 663000；4.文山華信三七股份有限公司，云南 文山 663000；5. 康美藥業(yè)股份有限公司，廣東 普寧 515300）

采用田間接種病原后藥劑噴施的方法，開展了7種生物源農(nóng)藥的田間防效試驗，并采用傳統(tǒng)紫外分光光度法對參試處理樣品的三七總皂苷含量進行了測定。結(jié)果顯示：以3%多抗霉素可濕性粉劑和8%寧南霉素水劑的田間防治效果較好，相對防治效果分別達到74.18%和60.6%。各處理間三七樣品的總皂苷含量與對照比較，除阿利寧和抗霉菌素處理略比對照低外，其余參試藥劑處理均略比對照高。結(jié)合田間防治效果比較和三七皂苷含量比較結(jié)果，認為3%多抗霉素可濕性粉劑和8%寧南霉素水劑可應用于三七種植安全生產(chǎn)。

生物農(nóng)藥；控制；三七黑斑病；試驗研究

利用生物農(nóng)藥防治植物病害已有廣泛的應用基礎，如王輝［1］報道用2%春雷霉80 mL/667 m2防治水稻葉瘟防效達70.6%、穗頸瘟防效75.2%；魏靖等［2］應用1.5%多抗霉素水劑防治黑痘病、穗軸褐枯病、灰霉病，均取得較好的控制效果，且對作物安全，但利用生物農(nóng)藥防治三七病害少有報道［3］。三七黑斑病是三七種植區(qū)的一種主要病害，常年發(fā)病率5%～20%，嚴重時高達60%以上［4-5］，生產(chǎn)上通常采用化學藥劑進行防治［6-7］。化學農(nóng)藥的經(jīng)常使用易導致病原產(chǎn)生抗藥性［8］，同時也對環(huán)境造成污染，影響產(chǎn)品質(zhì)量［9］。試驗通過生物農(nóng)藥對三七黑斑病的防治研究，篩選出安全有效的生物農(nóng)藥供生產(chǎn)應用，以減少化學藥劑的使用。

1 材料和方法

1.1 田間藥劑篩選試驗

1.1.1 供試藥劑

選擇在蔬菜、糧食作物上已得到推廣使用的生物殺菌劑，即：A. 3%多抗霉素可濕性粉劑（延邊春雷生物藥業(yè)有限公司）500倍液；B. 8%寧南霉素水劑（黑龍江強爾生化開發(fā)有限公司）800倍液；C. 4%春雷霉素可濕性粉劑（延邊春雷生物藥業(yè)有限公司）1000倍液；D. 4%農(nóng)抗120水劑（綠盾生物制品有限責任公司）1200倍液；E. 阿利寧可濕性粉劑（黑龍江強爾生化開發(fā)有限公司）500倍液；F. 60000單位抗霉菌素水劑（陜西綠盾生物制品有限責任公司）2000倍液；G. 0.3%灰霜特水劑（河北保定亞達化工有限公司）1200倍液；設噴清水為對照。藥劑濃度均為廠商推薦使用量。

1.1.2 試驗地點

試驗點設于硯山縣郊址村民委本院實驗場七園內(nèi)，海拔1530 m，土壤為紅壤土，蔭棚材料為傳統(tǒng)杉樹葉，蔭棚透光率為17.5%。試驗用三七為生長均勻一致、無感病癥狀的三年生三七。試驗采取隨機區(qū)組設計，每處理重復4次，共計28個小區(qū)，小區(qū)面積3.24 m2。

1.1.3 試驗方法

1.1.3.1 菌液制備

采集田間自然發(fā)病的三七黑斑病病葉，放入研缽搗細后用無菌水稀釋，經(jīng)單層沙布過濾，即得人參鏈格孢（Alternaria panax Whetz.） 分生孢子懸浮液，經(jīng)鏡檢，孢子懸浮液濃度為4.16×104個/mL。

1.1.3.2 接種及防治

試驗采用田間噴霧接種法。即用當天配制的人參鏈格孢分生孢子懸浮液對植株葉面進行均勻噴霧接種，每小區(qū)接種孢子懸浮液250 mL。接種后48 h進行第一次噴藥防治，以后每隔7 d噴施一次，共噴施3次。

1.1.4 田間調(diào)查及記錄

施藥前調(diào)查一次三七黑斑病病情，施藥后于15 d、30 d和45 d分別調(diào)查各處理的發(fā)病株數(shù)及病級，計算病情指數(shù)、相對防治效果。三七黑斑病病害分級見表1。

表1 三七黑斑病病情分級表

1.2 三七總皂苷檢測

1.2.1 預處理

將經(jīng)過生物農(nóng)藥防治黑斑病后的三七塊根用清水洗凈，自然晾干后用小型中藥材粉碎機打成粉狀備用。

1.2.2 三七總皂苷的提取

稱取2.0 g的上述各處理三七粉，置于磨口錐形瓶中，準確加入50 mL甲醇后超聲震蕩30 min，冷卻靜置12 h。用小燒杯取上清液10 mL于60 ℃水浴中揮干，再用10 mL蒸餾水溶解已提取的粗總皂苷進行柱層析。以D101大孔吸附樹脂柱進行層析分離，用上述處理好的溶解液上柱，再用三分之二的蒸餾水沖洗除去糖分等水溶性雜質(zhì)，棄去洗脫液再用20 mL 70%的乙醇洗脫總皂苷，用小燒杯收集洗脫液于60 ℃水浴上揮干，即為總皂苷待測物。

1.2.3 測定方法

稱取標準品人參二醇Rg1（中國藥品生物制品檢定所提供）3.1 mg，用甲醇定容10 mL，取該液10、20、40、60、80、100、120 μL置于20 mL的比色管中60 ℃干燥箱中烘干溶劑，取出加新配置的5%香草醛冰乙酸0.2 mL，高氯酸0.8 mL，置于60℃水浴上加熱15 min顯色后，立即取出用流水冷卻，加5 mL冰乙酸，搖勻。于紫外光光度計560 nm處測定吸光度，以吸光度對標準人參二醇的加入量作回歸處理，測得方程為：y=0.61104x+0.09336，r值為0.99856。用10 mL的甲醇溶解總皂苷，取該液30 μL同標準曲線的制備方法進行檢測。

2 試驗結(jié)果

2.1 幾種生物農(nóng)藥田間試驗情況比較

2.1.1 存苗數(shù)差異性比較

由表2可看出，各參試處理小區(qū)平均存苗率均高于對照，說明生物農(nóng)藥在一定程度上可增強植株抗逆性和抗病性，提高三七存活力。其中3%多抗霉素可濕性粉劑500倍液處理的存苗數(shù)達114棵，居第一位，與對照相比，達極顯著水平。說明3%多抗霉素可濕性粉劑500倍液處理保苗效果優(yōu)于其它處理。

表2 幾種生物農(nóng)藥存苗數(shù)比較

2.1.2 幾種生物農(nóng)藥防效比較

由表3看出，3%多抗霉素可濕性粉劑500倍液防治效果居第一位，為74.18%；其次是8%寧南霉素水劑800倍液處理，防效為60.60%。阿利寧500倍液防效為58.01%，居第三位。其余處理對三七黑斑病均有一定的防治效果，但防效不高。

表3 幾種生物農(nóng)藥田間防治效果

2.1.3 幾種生物農(nóng)藥產(chǎn)量比較

如表4所示，參試各處理小區(qū)產(chǎn)量均高于對照，其中3%多抗霉素可濕性粉劑500倍液、8%寧南霉素水劑800倍液、4%春雷霉素可濕性粉劑1000倍液與0.3%霜特水劑1200倍液及對照相比，達極顯著水平。小區(qū)產(chǎn)量以3%多抗霉素可濕性粉劑500倍液處理最高，平均單產(chǎn)達339.52 kg；其次是8%寧南霉素水劑800倍液處理，平均單產(chǎn)為329.23 kg；4%春雷霉素可濕性粉劑1000倍液處理位居第三，平均單產(chǎn)為325.12 kg。其余處理產(chǎn)量也比不施藥對照高40 kg以上，顯示了一定的控病保產(chǎn)效果。

表4 幾種生物農(nóng)藥小區(qū)產(chǎn)量比較

2.2 幾種生物農(nóng)藥處理三七總皂苷含量

由表5看出幾種生物農(nóng)藥處理后，三七總皂苷含量以8%寧南霉素800倍液處理的三七最高，平均達7.16%，其次是3%多抗霉素可濕性粉劑500倍液處理，平均7.10%；4%春雷霉素可濕性粉劑1000倍液處理居第三位，為7.08%；其余處理與對照相同或略低于對照。研究結(jié)果表明寧南霉素、多抗霉素對提高三七質(zhì)量具有比較明顯的促進作用。

表5 幾種生物農(nóng)藥施用后三七總皂苷含量比較

3 結(jié)果討論

（1）生物農(nóng)藥具有選擇性強、對人畜安全、不污染自然生態(tài)環(huán)境等優(yōu)點，在三七病蟲害防治上有必要作為一個重要的應用途徑進行探索和研究。

（2）通過對現(xiàn)有商品化生物農(nóng)藥的田間試驗研究表明，多數(shù)生物農(nóng)藥可增強植株抗逆性，提高三七存活力；使用后對三七質(zhì)量無不良影響，其中寧南霉素、多抗霉素對提高三七質(zhì)量還具有一定的促進作用。3.3%多抗霉素可濕性粉劑500倍液處理后的三七具有較好的保苗、增產(chǎn)效果，建議生產(chǎn)上推廣應用，以減少化學藥劑的使用。

［1］王輝.水稻稻瘟病化學防治藥劑對比試驗［J］.中國農(nóng)村小康科技，2008 （11）：49-50.

［2］魏靖，張建華，惠祥海.多抗霉素防治葡萄常見病害藥效試驗［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2010 （2）：183-184.

［3］陳昱君，王勇，劉蕓芝，朱有勇，劉云龍.生物菌劑控制三七根腐病的初步研究［J］.中國中藥雜志，2004（11）：1102-1103.

［4］陳昱君，王勇.三七病蟲害防治［M］.昆明：云南科技出版社，2006：40-48.

［5］王淑琴，于洪軍，官廷荊.中國三七［M］.昆明：云南民族出版社，1993：428-472.

［6］王淑琴，于洪軍，陳先華.三七黑斑病的綜合防治研究［J］.植物病理學報，1981 （22）：47-54.

［7］馮光泉，李忠義，王勇.腐霉利、菌絕王對三七黑斑病的防治效果［J］.人參研究，2000 （1）：46-48.

［8］袁明山.淺談馬玲薯晚疫病化學藥劑防治的抗藥性［J］.馬玲薯雜志，1999 （4）：249-250.

［9］劉勤生.化學農(nóng)藥的使用對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和環(huán)境污染的影響及防范對策［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2008（12）：153.

Control Effects of Several Biological Pesticides on Black Spot Disease and Its Relationship with Quality of Notoginseng

WANG Yong1,2,3, CHEN Yu-jun1,2,4, YANG Jian-zhong1,2,3, LIU Yun-zhi1,2,4, ZHANG Wen-bin1,2, XIANG Fei-jun5
(1. Research Institute of Notoginseng, Wenshan University, Wenshan 663000, China; 2. Notoginseng Agricultural Engineering Laboratory, Wenshan, 663000, China; 3. Notoginseng Industrial Co., Ltd of Miaoxiang, Wenshan 663000, China; 4. Huaxin Notoginseng Co., Ltd, Wenshan 663000, China; 5. Kangmei Pharmaceutical Co., Ltd. Puning 515300, China)

PNS content of tested samples is determined through seven kinds of biological pesticides field efficacy trials adopting spraying agent after a field inoculation of pathogen and traditional ultraviolet spectrophotometry. The results show that field control effect with 3% polymyxin WP and 8% aqueous Ningnanmycin is better and their relative control effect reached 74.18% and 60.6%. Compared with the control sample, PNS content under anti-fungal and Alining treatment is slightly lower than that of the control treatment and PNS content of other participants is slightly higher than the control. 3% polymyxin and 8% WP Ningnanmycin agent can be used in notoginseng planting safely in production referring to comparison result of field control effect and PNS content.

Biological pesticides; control; Sanqi ( notoginseng); black spot disease; research

S567.236

A

1674-9200（2014）03-0001-04

（責任編輯 張 鐵）

2014-06-09

國家科技支撐計劃項目“三七黑斑病防治技術研究”（2006BAI09B04-03）。

王 勇（1974-），男，云南硯山人，文山學院文山三七研究院副研究員，碩士，主要從事中藥材栽培和病蟲害研究。

陳昱君（1960-），女，河南濟源人，文山學院文山三七研究院研究員，主要從事植物保護研究，E-mail：yncyj@vip.sina.com。