車前草提取物對三種儲糧害蟲的觸殺活性研究

摘要：采用冷浸法以4種不同極性的溶劑（乙醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚）對車前草（Plantago asiatica L.）活性成分進行粗提，采用藥膜法研究提取物對玉米象（Sitophilus zeamais Motschulsky）、谷蠹（Tribolium castaneum）、赤擬谷盜（Rhyzopertha dominica Fbricius）3種儲糧害蟲成蟲的觸殺作用。結果表明，丙酮提取物、石油醚提取物和乙醇提取物分別對玉米象、谷蠹和赤擬谷盜觸殺效果較好，試蟲校正死亡率可達到97%以上。

關鍵詞：車前草（Plantago asiatica L.）提取物；觸殺活性；玉米象（Sitophilus zeamais Motschulsky）；赤擬谷盜（Rhyzopertha dominica Fbricius）；谷蠹（Tribolium castaneum）

中圖分類號：S379.5 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）22-5493-03

車前草（Plantago asiatica L.）又名車輪菜，為車前科（Plantaginaceae）多年生草本植物，含有谷甾醇、熊果酸、胡蘿卜苷、桃葉珊瑚苷和梓醇等化學成分。中醫認為其具有清熱利尿、祛痰、涼血、解毒的功效，主治水腫尿少、熱淋澀痛、暑濕瀉痢、痰熱咳嗽、吐血衄血和痛腫瘡毒等[1-5]。有研究表明車前草水煎液和其所含黃酮類化合物、可溶性膳食纖維能有效清除·O2-和·OH-、DPPH等自由基[6-9]，其提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、青霉和假絲酵母等具有抑制作用[10-12]。本研究采用乙醇、丙酮、乙酸乙酯、石油醚4種不同極性的有機溶劑提取車前草粗提物，測試不同溶劑提取物對玉米象（sitophilus zeamais Motschulsky）、谷蠹（Tribolium castaneum）和赤擬谷盜（Rhyzopertha dominica Fbricius）成蟲的觸殺作用，以期為綜合評價車前草的生物活性和合理利用車前草資源提供基礎資料。

1 材料與方法

1.1 供試儲糧害蟲

供試3種儲糧害蟲于2009年8月采自國家直屬糧庫麻城英山分庫，經室內繼代飼養。玉米象、谷蠹以整粒小麥、赤擬谷盜以小麥粉于養蟲室飼養，養蟲室溫度（27±1） ℃、相對濕度（75±5）%，挑選羽化后約4周、大小一致的成蟲供試。

1.2 供試植物

車前草于2012年8月采自湖北省黃岡市黃州區，為帶有子實的全草。

1.3 試驗藥品

乙醇、丙酮、乙酸乙酯為分析純，石油醚沸程60～90 ℃。

1.4 植物提取物的制備

車前草洗凈，60 ℃烘干，粉碎機粉碎，過40目篩。分別以乙醇、丙酮、乙酸乙酯、石油醚4種溶劑采用冷浸法進行提取。稱取車前草粉末100 g裝入1 000 mL標本瓶，加入相應的溶劑500 mL，置于避光處，20～25 ℃浸提48 h，濾出上清液后向瓶中加入250 mL的溶劑浸提48 h，濾出上清液后加入150 mL溶劑繼續浸提24 h，收集3次所得濾液用旋轉蒸發儀55 ℃濃縮，放入通風櫥中通風至恒重，用丙酮將濃縮物稀釋至0.2 g/mL得到提取液，裝入棕色瓶于4 ℃保存。

1.5 觸殺試驗

1.5.1 4種提取物觸殺效果比較 觸殺試驗采用藥膜法。在直徑6.4 cm的培養皿底盤上滴加車前草提取液，再在每個培養皿中滴加200 μL丙酮使稀釋液均勻地涂布于培養皿上，在同規格的培養皿中滴入等量丙酮作為對照，待丙酮完全揮發后放入直徑12 cm的玻璃杯內，玻璃杯內壁涂刷滑石粉。培養皿中分別放入玉米象、谷蠹和赤擬谷盜30頭，玻璃杯上蓋扎有小孔的塑料培養皿蓋，加壓鐵環。每處理設3個重復。置于溫度（27±1） ℃、相對濕度（75±5）%全黑暗養蟲室內。于1、2、3 d后檢查觸殺效果，以撥針觸及成蟲觸角、足及尾部，不動者為死亡。計算校正死亡率，確定對試蟲觸殺效果最好的提取物。校正死亡率=（處理組死亡率-對照組死亡率）/（1-對照組死亡率）×100%。

1.5.2 3種提取物殺蟲活性檢測 根據1.5.1試驗結果，進行以下操作。在培養皿上分別滴加車前草丙酮提取液、石油醚提取液、乙醇提取液。每個培養皿藥液均用400 μL丙酮稀釋，后續操作同1.5.1。3個重復，以丙酮作為空白對照，分別于1、2、3 d后檢查觸殺效果，計算校正死亡率。

2 結果與分析

2.1 4種提取物觸殺效果比較

供試植物4種溶劑提取物對玉米象、谷蠹和赤擬谷盜3種試蟲觸殺效果見表1。由表1可見，在供試劑量處理下，對玉米象、谷蠹和赤擬谷盜的觸殺效果較好的提取物分別為丙酮提取物、石油醚提取物和乙醇提取物。

2.2 丙酮提取物對玉米象的觸殺作用

供試植物丙酮提取物對玉米象成蟲的觸殺試驗結果見表2。由表2可見，隨著丙酮提取物劑量的增加，玉米象成蟲校正死亡率升高，觸殺效果明顯增強。1.62 mg/cm2劑量對玉米象具有較強的觸殺作用，處理2 d試蟲校正死亡率達70.00%以上，處理3 d其校正死亡率達97.75%。

2.3 石油醚提取物對谷蠹的觸殺作用

供試植物石油醚提取物對谷蠹成蟲的觸殺試驗結果見表3。由表3可見，隨著石油醚提取物劑量的增加，谷蠹成蟲校正死亡率升高，觸殺效果明顯增強。1.62 mg/cm2劑量石油醚提取物處理2 d谷蠹校正死亡率達92.02%，處理3 d其校正死亡率達98.76%。

2.4 乙醇提取物對赤擬谷盜的觸殺作用

供試植物乙醇提取物對赤擬谷盜成蟲的觸殺試驗結果見表4。由表4可見，隨著乙醇提取物劑量的增加，赤擬谷盜成蟲校正死亡率升高，觸殺效果明顯增強。1.87 mg/cm2乙醇提取物處理3 d赤擬谷盜成蟲校正死亡率達98.86%，1.62 mg/cm2劑量處理3 d其校正死亡率達81.39%。

3 小結與討論

在試驗各處理中，車前草丙酮提取物對玉米象的觸殺效果最好，在最高劑量1.62 mg/cm2時，3 d后校正死亡率達97.75%；乙醇提取物對赤擬谷盜觸殺效果最佳，在最高劑量1.87 mg/cm2時，3 d后校正死亡率達98.86%；石油醚提取物對谷蠹觸殺效果最好，在最高劑量1.62 mg/cm2時，2 d后谷蠹校正死亡率達92.02%，3 d后達98.76%。

玉米象、赤擬谷盜和谷蠹分別對車前草丙酮提取物、乙醇提取物和石油醚提取物敏感，這可能是由于4種提取溶劑的極性不同，根據相似相溶原理，提取的物質可能有所差異。因此，有待進一步研究各提取物主要成分及其對主要儲糧害蟲的不同活性，研究其作用機制，為儲糧害蟲的有效無公害防控提供參考。

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（責任編輯 陳 焰）