肝再生過程中膽汁酸對(duì)FXR的影響

晁祥嵩，國麟祺，丁 隆

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

研究表明，小窩蛋白可通過脂類代謝促進(jìn)肝臟的再生，而法尼酯衍生物受體FXR是一種膽汁酸受體，在膽汁酸代謝和膽固醇代謝中發(fā)揮重要作用，并有望成為降低膽固醇，治療某些心血管病及肝疾病的治療靶點(diǎn)。基于此，設(shè)計(jì)該實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)膽汁酸能夠通過對(duì)FXR的影響進(jìn)而影響到肝再生的進(jìn)程。FXR的起初的命名是由于其可以被生理水平的高濃度法尼酯激活，在1999年國外的3個(gè)獨(dú)立研究小組同時(shí)證實(shí)FXR的內(nèi)源性配體是膽汁酸，至此，F(xiàn)XR被稱做膽汁酸受體而被廣泛深入研究。

1 材料與方法

1.1 材料

清潔級(jí)SD大鼠60只，雄性，6周齡，體重(160±18)g，分別從301醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心購買。

1.2 動(dòng)物模型建立及分組

大鼠模型建立在文獻(xiàn)所述方法的的基礎(chǔ)上，隨機(jī)將60只大鼠建立30%(A),50%(B),70%(C)大鼠肝切除模型，分別給予葡萄糖喂養(yǎng)(1組)及膽汁酸(2組)喂養(yǎng)，每組10只，分為6個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別標(biāo)記為A1，A2，B1，B2，C1，C2，在喂養(yǎng)之后的24h、48h以及72h等時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行相應(yīng)的數(shù)據(jù)監(jiān)測和記錄，并且根據(jù)數(shù)據(jù)的變化做好細(xì)致的比較。

1.3 標(biāo)本采集

A1，B1，C1進(jìn)行葡萄糖喂養(yǎng)，A2，B2，C2進(jìn)行膽汁酸喂養(yǎng)，分別于24h，48h及72h進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測，(1)通過測肝臟/體重比率來測定并比較上述6組大鼠的肝再生率；利用Child公式計(jì)算確定肝再生率，即(尸檢時(shí)的肝重量-手術(shù)時(shí)預(yù)計(jì)的殘肝重量)/切肝的肝重量×100%。(2)用western blotting技術(shù)檢測并比較各組大鼠的肝組織內(nèi)FXR蛋白表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠肝再生率的比較

1組的大鼠肝再生率在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著低于2組，記錄為：見表1。

其次，進(jìn)行的是組內(nèi)比較：通過比較發(fā)現(xiàn)，兩組內(nèi)不同亞組的大鼠肝再生率均為A1>B1>C1和A2>B2>C2(P值均<0.05)。見表2、圖1。

表1 各組大鼠肝再生率的比較

表2 各組大鼠肝再生率的比較

圖1 各組大鼠肝再生率的比較

檢測FXR的表達(dá)變化，了解各個(gè)時(shí)期FXR表達(dá)變化的規(guī)律。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，首先，進(jìn)行的是組內(nèi)對(duì)比，兩組相比明顯可以發(fā)現(xiàn)，A組在不同時(shí)間點(diǎn)的FXR表達(dá)明顯低于B組，記錄，見表3。

其次，進(jìn)行的是組內(nèi)比較：通過比較發(fā)現(xiàn)，兩組內(nèi)不同亞組的大鼠血清內(nèi)膽酸存在差異，大鼠血清內(nèi)膽酸在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的表現(xiàn)均為A1>B1>C1和A2>B2>C2(P值均<0.05)。見表4、圖2。

表3 各組大鼠肝組織內(nèi)FXR蛋白水平的比較

表4 各組大鼠肝組織內(nèi)FXR蛋白水平的比較

圖2 各組大鼠肝組織內(nèi)FXR蛋白水平的比較

3 討論

物質(zhì)代謝是細(xì)胞再生的根本，肝再生是細(xì)胞活化、脂肪代謝和細(xì)胞分裂三者協(xié)調(diào)作用的結(jié)果,早期的研究證實(shí)，F(xiàn)XR屬于核受體超家族的一員，可被內(nèi)源性配體膽汁酸激活，在膽汁酸、糖和脂代謝中具有重要的作用，通過對(duì)本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析可見，膽汁酸通過對(duì)FXR的激活，進(jìn)而起到促進(jìn)肝再生的作用，隨著FXR及其相關(guān)通路的深入研究，F(xiàn)XR已從最初調(diào)節(jié)代謝延伸到可以調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝甚至與惡性腫瘤的生長有所關(guān)聯(lián)，人們對(duì)其在肝再生過程中所起的重要作用愈加重視，可以認(rèn)為，F(xiàn)XR是人體細(xì)胞的重要保護(hù)者，期待隨著研究FXR在肝再生過程中的作用及機(jī)制被進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，可以為我們在肝臟手術(shù)、肝移植術(shù)及肝癌形成的復(fù)雜機(jī)制提供提供指導(dǎo)。

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