HPLC法測定祛風濕中成藥中的糖皮質激素

1.廣東藥學院藥用生物活性物質研究所，廣東 廣州 510006；2.廣東省生物活性藥物研究重點實驗室，廣東 廣州 510006；3.廣東省佛山市食品藥品檢驗所，廣東 佛山 528000

HPLC法測定祛風濕中成藥中的糖皮質激素

吳立蓉1,2高衛東3

1.廣東藥學院藥用生物活性物質研究所，廣東 廣州 510006；2.廣東省生物活性藥物研究重點實驗室，廣東 廣州 510006；3.廣東省佛山市食品藥品檢驗所，廣東 佛山 528000

目的建立高效液相色譜法測定祛風濕中成藥中曲安西龍、氫化可的松和地塞米松的分析方法。方法樣品以甲醇進行超聲提取，以ODS色譜柱分離，流動相為乙腈：水(40∶60)；流速為1.0ml/min；檢測波長為241nm；柱溫為40℃。結果各糖皮質激素成分在2.75～44.00μg/ml范圍內呈線性關系，r=0.9999，平均回收率為98.34%～98.41%。結論本方法簡便準確，重現性好，可用于祛風濕中成藥中曲安西龍、氫化可的松和地塞米松3種糖皮質激素的檢測。

高效液相色譜法；糖皮質激素

在中成藥中擅自添加西藥成分，并隨意夸大療效，高價牟取暴利，為了打擊這種非法行為，本文建立了同時快速測定祛風濕中成藥中3種糖皮質激素的高效液相法色譜法，方法準確、簡便，可應用于祛風濕中成藥的實際檢驗工作。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Shimadzu LC-20AT 型高效液相色譜儀(日本)，包括SIL自動進樣器、CTO柱溫箱、SPD二極管陣列檢測器；AE-240電子分析天平(瑞士Mettler)。

1.2 試藥 曲安西龍(批號100333-200201)、氫化可的松(批號100152-200206)地塞米松(批號100129-200804)均購于中國藥品生物制品檢定所。甲醇、乙腈為色譜純(德國Merck)；水為超純水(韓國 Power Iplus 超純水系統)；其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件[1、2]色譜柱：LUBEX Kromasil C18(250mm×4.6mm，5μm)；流動相為乙腈∶水=40∶60，檢測波長：241nm；流速：1.0ml/min；柱溫：40℃；進樣量：10μl。

2.2 標準溶液的配制 精密稱取曲安西龍、地塞米松和氫化可的松適量，用甲醇溶解并稀釋成濃度約為55μg/ml的標準母液。將此母液稀釋成標準系列濃度分別為2.75、5.50、11.00、22.00、44.00μg/ml的使用溶液。

2.3 樣品溶液的制備 取樣品細粉約1g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減少的重量，搖勻，濾過。取續濾液入離心管中，于10000r/min轉速下離心10min，取離心后的上清液，經0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液待測。

2.4 線性關系及檢測限 使用“2.2項”中配制好的標準溶液進行上機分析，以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，得到各個組分的標準曲線及相關系數。具體見表1。

2.5 檢出限和定量限 以信噪比為3∶1時成分的量確定檢出限，以信噪比10∶1時成分的量確定定量限，各種糖皮質激素的最低檢測限2.7～5.8ng，最低定量限為5.4～17.3ng。具體見表1。

2.6 精密度試驗 精密吸取濃度約為11.0μg/ml的混合標準溶液10μl重復進樣6次，計算各激素峰面積的RSD為0.11%～0.57%，表明精密度良好。

2.7 穩定性試驗 取同一濃度的混合標準溶液，分別于0、1、2，4、8h進樣，測定三種成分的峰面積，RSD分別為0.74%、1.05%和0.89%，結果表明溶液在8h內穩定。

2.8 回收率試驗 稱取試樣1g至50ml容量瓶中，平行6份，分別加入5ml 8.0μg/ml的混合標準溶液，按照樣品處理方法制備待測溶液。回收率分別為曲安西龍98.41%，RSD=0.69%；氫化可的松98.41%，RSD=0.67%；地塞米松98.34%，RSD=0.72%。

2.9 樣品分析 按本方法對祛風濕類中成藥樣品共15件進行了分析測定。結果表明，樣品中有3件樣品都含有部分上述成分，陽性檢出率為20%。

3 結論

本文所建立方法簡便準確，重現性好，可在15min內快速檢出，可很好的應用于祛風濕中成藥中曲安西龍、氫化可的松和地塞米松3中糖皮質種激素的檢測。實驗中陽性樣品檢出率為20%，應引起相關監管部門的重視，加大查處力度。

[1]陳秋虹．抗風濕類藥酒中糖皮質激素的測定[J]．時珍國醫國藥，2008，19 (5)：1153-1154．

[2]劉金燕，趙春杰，王超眾．抗風濕類中成藥中添加糖皮質激素的檢測[J]．中國藥品標準，2008，9(6)：424-427．

吳立蓉(1980-)，女，博士，助理研究員，主要從事中藥的研究。E-mail：wlirong11@gmail.com。

R284.1

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1007-8517(2014)13-0015-01

2014.05.06)