2011—2013年錦州市婦嬰醫院鮑曼不動桿菌耐藥性分析

王爽 齊川 李滿元 趙勁松

遼寧省錦州市婦嬰醫院檢驗科，遼寧錦州121000

2011—2013年錦州市婦嬰醫院鮑曼不動桿菌耐藥性分析

王爽 齊川 李滿元 趙勁松

遼寧省錦州市婦嬰醫院檢驗科，遼寧錦州121000

目的研究2011—2013年鮑曼不動桿菌的檢出率及耐藥率的動態變化，為臨床治療提供依據。方法統計2011年1月—2013年10月遼寧省錦州市婦嬰醫院送檢標本中鮑曼不動桿菌檢出率、對抗生素的敏感性，細菌鑒定和藥敏試驗使用的VITEK2全自動微生物分析儀進行分析。結果3年來分離出鮑曼不動桿菌共計123株。主要來源于痰標本，占89%。連續3年監測中，鮑曼不動桿菌對不同抗生素均有不同程度的耐藥，對青霉素類和一二代頭孢全部耐藥，對其他抗生素的耐藥性也逐年增加，其中耐藥性上升最明顯的是亞胺培南，敏感率由2011年的91.5%下降到2013年的76.5%。其中敏感性最高的是阿米卡星，2013年阿米卡星敏感率是82.4%。結論鮑曼不動桿菌的耐藥性逐年增加，多重耐藥菌株逐年增多，甚至出現全部耐藥的菌株。鮑曼不動桿菌的耐藥性進行連續監測，注意抗生素使用的合理性。

耐藥性；鮑曼不動桿菌；動態監測

鮑曼不動桿菌是一種革蘭氏陰性桿菌，屬于非發酵菌，分布于自然界中，是人類呼吸道、消化道、皮膚等的正常菌。隨著醫院感染的增加和大量廣譜抗生素的應用，鮑曼不動桿菌成為主要的院內感染的條件致病菌之一[1]。這種細菌可引起多個部位感染，包括尿道炎、菌血癥、腎炎、腦膜炎和傷口感染等[2]。近年來鮑曼不動桿菌在臨床上的感染不斷增加，并且耐藥性逐年嚴重，引起臨床的高度重視[3]。

為了解該院鮑曼不動桿菌的檢出率和耐藥性情況，預防并控制該院鮑曼不動桿菌的感染，對該院2011年1月—2013年10月臨床各科室送檢標本分離出的鮑曼不動桿菌進行回顧調查，其統計與分析結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

錦州市婦嬰醫院于2011年1月—2013年10月臨床各科室住院患者送檢標本，包括痰、咽拭子，尿液，血液等標本。其中痰標本分離78株，咽拭子分離37株，尿液標本分離6株，血液分離1株，膿液分離1株，共計分離出鮑曼不動桿菌123株。

1.2 主要耗材

①血平板、麥康凱分離培養基；②無菌試管、一次性無菌平皿、一次性無菌吸頭等；③革蘭陰性菌鑒定及藥敏反應板卡：珠海美華。

1.3 主要儀器設備

①自動微生物分析儀：珠海美華；②全自動血培養儀器：法國生物梅里埃公司,BACT/ALERT 3D；③二氧化碳培養箱:日本三洋公司，CO2INCUBATOR；④生物安全柜：中國海爾公司，HR40-ⅡA2。

1.4 實驗方法

1.4.1 細菌鑒定血平板，麥康凱平板生長，革蘭氏染色陰性，雙糖鐵實驗為非發酵型，氧化酶實驗陰性的細菌[1]。采珠海美華醫療科技有限公司非發酵菌鑒定及藥敏分析系統測試板進行鑒定。菌懸液制備：挑取純培養單個菌落于稀釋液瓶內壁研磨，呈細菌懸液0.5麥氏單位。連續移液器吸取該菌液加入測試板A1-A12孔，B1-B12孔，每孔100μL。在A1-A7孔分別滴加無菌石蠟油2滴。35℃孵育18～24 h后，判讀結果。先于A11孔（IND）滴加靛基質試劑兩滴，再于A10孔（NIT）滴加硝酸鹽還原試劑A、B各一滴，美華公司MA120鑒定系統判讀結果，操作嚴格按照儀器使用說明書操作。

1.4.2 細菌藥敏實驗采用美華非發酵菌鑒定及藥敏分析系統測試板取M-H肉湯培養基1瓶，滴加無菌藥敏顯色液一滴。吸取菌懸液50 μL，加至M-H肉湯培養基內混勻，繼續加入測試板的其余各孔（所有的藥敏孔及生長對照孔C+及6.5%NaCl），每孔100 μL。撕開不干膠的紙貼于鑒定板，35℃孵育18～24 h后。美華公司MA120鑒定系統判讀結果，操作嚴格按照儀器使用說明書操作，判讀MIC值。

1.4.3 指控菌株大腸埃希菌ACTT25922，銅綠假單胞菌ACTT25923，金黃色葡萄球菌ACTT25923。

1.4.4 數據分析藥敏試驗結果按照CLSI（2012）標準判定[2]，耐藥（R）、中介（I）和敏感（S），中介的結果歸入耐藥進行統計。

1.5 統計方法

所有數據均采用WHONET5.5軟件進行統計。計數資料用百分率表示。

2 結果

2.1 鮑曼不動桿菌分離率

2011年1月—2013年10月3年中該院住院患者各類標本中分離的鮑曼不動桿菌分別為25例、41例、57例。分離率分別為3.5%、4.7%、7.0%。其中痰標本和咽拭子分離率93.4%。分離最多科室是重癥監護室,占56%。

2.2 鮑曼不動桿菌耐藥情況

2011年1月—2013年10月該院檢出鮑曼不動桿菌對常見抗菌藥物耐藥情況見表1。

表1 2011—2013年鮑曼不動桿菌敏感率（%）

3 討論

鮑曼不動桿菌是一種非發酵的革蘭陰性細菌，可以廣泛存在于自然界中，它是一種條件致病菌，近來院內感染中鮑曼不動桿菌呈上升趨勢，已經成為醫院感染的主要致病菌之一，其檢出率在非發酵菌中僅次于銅綠假單胞菌。鮑曼不動桿菌可引起呼吸系統感染、泌尿系統感染和傷口感染等[3]。鮑曼不動桿菌的感染與抗生素的使用、機械通氣、介導性導管滯留天數、ICU住院天數、營養過度等因素有關[4]。

該院送檢標本統計數據顯示，在近3年的時間內，該院鮑曼不動桿菌分離例數和分離率逐年增高，這與該院治療和檢驗設備不斷先進、來該院就診的患者逐年增加，并且重癥搶救患者比率逐年增多有關。文獻報道[5]重癥監護室鮑曼不動桿菌痰標本分離率45%,也跟許多患者從外地轉診過來有關。

該組藥敏數據顯示，從2011年1月—2013年10月該院檢出鮑曼不動桿菌的絕大部分抗菌藥物耐藥性呈逐年升高趨勢，其中以亞胺培南和第三代頭孢最為明顯，亞胺培南耐藥率從2011年的8.5%升高到2013年的23.5%，頭孢曲松的耐藥率也從2011年的49.8%升高到92.8%。全國14所教學醫院藥敏試驗結果顯示多重耐藥(MDR)及泛耐藥(PDR)鮑曼不動桿菌分別達55.0%(2 720/4 949)和21.4%(1 058/4 949)。2010年鮑曼不動桿菌耐藥率與往年相比,呈上升趨勢,尤以對頭孢哌酮-舒巴坦、碳青霉烯類抗生素耐藥率升高顯著[6]。這可能與近年來碳青霉烯類藥物和第三代頭孢的廣泛應用有關，細菌耐藥性的增加與使用抗菌藥物的劑量、頻率和療程有著密切關系，所以對碳青霉烯類抗生素的應用應該嚴格控制，以防耐藥性的進一步增加造成更嚴重的后果。尤其對社區抗生素的使用應該加強管理和指導工作,避免多重耐藥的產生。該院情況好于全國醫院耐藥監測水平，主要原因還是與患者人群有關，但如果不加強病原學鑒定，單憑經驗用藥會加劇鮑曼不動桿菌的產生。

鮑曼不動桿菌對氨基糖苷類藥物的耐藥性在最近幾年有降低的趨勢，以阿米卡星最為明顯，2013年其對阿米卡星的敏感率達到80%以上，這可能與最近幾年該院對氨基糖苷類藥物應用減少有關。提示臨床經驗治療鮑曼不動桿菌可選擇阿米卡星，嚴格控制碳青霉烯類適應證[7]。

鮑曼不動桿菌耐藥性不斷增加，其耐藥機制也非常復雜，并且呈多重耐藥現象。多重耐藥鮑曼不動桿菌情況比較嚴重,其對氨基糖苷類藥物耐藥與氨基糖苷類耐藥基因的存在密切相關[8]。未來對耐藥基因檢測能夠發現鮑曼不動桿菌真正耐藥原因,并利用基因技術改變其生物特點，減少多重耐藥出現。多重PCR耐藥基因檢測能夠快速，準確發現該地區的泛耐藥情況。及時為臨床提供可靠的數據。

綜上所述，該院鮑曼不動桿菌的感染率以及耐藥率不斷上升，多重耐藥菌株的檢出率不斷增加，應該引起足夠重視以盡量減少院內感染的發生，因此應當嚴格執行隔離消毒制度，對感染鮑曼不動桿菌的患者應該進行規范的監控[9]。臨床醫生應與微生物實驗室密切合作，病情嚴重、住院時間長、濫用抗菌藥物和多種接觸性操作易導致PDRAb醫院感染性肺炎發生。加強無菌管理和合理使用抗菌藥物是預防和控制PDRAb感染發生和蔓延的關鍵[10-11]。對鮑曼不動桿菌進行藥敏試驗和耐藥機制分析，根據報告合理用藥，以盡量減少鮑曼不動桿菌的傳播和流行。

[1]中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢測操作規范[M].3版.南京：東南大學出版社，2006.

[2]Clinical and Laboratory Standards Instistute[M].Wikipedia，2012.

[3]王金良.密切注視鮑曼不動桿菌的耐藥發展趨勢[J].中華檢驗醫學雜志，2005，28(4)：355.

[4]趙心懋，任琳，寧永忠，等.某醫院連續7年醫院感染鮑曼不動菌耐藥性變遷[J].中國消毒學，2014,1（4）：42-44.

[5]王冬蓮，阮奕，金敏雅，等.重癥監護室鮑曼不動桿菌感染的耐藥變遷[J].中國衛生檢驗志,2014,5(25)：739-741.

[6]習慧明，徐英春，朱德妹，等.2010年中國CHNET鮑曼不動桿菌耐藥性監測[J].中華感染與化療學雜志,2012,2(20)98-104.

[7]肖淑珍，徐桂婷，方潔，等.鮑曼不動桿菌耐藥性與抗菌藥物使用情況的相關性分析[J].中華感染與化療學雜志,2013,5(46)：446-449.

[8]邢麗丹等.36株多重耐藥鮑曼不動桿菌對氨基糖苷耐藥基因的流行病學研究[J]].中華感染與化療學雜志,2013,6(125)：442-445.

[9]吳春陽,顧國浩,錢雪峰.鮑曼不動桿菌及對策研究的進展[J].國際醫學檢驗雜志,2013,2(121)：174-176.

[10]Chassaing B,Rolhion N,Vallée A,et al.Crohn disease-associated adherent-invasive E.coli bacteria target mouse and human Peyer's patches via long polar fimbriae[J].J Clin Invest，2011,121:966-972.

[11]湯小英,熊小雨,劉成軍.兒童泛耐藥鮑曼不動桿菌醫院獲得性肺炎的危險因素分析及防治措施[J].兒科藥學雜志,2014,6(23)：40-43.

Analysis of drug resistance of acinetobacter baumanii from 2011 to 2013

WANG Shuang QI Chuan LI Manyuan ZHAO Jinsong
Laboratory of Jinzhou Maternal and Infants'Hospital of Liaoning Province，Liaoning 121000,China

ObjectiveTo investigate the detection rate,and dynamic changes of drug resistance of acinetobacter baumannii from 2011 to 2013,in order to provide evidence for clinical therapy.MethodsWe gathered samples from Women and Children's Hospital of jinzhou and analyzed the data of the detection rate and drug resistance of the acinetobacter baumannii.Identification of bacteria and drug sensitive test were analysed by VITEK2 Automatic microbial analyzer.ResultsFor 3 years we have isolated 123 strains of acinetobacter baumannii,The target bacteria were mainly from sputum specimens,accounting for 89%.We also found that there was varying degrees of tolerance for acinetobacter baumanii to different antibiotics after monitoring for three consecutive years.It has become totally tolerated to penicillins and generation I/II cephalosporin and its tolerance to other antibiotics increases year by year The tolerance to imipenem increased most obviously and its sensibility has decreased from 91.5%in 2009 to 76.5% in 2013.And amikacin is the most sensitive with a sensibility of 82.4%in 2013.ConclusionThe tolerance of acinetobacter baumanii increased year by year and multidrug resistant bacteria strains also increased as time was coming and even it appeared all drug-resistant strains.But at the same time rational use of antibiotics should be considered carefully.

Drug resistance;Acinetobacter baumanii;Dynamic monitoring

R4

A

1672-5654（2014）12（a）-0005-03

2014-09-08）

王爽(1978-)，女,遼寧錦州市人，本科，主管檢驗師，研究方向:臨床檢驗診斷。

趙勁松（1970-），男，滿族，遼寧錦州人，研究生，主任檢驗師，研究方向：臨床檢驗診斷。