摘要:木瓜蛋白酶結合三氯乙酸(TCA)法對米糠粗多糖進行脫蛋白,研究不同的酶添加量、酶解溫度、酶解pH、酶解時間、TCA用量、TCA處理次數、TCA處理時間對米糠粗多糖脫除蛋白效果和多糖損失的影響。結果表明,米糠粗多糖脫蛋白最佳工藝條件為酶添加量140 U/mL,酶解最適溫度55 ℃,最適pH 6.0,時間60 min;再用6% TCA作用30 min,3次重復,蛋白質脫除率為85.52%,多糖損失率為11.20%。
關鍵詞:米糠多糖;脫蛋白;三氯乙酸(TCA)法;蛋白質脫除率;多糖損失率
中圖分類號:TS210.9 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2013)20-5014-04
Removing Protein and Optimizing Condition from Rice Bran Polysaccharide
XUN Yun1,ZHANG Ying-qing2
(1.Biological Engineering Institute,Wuhan Institue of Technology, Wuhan 430072,China;
2.Bioengineering College, Hubei University of Technology,Wuhan 430068,China)
Abstract: The technology of protein removing from rice bran polysaccharide was studied by the combination of papain and trichloroacetic acid(TCA).The results showed that the best technological conditions were as the follows enzyme dosage 140 U/mL,hydrolysis temperature 55 ℃, pH 6.0, 60 min. Then the polysaccharides were treated with 6% TCA three times for 30 min, the rate of protein-removing was 85.52% and the rate of polysaccharide-losing was 11.20%.
Key words: rice bran polysaccharide; protein removing; trichloroacetic acid(TCA) method; the rate of protein-removing; the rate of polysaccharide-losing
多糖是與人類生活緊密相關的一類生物高分子物質,具有抗腫瘤、抗氧化、免疫調節、抗病毒、降血脂、抗凝血等多種生物活性。米糠是稻谷加工過程中的農副產物,通常米糠含油脂14%~24%、蛋白質12%~18%、無氮浸出物33%~35%、水分7%~14%、灰分8%~12%,此外還含有生育酚、生育三烯酚、脂多糖、谷維素、二十八碳烷醇、?琢-硫辛酸、角鯊烯、神經酰胺等多種天然抗氧化劑和生理功能卓越的生物活性物質。米糠中無氮浸出物主要為淀粉、纖維素和半纖維素,一部分半纖維素構成了水溶性米糠多糖(Rice bran polysaccharide,RBS),它是一種結構復雜的雜聚糖,由木糖、甘露糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖等組成[1-4]。
米糠多糖的提取方法有多種,包括傳統熱水浸提法、超聲波輔助提取法、高壓脈沖輔助提取法、微波輔助提取法等[5]。這些方法提取得到的米糠粗多糖都含有一定量的蛋白質。這些雜蛋白影響了米糠多糖的結構和功效。故脫除米糠粗多糖中的雜蛋白并保留米糠多糖十分重要[6]。
傳統Sevag法和三氯乙酸(TCA)法去除蛋白質通常需要重復10次,費時,樣品損失很大,而且需要處理廢液[7]?!?br>