一例轉基因克隆水牛主要臟器組織結構觀察

摘要：應用石蠟切片及HE染色技術觀察轉基因克隆水牛牛犢的心臟、肝、腎、胰腺、睪丸等主要臟器組織結構，并使用激光共聚焦顯微鏡對其心臟、肝、腎、睪丸冰凍組織切片進行熒光觀察。結果表明，轉基因克隆水牛心臟結構異常，心肌纖維間隙過大，閏盤結構不明顯，出現炎癥、出血等病理現象；肝、腎、胰腺、睪丸結構完整，細胞形態、分布均正常。激光共聚焦顯微鏡下各冰凍組織切片中均可見較均勻綠色熒光，初步證實綠色熒光蛋白（Green fluorescent protein，GFP）基因成功整合到了水牛體內。

關鍵詞：水牛；轉基因克隆；臟器；組織結構

中圖分類號：S814.8 文獻標識碼： A 文章編號：0439-8114（2013）21-5251-02

Observation of Main Visceral Organ Structure in one Transgenic Cloned Buffalo

LU Jun-qiu，HU Wei-kun，ZHOU Yue，WANG Xiao-li

（College of Animal Science and Technology， Guangxi University， Nanning 530005， China）

Abstract： The main visceral organs such as heart，

轉基因動物克隆技術是20世紀中后期興起的一項技術。近年來，隨著轉基因動物研究的發展和深入，該技術被廣泛應用于生物學、免疫學、生物制藥及畜牧育種等領域[1，2]。

2010年初，廣西大學動物科學技術學院的科研人員將一只3月齡的水牛胎兒的成纖維細胞經體外傳代培養后，把含標記基因[綠色熒光蛋白（Green fluorescent protein，GFP）]和篩選基因的轉基因載體導入，構建得到轉基因克隆重構胚，并于2010年2月5日植入一頭2歲半的母牛子宮內。同年12月19日順利產下一對雄性雙胞胎。其中一頭體重為20.5 kg，正常存活；另一頭體重為14 kg，夭折，無法憑外部觀察判斷死因。對夭折牛犢用紫外燈照射，可見頭部和四肢明顯表達綠色熒光蛋白基因[3]。

本試驗試圖通過組織冰凍切片和熒光顯微觀察技術查證外源基因是否成功轉入水牛的內部組織器官；并通過石蠟切片和HE染色技術對轉基因克隆水牛主要臟器組織結構進行觀察分析，為探查犢牛死亡原因提供理論依據，也為今后轉基因克隆水牛的研究提供必要的理論基礎。……