氮素營養(yǎng)水平對膜下滴灌玉米穗位葉光合及氮代謝酶活性的影響

谷 巖，胡文河，徐百軍，王思遠，吳春勝，*

(1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)作物研究中心，長春 130118;2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，長春 130118;3.松原市寧江區(qū)民樂村農(nóng)民合作社，松原 138000)

玉米的產(chǎn)量和品質(zhì)除受遺傳因素影響外，與外界環(huán)境和栽培措施密切相關(guān)。氮肥作為玉米的主要生命元素，對產(chǎn)量和生理特性的影響較大［1］。氮素可通過葉綠素而影響CO2同化［2］和2個光系統(tǒng)PSⅠ和PSⅡ的含量與功能［3］，也可通過氮代謝酶系統(tǒng)而影響功能葉片的蛋白質(zhì)含量［4］，從而影響籽粒灌漿的碳水化合物來源［5］。有研究表明，葉片氮素含量與光合速率呈顯著正相關(guān)［6］，而2個光系統(tǒng)對氮素的響應(yīng)不同，缺氮使PSⅡ反應(yīng)中心蛋白降解程度遠大于PSⅠ［7］。因此，保持玉米生長過程中，尤其是花粒期較高的光合能力與充足的氮素供應(yīng)，對于保證葉片光合機構(gòu)免受光氧化破壞和提高產(chǎn)量有重要意義［8］。

關(guān)于施用氮肥對葉片光合性能及氮代謝酶活性的影響，在水稻［9－10］、小麥［11－14］、玉米［15－17］等作物中前人已有許多研究。段巍巍等人［4］研究表明，氮素提高了穗位葉葉片的Pn、葉綠素和可溶性蛋白含量，并通過調(diào)節(jié)光合電子傳遞能力和光合羧化酶的活性而影響表觀光合速率的高低。趙宏偉等人［15］通過氮肥施用量對春玉米功能葉片光合作用關(guān)鍵酶活性的研究指出，氮肥用量與RUBP和PEP羧化酶活性呈現(xiàn)階段性相關(guān)，不同品種相關(guān)程度不同。蘇凱等人［18］研究氮素對保綠性玉米穗位葉葉綠素?zé)晒鈪?shù)的調(diào)控表明，適度氮肥處理葉片光系統(tǒng)Ⅱ最大光化學(xué)效率和實際光化學(xué)效率均高于不施和過量氮肥處理。許多研究表明，葉片硝酸還原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)活性和蛋白質(zhì)含量在氮素同化和運轉(zhuǎn)中均起重要作用［19］。合理施用氮肥可提高葉片NR和GS活性［20－21］，降低蛋白酶活性［22］。綜上，前人對玉米葉片光合特性和氮代謝等方面做了很多研究，但針對吉林省西部旱區(qū)大壟雙行膜下滴灌種植方式下，氮肥對玉米穗位葉光合特性及氮代謝相關(guān)酶活性的綜合影響還鮮見報道。

吉林省是玉米生產(chǎn)的主要省份，也是干旱頻繁發(fā)生的省份。其中西部白城、松原等地區(qū)幾乎是“十年十旱”，不具備雨養(yǎng)農(nóng)業(yè)的條件，嚴(yán)重限制了玉米產(chǎn)量的提高。“十二五”期間，吉林省啟動千萬畝膜下滴灌灌溉工程，對于玉米的抗旱增產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)有重要的意義。本論文主要探討氮素水平對玉米穗位葉光合特征及氮代謝關(guān)鍵酶活性的影響，為玉米合理施肥、提高產(chǎn)量提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗條件

試驗在吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)西部試驗基地(吉林省松原市寧江區(qū)民樂村)進行。全年降雨量423 mm，活動積溫3050℃，無霜期135—140 d。試驗地土壤為黑鈣土，0—20 cm土層有機質(zhì)1.71%，全氮1.426 g/kg，全磷365.74 mg/kg，堿解氮 68.57 mg/kg，速效磷 14.12 mg/kg，速效鉀 130.99 79 mg/kg，pH 值 7.25。

1.2 試驗設(shè)計

供試玉米品種為先玉420。試驗采用隨機區(qū)組設(shè)計，3次重復(fù)。將傳統(tǒng)的65 cm小壟單行種植改為90 cm的大壟雙行種植方式。壟高12 cm，壟上行距40 cm，壟間行距90 cm。每小區(qū)5壟。設(shè)定5個氮肥處理:N0(0 kg/hm2)、N1(100 kg/hm2)、N2(200 kg/hm2)、N3(300 kg/hm2)、N4(400 kg/hm2)。整地時施入 75%的磷肥和鉀肥、30%的氮肥，播種時施入25%的磷肥和鉀肥，拔節(jié)和抽穗各追氮肥50%和20%。用滴管設(shè)備進行追肥:計算出各處理用肥量，將肥在大容器中溶解，再將溶液倒入首部的施肥罐中，開啟水泵，10—15 min內(nèi)肥液全部施入。4月25日進行膜下播種，鎮(zhèn)壓后進行土壤封閉除草、鋪設(shè)滴管毛管和覆膜。于玉米出苗2片葉時引苗，玉米生長過程中根據(jù)土壤墑情適時灌溉，保證各小區(qū)灌水一致，選用赤眼蜂防治玉米螟。10月3日收獲測產(chǎn)。

1.3 樣品采集及測定

從吐絲期開始每隔10d于9:00—11:00，每小區(qū)選取長勢均勻有代表性的植株6株，用Li－6400光合測定系統(tǒng)測定穗位葉凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)和氣孔導(dǎo)度(Gs)，并計算水分利用率(WUE);用FMS2脈沖制式熒光儀測定穗位葉葉綠素?zé)晒鈪?shù)，參照劉建新［23］的方法計算最大光化學(xué)效率(Fv/Fm)、實際光化學(xué)效率(ΦPSⅡ)、光化學(xué)猝滅(qP)。取下穗位葉，擦干凈表面后去除葉脈，一部分在105℃殺青后80℃烘干至恒重后粉碎，用凱氏定氮法測定葉片氮素含量;另外一部分葉片放入液氮中帶回實驗室，放于－86℃冰箱中保存進行以下指標(biāo)的測定。

磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和核酮糖二磷酸(RUBP)羧化酶活性分別參照Qi等［24］和李合生［25］方法。蛋白水解酶(內(nèi)肽酶和氨肽酶)活性參照李晶［22］的方法;硝酸還原酶活性和谷氨酰胺合成酶參照張志良［26］的方法。

1.4 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析;利用Excel軟件進行作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 氮素營養(yǎng)水平對玉米穗位葉氮素含量的影響

不同氮素水平處理玉米穗位葉氮素含量如圖1所示:在不施(N0)和少施(N1)氮肥處理下，玉米花粒期穗位葉氮素含量呈現(xiàn)逐漸降低的動態(tài)變化，在花后0—20 d降幅較小，21 d后迅速下降。N2、N3和N4處理，穗位葉氮素含量先升高后降低，最高值出現(xiàn)在花后20 d。此期，氮素最高含量(N4處理)比最低含量(N0處理)增加70%。在花后0—20 d，各處理穗位葉氮素平均含量順序為:N4＞N3＞N2＞N1＞N0，但花后30—50 d順序為:N3＞N4＞N2＞N1＞N0。

2.2 氮素營養(yǎng)水平對玉米光合特性的影響

2.2.1 氣體交換參數(shù)

不同氮素水平處理玉米穗位葉氣體交換參數(shù)如圖2所示:施入氮肥玉米穗位葉光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)和氣孔導(dǎo)度(Gs)均有不同程度的提高。整個玉米灌漿期穗位葉Pn和Tr變化趨勢類似，除N0水平隨著時間的推進逐漸降低，其他處理均先升高后降低?；ê?0—50 d，N3處理的平均Pn達32.8μmol m－2s－1，顯著高于其他處理。平均穗位葉水分利用效率(WUE)常用Pn和Tr的比值表示，指作物消耗單位水量所產(chǎn)生的同化物量。從圖中可以看出，在灌漿期間，WUE的變化比較平緩，N3處理平均WUE為4.64μmol/mmol，比N0、N1、N2和N4分別提高39.2%、28.3%、19.9%和6.09%。整個灌漿期間，N3處理穗位葉Gs均顯著高于其他處理。

2.2.2 葉綠素?zé)晒馓匦?/p>

Fv/Fm是暗適應(yīng)光系統(tǒng)Ⅱ反應(yīng)中心完全開放時原初光能轉(zhuǎn)換效率［27］;實際光化學(xué)效率(ΦPSⅡ)反映開放的PSⅡ反應(yīng)中心在有部分關(guān)閉的情況下實際原初光能捕獲效率，葉片不經(jīng)過暗適應(yīng)在光下直接測得［11］。由圖3可知，花后不同生育時間玉米穗位葉Fv/Fm因氮素營養(yǎng)水平而不同。N0和N1處理Fv/Fm和ΦPSⅡ均隨著花后生育進程的推進逐漸降低。氮肥的增加顯著提高了Fv/Fm和ΦPSⅡ，但二者在花后變化趨勢不同。N2、N3和N4處理的Fv/Fm先升高后下降，花后10 d最大，平均為0.84;ΦPSⅡ呈現(xiàn)降低－升高－降低的變化，花后10 d和20 d分別為低谷和高峰點。此外，花后30—50 d，N3處理的 Fv/Fm和 ΦPSⅡ分別比 N2和 N3平均增加6.21%和11.1%。光化學(xué)猝滅(qP)的變化趨勢與Fv/Fm類似?；ê?0 d N3處理穗位葉平均qP比其他各處理分別增加 63.3%(比 N0)，50.9%(比 N1)，8.6%(比N2)，13.7%(比 N4)。

圖1 不同氮素水平處理玉米葉片氮素含量Fig.1 The nitrogen content of leaves in different nitrogen treatments of maize

圖2 不同處理玉米葉片氣體交換參數(shù)和水分利用率的動態(tài)變化Fig.2 The dynamic change of gas exchange parameters and water use efficiency in different nitrogen treatments of maize

2.2.3 光合作用關(guān)鍵酶活性

PEP和RUBP羧化酶是玉米光合碳素同化的關(guān)鍵

酶［15］。從圖4可以看出，不同氮肥處理RUBP羧化酶活性呈現(xiàn)逐漸降低的變化。N2、N3和N43個氮肥處理葉片RUBP羧化酶活性無顯著差異，均高于N0和N1處理，N2、N3和N4平均酶活性比N0和N1平均增加67.6%。PEP羧化酶除N0處理逐漸降低，其他處理均先升高后降低，最高點各不相同。花后不同處理PEP羧化酶平均活性為:N3＞N2＞N4＞N1＞N0。

圖3 不同氮素水平處理玉米穗位葉葉綠素?zé)晒鈪?shù)的動態(tài)變化Fig.3 The dynamic change of chlorophyll fluorescence parameters in different nitrogen treatments of maize

圖4 不同氮素水平處理玉米穗位葉PEP和RUBP羧化酶活性的動態(tài)變化Fig.4 The dynamic change of activity of PEPcase and RUBPcase in different nitrogen treatments of maize

2.3 氮代謝關(guān)鍵酶活性

2.3.1 硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶活性硝酸還原酶(NR)是植物同化NO－3過程中的關(guān)鍵酶，其活性高低與植物體內(nèi)氮同化能力密切相關(guān);谷氨酰胺合成酶(GS)是處于氮代謝中心的多功能酶，其活性的提高可帶動氮代謝運轉(zhuǎn)增強，促進氨基酸的合成和轉(zhuǎn)化［22］。從圖5可以看出，花后N4和N0處理穗位葉NR活性逐漸降低;N1、N2和N3先升高后降低，在花后20 d達最高點，此時N3比其他個處理分別增加39.6%(比N0)，22.9%(比N1)，7.2%(比N2)，13.6%(比N4)。N0、N1和N2花后玉米穗位葉GS活性呈現(xiàn)單峰曲線，而N3和N4為降低—升高—降低的變化。其中N2和N3處理的最高點比其他處理晚。各處理平均GS活性為:N3＞N2＞N4＞N1＞N0。

圖5 不同氮素水平處理玉米穗位葉硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶活性的動態(tài)變化Fig.5 The dynamic change of activity of nitrate reductase and glutamine synthetase in different nitrogen treatments of maize

2.3.2 蛋白水解酶的影響

蛋白水解酶的活性高低決定著蛋白質(zhì)的降解程度。內(nèi)肽酶水解蛋白質(zhì)中間部分的肽鍵成小肽;氨肽酶作為外肽酶從氨基末端逐步降解氨基酸殘基［22］。不同氮素水平處理玉米穗位葉蛋白水解酶的影響如圖6所示:增施氮肥有效降低了穗位葉蛋白水解酶的活性?；ê蟾魈幚砥骄鶅?nèi)肽酶和氨肽酶活性均為:N0＞N1＞N2＞N4＞N3。對于穗位葉內(nèi)肽酶活性，N0和N1處理在花后20 d迅速升高，即蛋白降解能力開始加強，而其他3個處理在花后30 d活性迅速升高;氨肽酶活性則呈現(xiàn)逐漸增加的動態(tài)變化。

圖6 不同處理玉米穗位葉蛋白水解酶活性的動態(tài)變化Fig.6 The dynamic change of activity of proteolytic enzyme in different nitrogen treatments of maize

2.4 穗位葉氮含量與光合及氮代謝相關(guān)酶活性的關(guān)系

從表1可以看出，玉米花后各時期穗位葉氮含量與葉綠素、氣體交換參數(shù)(Pn、Tr和Gs)、葉綠素?zé)晒鈪?shù)(Fv/Fm、ΦPSⅡ和qP)、PEP和RUBP羧化酶、硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶等均呈現(xiàn)正相關(guān)，與內(nèi)肽酶和氨肽酶呈現(xiàn)負相關(guān)，差異顯著性因花后不同時期而不同。說明玉米穗位葉蛋白水解酶活性的降低，促進了花后葉片的氮素同化，有利于葉片氮素的合成和積累。

3 討論

延長花后功能葉片的光合作用持續(xù)時間和較高的光合速率是作物獲得高產(chǎn)的重要保障［28］。增施氮肥有效增加了花后玉米穗位葉氮素含量，延長了玉米葉片光合功能持續(xù)期，提高了花后光合物質(zhì)的生產(chǎn)能力。各處理玉米穗位葉的光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)和水分利用效率(WUE)均因不同氮肥量的施入而有不同程度的提高，以N3處理最顯著，在生育中后期仍能保持較高的Pn、Tr、Gs和WUE值。但在時間上，以上指標(biāo)并不完全同步。葉子飄等人［29］根據(jù)葉片氣孔導(dǎo)度的機理模型，也指出冬小麥在不同環(huán)境條件下，葉片氣孔導(dǎo)度和光合速率并不同步。

表1 花粒期穗位葉氮素含量與光合及氮代謝相關(guān)酶活性的關(guān)系Table 1 Correlationship between nitrogen content and photosynthetic index and relevant enzyme activity of nitrogen metabolism in ear-leaf at different stage after anthesis

葉綠素?zé)晒鈪?shù)在測定葉片光合作用過程中光系統(tǒng)對光能的吸收、傳遞等方面具有獨特的作用［27］。在熒光誘導(dǎo)動力學(xué)參數(shù)中，可變熒光(Fv)和最大熒光(Fm)的比值表示PSⅡ最大光合量子產(chǎn)量，即最大光化學(xué)效率［14］。實際光化學(xué)效率(ΦPSⅡ)是PSⅡ的有效量子產(chǎn)量，是植物葉片光合電子傳遞速率的相對指標(biāo);光化學(xué)猝滅系數(shù)(qP)代表PSⅡ反應(yīng)中心開放部分的比例，反應(yīng)PSⅡ天線色素吸收的光能用于光化學(xué)反應(yīng)的份額［14］。Fv/Fm不受物種的影響，受環(huán)境條件及脅迫狀態(tài)影響較大［30］。在不施和低氮處理中(N0和N1)，花后10 d Fv/Fm最高，此后即迅速降低，成熟期僅為0.6。而N3處理玉米穗位葉Fv/Fm一直保持在0.75以上。說明N3處理下，光系統(tǒng)Ⅱ在玉米生育中后期仍然具有完整的功能保證有效的利用捕獲的光能。在葉綠素?zé)晒鈪?shù)中，ΦPSⅡ和qP的降低說明光合電子傳遞受到了抑制，PSⅡ光能轉(zhuǎn)換效率降低，過剩激發(fā)能增加［32］。蔡瑞國對小麥的研究中指出，小麥灌漿期旗葉中光能的吸收和利用之間存在著矛盾，過剩的光能會使葉片產(chǎn)生光抑制或光破壞，加速葉片的衰老［11］。在本研究中，花后30—50 d，各氮肥處理玉米穗位葉Fv/Fm的平均降幅為8.44%，而CO2同化速率(Pn)的降幅為57.24%，證實了蔡瑞國的研究結(jié)果。此外，若PSⅡ和PSⅠ之間電子傳遞受阻導(dǎo)致2個光系統(tǒng)失衡，葉片的光合速率也會相應(yīng)的下降［31］。

PEP和RUBP羧化酶是光合碳同化中重要的兩種酶［15］。葉片在衰老或遭到脅迫時兩種酶降解速度顯著加快，PEP羧化酶對氮肥的響應(yīng)較RUBP羧化酶敏感。不施(N0)或極少量的氮肥施入(N1)才顯著降低RUBP羧化酶活性;而PEP羧化酶則不同，只有N3處理活性最高，即適宜的氮肥施用量才能使PEP羧化酶充分活化，改善葉片的光合碳同化能力。此外，趙宏偉［15］等人在對春玉米光合作用關(guān)鍵酶活性的研究中，從吐絲期—灌漿期—成熟期，PEP羧化酶活性一直呈現(xiàn)逐漸降低的變化，而在本研究中，在花后20 d以后PEP羧化酶活性才開始下降?？赡芤驗樵谀は碌喂嗟姆N植模式下，作物對氮肥的吸收率和利用率要高于傳統(tǒng)種植模式，使得作物穗位葉PEP羧化酶活性下降緩慢。

硝酸還原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)是植物氮素代謝中的關(guān)鍵酶，其活性高低與土壤的供肥能力密切相關(guān)［33］。氮肥不足和過量均限制NR和GS活性的提高，促進了內(nèi)肽酶和氨肽酶活性的增加［22］。有研究表明，在一定范圍內(nèi)，隨著施氮量的增加，GS活性變化不明顯［34］。但本試驗中，N3處理顯著增加了NR和GS活性，NR活性在花后20 d差異最顯著。而GS活性在花后30 d差異最顯著。增施氮肥蛋白質(zhì)水解酶的降低，說明玉米花后葉片的氮素同化能力增強，蛋白質(zhì)的降解能力減弱，有利于葉片蛋白質(zhì)的積累，可有效延緩葉片的早衰。

合理的氮肥可保證玉米葉片氮代謝酶機制的暢通和高效運轉(zhuǎn)。在氮素低于200 kg/hm2時，由于前期缺肥，不利于營養(yǎng)體的生長和發(fā)育，進而影響玉米中后期穗位葉的功能和生理特性。此時如果再不能保證后期的追肥量，則難以發(fā)揮氮肥的補償效應(yīng);而施氮量達到400 kg/hm2，也會使作物對氮肥的吸收達到飽和狀態(tài)，同樣限制了光合作用和酶活性的提高。在本文大壟雙行膜下滴灌的種植模式下，氮肥的供應(yīng)強度和利用效率比傳統(tǒng)種植方式有了較大的提高，更應(yīng)該施入適宜氮肥(300 kg/hm2)，使玉米生育后期功能葉片仍具有較強的光捕獲能力和光化學(xué)效率，改善功能葉片的光合性能，延緩光合器官的衰老，為玉米產(chǎn)量的提高奠定良好基礎(chǔ)。

［1］Shangguan Z P，Shao M G，Dyckmans J.Effects of nitrogen nutrition and water deficit on net photosynthetic rate and chlorophyll fluorescence in winter wheat.Journal of Plant Physiology，2000，156(1):46－51.

［2］Rufty T W，Huber SC，Volk RJ.Alterations in leaf carbohydrate metabolism in response to nitrogen stress.Plant Physiology，1988，88(3):725－730.

［3］Berges JA，Charlebois D O，Mauzerall D C，F(xiàn)alkowski P G.Differential effects of nitrogen limitation on photosynthetic efficiency of photosystemsⅠ and Ⅱ in microalgae.Plant Physiology，1996，110(2):689－696.

［4］Duan WW，Li H L，Xiao K，Li Y M.Effects of nitrogen fertilizer on photosynthesis and its physiological and biochemical characteristics in ear－leaf of maize.Acta Agriculturae Boreali－Sinica，2007，22(1):26－29.

［5］Mae T，Kai N，Makino A，Ohira K.Relation between ribulose bisphosphate carboxylase content and chloroplast number in naturally senescing primary leaves of wheat.Plant and Cell Physiology，1984，25(2):333－336.

［6］Sage RF，Pearcy RW.The nitrogen use efficiency of C3and C4plants.Ⅱ.Leaf nitrogen effects on the gas exchange characteristics of Chenopodium album(L.)and Amaranthus retroflexus(L.).Plant Physiology，1987，84(3):959－963.

［7］Kolber Z，F(xiàn)alkowski P G.Effects of growth irradiance and nitrogen limitation on photosynthetic energy conversion in photosystem Ⅱ.Plant Physiology，1988，88(3):923－929.

［8］Lu CM，Lu Q T，Zhang J H，Kuang T Y.Characterization of photosynthetic pigment composition，photosystem Ⅱ photochemistry and thermal energy dissipation during leaf senescence of wheat plants grown in the field.Journal of Experimental Botany，2001，52(362):1805－1810.

［9］Makino A.Photosynthesis，grain yield，and nitrogen utilization in rice and wheat.Plant Physiology，2011，155(1):125－129.

［10］Li Y，Sun Y J，Cheng H B，Zheng H Z，Yang Z Y，Jia X W，Liu SJ，Hu R，M J.Effects of nitrogen application strategy and cultivation model on the performances of canopy apparent photosynthesis of Indica Hybrid Rice Eryou 498 during filling stage.Acta Agronomica Sinica，2011，37(9):1650－1659.

［11］Cai R G，Zhang M，Yin Y P，Wang P，Zhang T B，Gu F，Dai Z M，Liang T B，Wu Y H，Wang Z L.Photosynthetic characteristics and antioxidative metabolism of flag leaves in responses to nitrogen application in wheat during grain filling.Scientia Agricultura Sinica，2008，41(1):53－62.

［12］Ma D H，Zhao CX，Wang Y F，Wu G，Lin Q.Effects of nitrogen fertilizer rate and postanthesis soil water content on photosynthetic characteristics in flag leaves and yield of wheat.Acta Ecologica Sinica，2008，28(10):4896－4901.

［13］Sun X S，Li Q，Zhao C X，Zhai Y J，Wu G，Jaleel C A.Effects of nitrogen application rate on light－response curves of flag leaves in super－h(huán)igh yielding winter wheat at grain filling stage.Acta Ecologica Sinica，2009，29(3):1428－1437.

［14］Wu W M，Chen H J，Li JC，Wei FZ，Wang SJ，Zhou X H.Effects of nitrogen fertilization on chlorophyll fluorescence parameters of flag leaf and grain filling in winter wheat suffered waterlogging at booting stage.Acta Agronomica Sinica，2012，38(6):1088－1096.

［15］Zhao H W，Zou D T，F(xiàn)u C Y.Effect of application levels of nitrogen fertilizer on activity of key enzyme in photosynthesis and Pn of spring maize.Journal of Maize Sciences，2006，14(3):161－164.

［16］Yang L，Zhao H W，Liu JH.Effects of different nitrogen application on GSactivity and yield in different quality spring maize varieties.Journal of Northeast Agricultural University，2007，38(3):320－324.

［17］Singaram P，Kamalakumari K.Effect of continuous manuring and fertilization on maize grain quality and nutrient soil enzyme relationship.Madras Agriculture，2000，86(1/3):51－54.

［18］Su K，Hao Y B，Wang G，Liu S K，Yang J S，Dong S T，Zhang J W，Liu P.Effects of nitrogen regulation on yield and photosynthetic characteristics of different stay－green maize.Shandong Agricultural Sciences，2011，(9):71－75.

［19］Gao L，Ye M B，Zhang R X，Xu L L.Endopeptidases in wheat flag leaves during aging.Acta Physiologica Sinica，1998，50(2):183－188.

［20］Paula M M，Ligia M L，Isabel M S，Carvalho H G，Cullimore JC.Expression of the plastid－located glutamine synthetase of Medicago truncatula.accumulation of the precursor in root nodules reveals an in vivo control at the level of protein import into plastids.Plant Physiology，2003，132(1):390－399.

［21］Richardson M D，Cabrera R I，Murphy J A，Zaurov D E.Nitrogen－form and endophyte－infection effects on growth，nitrogen uptake，and alkaloid content of Chewings fescue turf grass.Journal of Plant Nutrition，1999，22(1):67－79.

［22］Li J，Ji B，Shang WN，Chen L T，Wei L，Wei S.Effects of density and nitrogen on relevant enzyme activity of nitrogen metabolism and nutritional quality of grain in triticale.Plant Nutrition and Fertilizer Science，2010，16(5):1063－1068.

［23］Liu JX，Wang J C，Wang X，Wang R J.Regulation of exogenous nitric oxide on photosynthetic physiological response of Lolium perenne seedlings under NaHCO3stress.Acta Ecologica Sinica，2012，32(11):3461－3466.

［24］Qi Q G，Li K，Li G，Li C Y，Cao G J.Influences of nitrogen level on carbon metabolism of spring maize.Agricultural Science and Technology，2010，11(4):34－36.

［25］Li H S.The Principle and Technology of Plant Physiology and Biochemistry Experiment.Beijing:Higher Education Press，2005:134－140.

［26］Wang W G，Li L R.A simplified purification method of RuBP carboxylase from spinach leaves.Acta Phytophysiologica Sinica，1980，6(3):257－262.

［27］Wei L，Xiong Y C，Ma B L，Ma C，Zhang H Q，Shao Y，Li P F，Chen Z G，Wang T C.Photosynthetic characterization and yield of summer corn(Zea mays L.)during grain filling stage under different planting pattern and population densities.Acta Ecologica Sinica，2011，31(9):2524－2531.

［28］Thomas H，Morgan W G，Thomas A M，Ougham H J.Expression of the stay－green character introgressed into Lolium temulentum Ceres from a senescence mutant of Festuca pratensis.TAG Theoretical and Applied Genetics，1999，99(1/2):92－99.

［29］Ye Z P，Yu Q.Mechanism model of stomatal conductance.Chinese Journal of Plant Ecology，2009，33(4):772－782.

［30］Jiang D，Dai T，Jing Q，Cao W，Zhou Q，Zhao H，F(xiàn)an X.Effects of long－term fertilization on leaf photosynthetic characteristics and grain yield in winter wheat.Photosynthetica，2004，42(3):439－446.

［31］Pfaanschmigt T，Br?utigam K，Wagner R，Dietzel L，Schr?ter Y，Steiner S，Nykytenko A.Potential regulation of gene expression in photosynthetic cells by redox and energy state:approaches towards better understanding.Annals of Botany，2009，103(4):599－607.

［32］Santos C V.Regulation of chlorophyll biosynthesis and degradation by salt stress in sunflower leaves.Scientia Horticulturae，2004，103(1):93－99.

［33］Tischner R.Nitrate uptake and reduction in higher and lower plants.Plant Cell and Environment，2000，23(10):1015－1024.

［34］Singletary G W，Doehlert D C，Wilson C M，Muhitch M J，Below F E.Response of enzymes and storage proteins of maize endosperm to nitrogen supply.Plant Physiology，1990，94(3):858－864.

參考文獻:

［4］段巍巍，李慧玲，肖凱，李雁鳴.氮肥對玉米穗位葉光合作用及其生理生化特性的影響.華北農(nóng)學(xué)報，2007，22(1):26－29.

［10］李旭毅，孫永健，程宏標(biāo)，鄭洪幀，楊志遠，賈現(xiàn)文，劉樹金，胡蓉，馬均.氮肥運籌和栽培方式對雜交秈稻Ⅱ優(yōu)498結(jié)實期群體光合特性的影響.作物學(xué)報，2011，37(9):1650－1659.

［11］蔡瑞國，張敏，尹燕枰，王平，張體彬，顧鋒，戴忠民，梁太波，鄔云海，王振林.小麥灌漿過程中旗葉光合及抗氧化代謝與氮素營養(yǎng)關(guān)系研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，41(1):53－62.

［12］馬東輝，趙長星，王月福，吳鋼，林琪.施氮量和花后土壤含水量對小麥旗葉光合特性和產(chǎn)量的影響.生態(tài)學(xué)報，2008，28(10):4896－4901.

［13］孫旭生，林琪，趙長星，翟延舉，吳鋼，Jaleel C A.施氮量對超高產(chǎn)冬小麥灌漿期旗葉光響應(yīng)曲線的影響.生態(tài)學(xué)報，2009，29(3):1428－1437.

［14］武文明，陳洪儉，李金才，魏鳳珍，王世濟，周向紅.氮肥運籌對孕穗期受漬冬小麥旗葉葉綠素?zé)晒馀c籽粒灌漿特性的影響.作物學(xué)報，2012，38(6):1088－1096.

［15］趙宏偉，鄒德堂，付春艷.氮肥施用量對春玉米光合作用關(guān)鍵酶活性和光合速率的影響.玉米科學(xué)，2006，14(3):161－164.

［16］楊亮，趙宏偉，劉錦紅.氮素用量對春玉米功能葉片谷氨酰胺合成酶活性及產(chǎn)量的影響.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2007，38(3):320－324.

［18］蘇凱，郝玉波，王貴，劉少坤，楊今勝，董樹亭，張吉旺，劉鵬.氮肥調(diào)控對不同保綠性超高產(chǎn)夏玉米產(chǎn)量及光合特性的影響.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，(9):71－75.

［22］李晶，吉彪，商文楠，陳龍濤，魏玲，魏湜.密度和氮素水平對小黑麥氮代謝相關(guān)酶活性和子粒營養(yǎng)品質(zhì)的影響.植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報，2010，16(5):1063－1068.

［23］劉建新，王金成，王鑫，王瑞娟.外源NO對NaHCO3脅迫下黑麥草幼苗光合生理響應(yīng)的調(diào)節(jié).生態(tài)學(xué)報，2012，32(11):3461－3466.

［25］李合生.植物生理生化實驗原理和技術(shù).北京:高等教育出版社，2005:134－140.

［26］王維光，李立人.菠菜二磷酸核酮糖(RuBP)羧化酶簡化提純研究.植物生理學(xué)報，1980，6(3):257－262.

［27］衛(wèi)麗，熊友才，Ma B L，馬超，邵陽，張慧琴，李樸芳，程正國，王同朝.不同群體結(jié)構(gòu)夏玉米灌漿期光合特征和產(chǎn)量變化.生態(tài)學(xué)報，2011，31(9):2524－2531.

［29］葉子飄，于強.植物氣孔導(dǎo)度的機理模型.植物生態(tài)學(xué)報，2009，33(4):772－782.