子宮內膜腺癌中MMP-9表達的免疫組化研究

仲肖靜 李菊萍 顏麗麗

子宮內膜腺癌中MMP-9表達的免疫組化研究

仲肖靜 李菊萍 顏麗麗

目的探討基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)在子宮內膜增生癥及子宮內膜腺癌組織中的表達及其與子宮內膜腺癌的臨床病理關系。方法采用免疫組化法檢測隨機篩選、分組的不同子宮內膜組織切片中MMP-9的表達情況。結果MMP-9在正常子宮內膜、子宮內膜增生癥和子宮內膜腺癌組織中的陽性表達率分別為25.0%、33.4%、95.0%, 差異有統計學意義(P＜0.05)。其表達強度與子宮內膜腺癌的手術-病理分期、組織學分級、肌層浸潤深度和淋巴結轉移相關, 差異有統計學意義(P＜0.05)。結論MMP-9在子宮內膜增生癥進展至子宮內膜腺癌這一過程中起促進作用, 且強表達與子宮內膜腺癌的浸潤深度和轉移程度有關, 為子宮內膜腺癌的早期臨床診斷和靶向治療提供理論依據。

基質金屬蛋白酶-9；子宮內膜腺癌；免疫組化；腫瘤；轉移

近年來關于基質金屬蛋白酶(MMPs)在子宮內膜癌中的研究較多, 但研究結果不一致, 目前仍存在爭議。本研究通過免疫組化方法檢測MMP-9在不同子宮內膜組織中的表達,探討其與子宮內膜腺癌的生物學行為的相關性。

1 材料與方法

1.1材料 標本均取自2010年1月～2013年12月在本院的子宮內膜腺癌組織蠟塊100例, 子宮內膜增生組織蠟塊30例, 正常子宮內膜蠟塊20例作對照。年齡37～68歲。子宮內膜腺癌病例依照國際婦產科聯盟(FIGO2009年)標準［7］進行分級、分期。研究經患者同意, 并通過倫理委員會。

1.2實驗試劑及方法 主要試劑：MMP-9鼠抗人單克隆抗體(濃縮型)、即用型鏈霉素抗生物蛋白-過氧化酶(streptavidin peroxidase, SP)超敏試劑盒(北京中杉金橋生物技術有限公司)。主要實驗儀器：DK-420恒溫水浴箱(上?；巧锟萍加邢薰?；采用SP方法檢測MMP-9在各組組織中表達。用已知的肝癌組織的陽性切片作陽性對照, 用磷酸鹽(PBS)緩沖液代替一抗孵育切片為陰性對照。主要實驗步驟：3% H2O2孵育；于98℃下0.1 mmol/L磷酸緩沖液修復抗原,滴加一抗。MMP-9抗體稀釋后的質量濃度為1:100, 滴加二抗；滴加SP復合物；DAB 染色；蘇木素復染。步驟按說明書操作。

1.3統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件對數據進行統計學分析。計數資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1各組子宮內膜組織中MMP-9的表達情況 MMP-9蛋白在正常子宮內膜組織、子宮內膜增生癥組織和子宮內膜癌組織中的陽性表達率分別為25.0%、33.4%、95.0%, 從正常子宮內膜組織、增生的子宮內膜組織至子宮內膜腺癌組織, MMP-9的陽性表達率呈顯著上升的趨勢, 兩兩比較, 差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.2子宮內膜腺癌組織中MMP-9的表達情況 本研究結果表明, 在子宮內膜腺癌組織中, MMP-9的表達強度與手術-病理分期的早晚、組織學分級的高低、肌層浸潤的程度及淋巴結有無轉移均相關, 差異有統計學意義(P＜0.05)。

3 討論

子宮內膜腺癌的重要生物學特征是腫瘤的浸潤與轉移,腫瘤細胞的細胞外基質降解使腫瘤細胞的基底膜完整性遭到破壞, 繼而發生了腫瘤的侵襲及轉移［1］。

本研究結果發現, MMP-9在正常子宮內膜組織中表達多為陰性, 在子宮內膜腺癌組織中的表達強度最高, 差異有統計學意義(P＜0.05)。在子宮內膜增生癥各級組織中表達呈陽性, 且隨子宮內膜增生程度的加重, MMP-9的陽性表達程度也隨之增強, 但各級子宮內膜增生癥中MMP-9的表達差異無統計學意義(P＞0.05), 不排除與樣本數量少有關MMP-9在子宮內膜腺癌組織中的強表達還與子宮內膜腺癌的臨床分期相關［2］。本研究結果提示：MMP-9的表達水平在子宮內膜腺癌的晚期組織中的表達強度及陽性率高于早期組織, 差異有統計學意義(P＜0.05), 同時在組織分化差的組織中表達增強,且隨著分化級別增高, 其表達水平亦增高。表明MMP-9與其臨床分期有顯著性關系, 在子宮內膜腺癌的轉移、侵襲等活動中易發揮著重要的作用。由此推論, MMP-9的高表達與子宮內膜腺癌的惡性程度和易于浸潤轉移有關。

［1］ 黃瑾, 陽麗君, 蘇園園, 等.MMP-2、MMP-9在子宮內膜增生癥和腺癌中的表達.廣東醫學院學報, 2011(2):129-131.

［2］ 劉琴, 李海, 徐松, 等.STAT3與SOCS3在子宮內膜腺癌中的表達及生物學行為相關性分析.臨床和實驗醫學雜志, 2013 (17):1350-1352.

2014-07-18］

265600 蓬萊市人民醫院婦產科(仲肖靜 顏麗麗)；山東省蓬萊市婦幼保健站(李菊萍)

仲肖靜