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一例轉(zhuǎn)基因克隆水牛主要臟器組織結(jié)構(gòu)觀察

2013-12-31 00:00:00盧俊求胡巍堃周悅王曉麗
湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2013年21期

摘要:應(yīng)用石蠟切片及HE染色技術(shù)觀察轉(zhuǎn)基因克隆水牛牛犢的心臟、肝、腎、胰腺、睪丸等主要臟器組織結(jié)構(gòu),并使用激光共聚焦顯微鏡對(duì)其心臟、肝、腎、睪丸冰凍組織切片進(jìn)行熒光觀察。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因克隆水牛心臟結(jié)構(gòu)異常,心肌纖維間隙過大,閏盤結(jié)構(gòu)不明顯,出現(xiàn)炎癥、出血等病理現(xiàn)象;肝、腎、胰腺、睪丸結(jié)構(gòu)完整,細(xì)胞形態(tài)、分布均正常。激光共聚焦顯微鏡下各冰凍組織切片中均可見較均勻綠色熒光,初步證實(shí)綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因成功整合到了水牛體內(nèi)。

關(guān)鍵詞:水牛;轉(zhuǎn)基因克隆;臟器;組織結(jié)構(gòu)

中圖分類號(hào):S814.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A 文章編號(hào):0439-8114(2013)21-5251-02

Observation of Main Visceral Organ Structure in one Transgenic Cloned Buffalo

LU Jun-qiu,HU Wei-kun,ZHOU Yue,WANG Xiao-li

(College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530005, China)

Abstract: The main visceral organs such as heart,

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物克隆技術(shù)是20世紀(jì)中后期興起的一項(xiàng)技術(shù)。近年來,隨著轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究的發(fā)展和深入,該技術(shù)被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、免疫學(xué)、生物制藥及畜牧育種等領(lǐng)域[1,2]。

2010年初,廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院的科研人員將一只3月齡的水牛胎兒的成纖維細(xì)胞經(jīng)體外傳代培養(yǎng)后,把含標(biāo)記基因[綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)]和篩選基因的轉(zhuǎn)基因載體導(dǎo)入,構(gòu)建得到轉(zhuǎn)基因克隆重構(gòu)胚,并于2010年2月5日植入一頭2歲半的母牛子宮內(nèi)。同年12月19日順利產(chǎn)下一對(duì)雄性雙胞胎。其中一頭體重為20.5 kg,正常存活;另一頭體重為14 kg,夭折,無法憑外部觀察判斷死因。對(duì)夭折牛犢用紫外燈照射,可見頭部和四肢明顯表達(dá)綠色熒光蛋白基因[3]。

本試驗(yàn)試圖通過組織冰凍切片和熒光顯微觀察技術(shù)查證外源基因是否成功轉(zhuǎn)入水牛的內(nèi)部組織器官;并通過石蠟切片和HE染色技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)基因克隆水牛主要臟器組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察分析,為探查犢牛死亡原因提供理論依據(jù),也為今后轉(zhuǎn)基因克隆水牛的研究提供必要的理論基礎(chǔ)。……

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