黔北山區規模豬場豬偽狂犬病血清學調查

摘要：為了解近來豬偽狂犬病（PR）在黔北山區規模豬場的流行情況，2011-2012年對采自27個不同規模豬場的1 238份血清，采用PRV gE蛋白ELISSA抗體檢測試劑盒進行檢測和分析，檢出PR血清抗體陽性111份、陽性率8.97%（111/1 238），所檢血清中種母豬陽性率達12.22%（49/401）、商品豬陽性率8.94%（38/425）、仔豬陽性率5.83%（24/412），檢出陽性場比例達48.15%（13/27）。結果表明，黔北山區規模豬場中存在豬偽狂犬病感染，種母豬群體陽性檢出率高于其他階段豬，但整體陽性率低于國內相關報道。

關鍵詞：黔北山區；規模豬場；偽狂犬病；血清學；調查

中圖分類號：S858.28 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X（2013）11-0009-02

豬偽狂犬病（Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一種高度傳染性、致死性的傳染病，也稱奧捷氏病、假性狂犬病、奇癢病等[1，2]。該病最早發現于美國，后由匈牙利科學家Au-jeszky首先分離出病毒[3]。臨床癥狀表現為母豬返情屢配不孕，懷孕母豬流產、產死胎或木乃尹胎，新生仔豬在一周內發生大量死亡，斷奶仔豬發熱、腹瀉、呼吸困難、肌肉震顫并繼發麻痹、共濟失調，育肥豬生長遲緩和飼料報酬降低等[1-3]。黔北地區生豬養殖量較大，年出欄商品豬達400萬頭以上，是貴州省最大的生豬養殖區域，同時近年來該地區生豬規模化養殖場數量不斷增加。2011-2012年期間，筆者對黔北地區27個規模豬場1 238份血清進行PR檢測和分析，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 待檢血清 2011-2012年，在遵義市28個規模豬場隨機采集豬血1 238份，從豬耳靜脈或前腔靜脈采血，3 000 r/min離心10 min后分離血清，冰箱冷凍保存，待測。

1.1.2 試劑 PRV gE蛋白ELISSA抗體檢測試劑盒，購自武漢科前生物制品有限公司。

1.2 方法

試驗方法如下：①在血清稀釋板中按1：40的體積比稀釋待檢血清樣品、陰性和陽性對照。②將稀釋好的待檢血清樣品、陰性和陽性對照各取100 μL加入抗原包被板中，待檢樣品加1孔、陰性和陽性對照加2孔，輕輕振勻后置37 ℃溫育30 min。③甩掉板孔中溶液，每孔加入稀釋后的洗滌液200 μL靜置30 min倒掉，在吸水紙上拍干，反復洗5次。④每孔加羊抗豬酶標二抗100 μL，置37 ℃溫育30 min，后重復步驟③洗滌5次。每孔先加底物液A 50 μL、再加底物液B 50 μL，混勻，室溫（18～25 ℃）避光顯色10 min。⑥加入終止液50 μL，10 min內測結果。

1.3 結果判定

采用PRV gE蛋白ELISSA抗體檢測試劑盒檢測血清中PRV gpl抗體，按照試劑說明書操作，在酶標儀上測各孔OD630 nm值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD630 nm≥0.6，陰性對照孔平均OD630 nm<0.3。當樣品孔OD630 nm≥0.45判為陽性，樣品孔OD630 nm<0.40為陰性，樣品孔OD630 nm值介于0.40～0.45判為疑似陽性。

2 結果與分析

從表1可以看出，黔北山區27個種豬場采集的1 238份血清中檢出PR血清抗體陽性111份，陽性率為8.97%（111/1238）。從不同豬群階段看，種母豬階段陽性率明顯高于商品豬和仔豬，所檢血清中種母豬陽性率達12.22%（49/401），特別是能繁母豬群陽性率高達12.98%（37/285）；從不同性別看，商品豬和斷奶仔豬中母豬群體陽性率分別為9.43%（20/212）、5.05%（10/198），差異較明顯顯著。

從表2、表3可知，調查的27個豬場中陽性場比例達到了48.15%（13/27），陽性率在3.76%～31.42%之間，但中小型豬場陽性率普遍高于大型豬場。

3 討論

（1）目前世界上有40多個國家都有PR報道，PR的危害已經超過豬瘟，給世界養豬業造成巨大的經濟損失。世界動物衛生組織（OIE）將該病列為B類動物傳染病，我國列為二類動物疫病。我國自1947年首次報道該病以來，據不完全統計已有20多個省、市流行過該病，在許多種豬場呈暴發流行趨勢，己成為我國養豬業不可忽視的主要傳染病之一[3]。本次檢測1 238份血清中檢出PR血清抗體陽性111份，陽性率為8.97%（111/1 238），表明遵義市規模豬場豬群中存在PRV的隱性感染。

（2）根據PR血清學調查相關資料顯示，臺灣屠宰場豬群陽性率為65.6%，黑龍江、吉林、遼寧和內蒙古4省區陽性率為58.8%，四川省陽性率為20.2%，廣東省陽性率為15.3%～19.2%，貴州省非免疫豬群陽性率為15.8%，江蘇省陽性率為12.1% [4，5]。本次調查結果顯示黔北山區規模豬場中PR陽性率遠遠低于國內相關報道，但值得注意的是與鄧位喜等[6]對遵義市PR血清學調查的5.69%相比有所上升，陽性場比例達到了48.15%、陽性率在3.76%～31.42%之間，部份規模較小的豬場陽性率較高，臨床發病較多，表明黔北山區規模豬場PR防控工作任重道遠，應引起高度重視。

（3）PRV可感染各種年齡段的豬，易繼發豬瘟、豬繁殖與呼吸障礙綜合征和豬傳染性胸膜肺炎等疫病混合感染又可致豬隱性感染，而隱性感染的帶毒豬是規模化豬場發生PR的主要傳染源之一[7]。所以控制該病最好的方法就是用偽狂犬gE基因缺失弱