小型奶牛場布魯氏菌病的流行病學及防治對策

郭乃勇 仇國琴

（鹽城市鹽都區動物檢疫站，江蘇鹽城 224001）

小型奶牛場布魯氏菌病的流行病學及防治對策

郭乃勇 仇國琴

（鹽城市鹽都區動物檢疫站，江蘇鹽城 224001）

通過采用虎紅平板凝集試驗法初檢，試管凝集實驗復檢的方法對鹽城市某個感染了布病的奶牛場檢測，通過對奶牛場108頭奶牛布病的檢測，結果發現陽性奶牛數為8頭。在現有的檢測方法和淘汰處理的基礎上，結合改進現有的檢測方法，采取有效的措施控制和撲滅布病的發生。

布魯氏菌病；流行病學；防制；對策

1 材料與方法

目前本實驗室常用的方法是虎紅平板凝集試驗法（RBPT）和試管凝集法

1.1 虎紅平板凝集試驗

1.1.1 檢測材料:布病虎紅平板診斷液（購于中國農科所），玻璃平板，被檢血樣（鹽城市某奶牛場）。

1.1.2 檢測方法

（1）離心被檢血樣，10000轉速離心5分鐘，提取血清備用。

（2）洗凈玻璃平板，干燥

（3）無菌環境下用30um移液器將虎紅平板診斷液整齊滴于平板上

（4）用30ul移液器分別取步驟a 所提取被檢血清與平板上虎紅平板診斷液混合，靜置三分鐘

1.2 試管凝集試驗

1.2.1 材料:稀釋液，經虎紅平板凝集試驗檢測呈陽性的血清，布病標準抗原（購于中國農科所），試管架，小試管及滅菌吸管等。

1.2.2 方法

（1）被檢血清的稀釋度：本次實驗采用1：50，1：100，1：200，1：400四個稀釋度.

（2）血清的稀釋與抗原的加入：見表1

（3）出現50%以上的凝集的最高稀釋度為血清的凝集價，試管充分振蕩后，置37～38℃溫箱中，22～24h后用比濁管進行比濁并記錄結果（比濁管的制作：見表2）。

表1 試管凝集試驗步驟

表2 比濁管的配制

2 實驗結果

2.1 虎紅平板凝集試驗

反應后出現絮狀沉淀顆粒的判為陽性。

本次實驗檢測的奶牛數為108頭，檢出布病陽性奶牛數為10頭。

2.2 試管凝集試驗

本次實驗檢測出陽性8頭。

3 試驗結果分析

表3 虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗比較

通過用虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗對鹽城地區采集的108份奶牛血清進行檢測，其中用虎紅平板凝集試驗檢出10份為陽性，檢出率為9.3%，用試管凝集試驗檢出8份陽性，檢出率為7.4%。虎紅平板的敏特率、特異性分別為100%和98%。

4 小結與討論

4.1 試驗小結

我們先用虎紅平板凝集試驗法檢出陽性血清，再用試管凝集法對這些陽性血清進行復檢。從檢測結果可以看出，發生陽性的奶牛比較集中，分析認為可能為某一奶牛感染后未及時檢出進而向兩旁傳染造成。故及時進行迅速有效的檢測十分重要。

4.2 布魯氏菌病發病率持續上升的原因分析

（1）大力發展奶牛業，通過市場大流通，疫病有了更為廣泛的流通主體。

（2）儀器設備不到位

儀器設備陳舊，檢疫技術落后難以適應檢疫任務。

（3）養殖戶盲目購進淘汰奶牛，給當地養牛業帶來了嚴峻的考驗。

由于工作宣傳力度不大，不全面，范圍小，布魯氏菌病的檢疫工作未真正得到各級政府領導的重視，另外，一些養殖戶對檢疫的認識不夠，對其目的和作用不理解，出于自身利益，在檢疫人員進行檢疫時不配合工作，甚至逃避檢疫，甚至盲目購進淘汰奶牛，給徹底杜絕疫病的流行設置了極大的障礙。

4.3 防治對策

4.3.1 建立可靠快速的檢測方法。傳統方法的凝集試驗（包括試管凝集試驗、平板凝集試驗）法檢測率不高，假陽性率很高，在發達國家已基本上停止使用。取代的方法是緩沖布魯氏菌抗原試驗，包括卡片試驗、虎紅平板凝集試驗（RBPT）、緩沖平板凝集試驗（BBAT）。在國際貿易中，緩沖布魯氏菌抗原試驗是牛、羊、豬種布魯氏菌病診斷的指定試驗，作為篩選試驗用。

4.3.2 采取有效的生物安全手段。推廣以“檢疫、免疫、捕殺病畜”的綜合性防治措施，同時針對疾病流行的三個環節采取相應措施，

（1）管理傳染源 對牧場、乳廠和屠宰場的牲畜定期衛生檢查。檢出的病畜，及時隔離治療，必要時宰殺之。病畜的流產物及死畜必需深埋。對其污染的環境用20%漂白粉或10%石灰乳消毒。病畜乳及其制品必需煮沸消毒。皮毛消毒后還應放置三個月以上，方準其運出疫區。

病、健畜分群分區欄養，病畜用過的牧場需經三個月自然凈化后才能供健康畜使用。

（2）切斷傳播途徑 加強對畜產品的衛生監督，禁食病畜肉及乳品。防止病畜或患者的排泄物污染水源。對與牲畜或畜產品接觸密切者，要進行宣傳教育，做好個人防護。

（3）保護易感人群及健康家畜 除注意防護外，重要措施是進行菌苗免疫。

做好收購、調運、飼養、屠宰等各級檢疫，如：在收購時發現可以病畜（如關節炎、睪丸炎、流產等）應進行隔離處理；在運輸布魯氏菌病患畜時，應按指定路線走，不得與當地畜群接觸，防止傳播等。

4.3.3 采取疫苗免疫和撲殺相結合的方法是目前控制疫病流行的有效方法。隨著奶牛業的不斷壯大與經濟投入的不斷增加，靠單純的撲殺已經不現實，根據現行的生產管理制度可以了解到每年有20%的奶牛因為感染布魯氏菌而被撲殺，這樣造成的經濟損失是極其巨大的。通過研究和不斷的摸索，目前正在走上一條把使用疫苗和撲殺相結合的道路。