國產與進口瑞舒伐他汀鈣片在健康人體的藥代動力學及生物等效性

秦 璟

江蘇省阜寧縣中醫院藥劑科，江蘇阜寧 224400

瑞舒伐他汀鈣，是一種HMG-CoA 還原酶選擇性的競爭抑制劑，主要是針對于高血脂癥還有高膽固醇血癥的患者人群。首先是在日本開發出來，在1998年的時候將這種藥物轉給了英國，而美國的FDA 也在2003年的時候準許英國開發公司將瑞舒伐他汀鈣以CrestorTM 的商品名，在美國市場銷售。在本次試驗當中使用的國產瑞舒伐他汀鈣是浙江京新藥業有限公司生產的，每一片的規格是5 mg 或者是10 mg，國家食品藥品監督管理局在2008年的時候把該藥品批準生產而生產批號為H20080484、483。為了能夠對比分析國產與進口瑞舒伐他汀鈣片在健康人體的藥代動力學及生物等效性，在本次研究中對比的則是原研藥，產自于阿斯利康公司，每一片的規格是10mg，進口的注冊證號為H20060406。對比兩者制劑是不是存在著生物等效，了解國產的瑞舒伐他汀鈣片對于人體的相對生物利用度有多少，這樣能夠為以后臨床用藥提供更加準確的理論依據[1]。現總結如下。

1 對象與方法

1.1 藥品、試劑與儀器

在本次試驗的國產試劑為浙江京新藥業股份有限公司出產的瑞舒伐他汀鈣片，每一片的規格為10mg，批號為0901701。進口試劑為阿斯利康公司出產的瑞舒伐他汀鈣片，每一片的規格為10mg，批號為FP557；瑞舒伐他汀的對照品批號為20070103A，純度為99.0%該對照品由浙江京新藥業股份有限公司提出；內標是對乙酰氨基酚，乙腈還有甲酸都是色譜純；本研究的水為純凈水，而空白血漿則是有我院提供。

在本次研究當中的超高效液色相譜系統主要如下：Acquity Ultra Performance LC Binary Solvent Mannger TSQ 液相系統，還有自動進樣器SamlleManager，MasslynyTMVersion 4.1 Software 工作站。

1.2 研究對象

在本次研究中，對象為在我院進行全面體檢之后確認為健康，主要是：肝腎功能、血壓、心電圖、血尿常規以及心率的檢查結果都顯示正常。經過我院的解說之后自愿接受的。20例健康男性在研究之前的2周不能服用其他的任何藥物。

1.3 試驗方法

對于接受研究的20例健康男性按照他們的體質量以隨機的方式分為2組，對所有受試者進行單劑量雙交叉試驗，2 次給藥的間隔時間為7d，所有的劑量都是20mg；受試者在進行試驗之前的一個夜晚不能進食，在第二天空腹口服藥物，在服藥之后的2h才能夠再次飲水，在服藥之后的4h 再全部統一進行清淡的飲食。需要將所有的受試者留在觀察室進行觀察，有臨床醫師在此期間對其進行密切的監護；在進行試驗的期間所有受試者都不能夠抽煙喝酒，不能引用有咖啡因或者是果汁一類的飲料，盡量不要進行劇烈的運動[2]。

所有的受試者為了明確服用藥物前后的分別，分別在服藥前后不同的時間段在前臂靜脈抽取血液，每次抽取3 mL，而服藥前后的時間段分別如下：0.5、1、2、3、4、7、9、12（h），還有1、2、3 以及4（d）。抽取血液之后馬上將其移入離心試管當中，離心10 min之后將血漿分離出來然后在冰箱當中冷凍保存，冰箱的溫度設置為-70℃，隨時準備測試[3]。

1.4 質譜條件

本次試驗當中離子源是ESI 源；在進行正離子檢測的基礎上面以多反映檢測的方式進行掃描，然后采用二級質譜分析對掃描結果進行分析。設置毛細管電壓為3.4kV 而萃取錐孔電壓則為3.0V；離子源的溫度為100℃而錐孔氣流量的溫度為400℃；脫溶劑的氣流速度為450L/h；氬氣的壓力為0.35Pa 而駐留的時間為0.5s。

2 方法學的考察與評價

2.1 血漿樣品預處理

在血漿500μL 當中分別加入0.2mol/mL 鹽酸溶液為100μL，內標溶液為對乙酰氨基酚甲醇溶液160ng/mL，為50μL。進行渦流混合30s 之后在加入乙醚3mL，再繼續2 分鐘的渦流然后進行往復震蕩20 min，最后進行10 min 的離心（3500r/min）；在另一支試管當中移入上清液，在室溫氮氣流之下吹干并在流動相中將殘渣溶解，然后將其中的5μL 取出來之后進行UPLC/MS/MS 的分析[4]。

在左圖當中三個不同的色譜圖代表著不同階段的變化。A 色譜圖是受試者的空白血漿樣品；而B 色譜圖是空白血漿當中，加入了一定濃度的標準容易以及內標溶液之后呈現出來的變化；最后C 色譜圖是受試者在服用藥物之后的血漿樣品。瑞舒伐他汀以及內標，對于乙酰氨基酚在保留時間上面有所差異，分別是1.65 min 還有0.87 min。研究的結果顯示了空白血漿當中內源性物質不會對測定有所干擾。

2.2 專屬性

2.3 標準曲線制備

50μL 瑞舒伐他汀標準溶液加入到500μL 的空白血漿當中，配制成為與瑞舒伐他汀血漿濃度有不同差異的血漿樣品，主要配制出來的濃度如下：0.02、0.05、0.15、0.5、5.0、10.0 還有25.0 以及50.0（ng/mL）。把這些血漿濃度不同的樣品，按照上面所敘述的方法進行預處理，每一個不同濃度都需要進行3 種樣本分析，每次分析的量是5μL 然后將色譜圖進行記錄。在這其中橫坐標是等待被測血漿的濃度，而縱坐標則是等待檢測血漿還有內標物的峰面積之間的比值，回歸運算的內容是加權（w=1/x2）的最小二乘法來進行的。我們以標準曲線作為根據，可以限定瑞舒伐他汀的線性范圍，這個范圍在0.02～50.0ng/mL 之間，而定量的下限則是0.02ng/mL；由此我們能夠得出瑞舒伐他汀的直線回歸方程，為y=4.5×10-2x＋4×10-4。其中γ 為0.9955[5]。

2.4 精密度與回收率試驗

2.4.1 血漿精密度 本次試驗配制的瑞舒伐他汀質量控制樣品為0.05、5.00 還有40.00（ng/mL），依然按照上述2.1 的方法進行血漿預處理。每一種不同的濃度都要進行6 樣本的分析，需要連續進行3 天測定，按照本文的標準曲線將質量控制樣品的濃度計算出來，然后根據質量控制樣品對本次研究當中日內還有日間的精密度進行計算。詳情請見表1。

表1 瑞舒伐他汀在血漿的回收率與精密度

2.4.2 血漿回收率 在空白血漿當中精準的加入瑞舒伐他汀標準溶液，將其配制成為血漿濃度在3 個級別的濃度樣品，血漿濃度為瑞舒伐他汀0.05、5.00 以及40.00（ng/mL）；在進行相關的處理之后進樣并和對應濃度的標準樣品進樣得到的峰面積進行對比，這樣來計算它們的絕對回收率。計算的結果表示3 個級別的濃度提取回收率相對穩定

2.5 穩定性考察

在上述的3 種不同濃度血漿質控樣品，在進行考察之后發現樣本如果在溫度為-70℃的時候能夠有較好的保存；而如果對血漿質控樣品反復凍融操作3 次之后能夠穩定保存；溫度為室溫的，放置時間24 h 之內的保存穩定；等到血漿樣品在融化之后在室溫下放置2 h，進行提取進樣，樣品保存穩定。

3 數據處理

用BAPP2.0 版軟件對血藥濃度數據進行處理。對藥代動力學的參數進行計算，參數的內容為半衰期、藥-時曲線下面積。

4 結果

所有的受試者，在不同時間段的瑞舒伐他汀平均血藥濃度-時間曲線如下圖1。

圖1 單劑口服瑞舒伐他汀在所有受試者平均血藥濃度-時間

在本次研究當中，藥代動力學參數詳情請見表2。

表2 20例受試者單劑口服瑞舒伐他汀后的主要藥代動力學參數

本次研究表明了國產與進口瑞舒伐他汀鈣片有著生物等效性，詳情請見表3。

表3 統計分析結果

5 討論

在本次研究中，使用的是超高效液相色譜的方法進行測驗，對健康的成年男性進行測定，對受試者自身的交叉口服瑞舒伐他汀鈣片的受試制劑還有參比試劑之間的血漿藥物濃度進行比較。結果顯示了國產與進口瑞舒伐他汀鈣片在健康人體的藥代動力學還有生物等效性是基本一致的。

[1]張紅，熊玉卿.單次口服瑞舒伐他汀鈣片在中國健康志愿者的藥代動力學[J].中國臨床藥理學雜志，2007（12）：124-125.

[2]田蕾，黃一玲，徐莉.瑞舒伐他汀鈣片中國人體的藥動學[J].中國醫院藥學雜志，2007（2）：112-113.

[3]金鑫，王鵬.國產與進口瑞舒伐他汀鈣片在健康人體的藥代動力學及生物等效性[J].中國臨床藥理學雜志，2009（10）：154-155.

[4]李玉霞，江珊.瑞舒伐他汀的研究進展[J].心血管病學進展，2010（14）：125-126.

[5]張紅，熊玉卿.連續口服多劑國產瑞舒伐他汀鈣片的藥動學[J].中國藥學雜志，2007（6）：165-166.