血清胸苷激酶1表達水平在對惡性腫瘤患者診斷及療效評價中的臨床價值

韓 亮 劉 勇

胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)是1種存在于細胞質中的激酶，含量高低與細胞的增殖程度相關[1]。健康人群血清中TK1濃度極其微量或檢測不到，而惡性腫瘤患者血清中TK1水平顯著升高，可達2～100倍[2]。我們采用免疫印記增強化學發光法檢測惡性腫瘤患者化療前后血清中TK1表達水平，并與健康人群進行對比，以探討其在對惡性腫瘤診斷及療效評價中的作用。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集2011年6月至2012年6月徐州市中心醫院收治的，有明確細胞學或病理學診斷證實的100例惡性腫瘤患者血清。100例中肺癌35例，大腸癌10例，胃癌10例，乳腺癌15例，卵巢癌10例，惡性淋巴瘤5例，軟組織肉瘤5例，其他腫瘤10例。患者年齡40～70歲，平均年齡(56.7±11.6)歲。門診健康體檢者20例，年齡30～65歲，平均年齡(46.8±10.7)歲。所有入選者排除黃疸、急性感染、胃潰瘍或出血、女性月經期及脂血、溶血等因素；惡性腫瘤患者均有臨床或影像學可測量病灶，健康體檢者排除腫瘤。

1.2 方法

空腹采靜脈血2 ml，3 h內以4000 r/min離心8～10 min分離血清，-20°冰箱保存備檢。TK1濃度測定采用免疫印記增強化學發光法，具體操作按照試劑盒說明書進行。TK1測定值以2.0 pmol/L為標準閾值，>2.0 pmol/L為異常。

1.3 療效評定

化療2個周期后，按WHO標準統一評價[3]，分完全緩解、部分緩解、穩定和進展

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 不同實驗組間TK1濃度測定結果比較

惡性腫瘤組血清TK1濃度顯著高于健康人群組，2個周期化療后，部分緩解組的TK1濃度明顯下降，與化療前及化療后進展組比較有統計學差異，見表1。

表1 各組TK1濃度比較

2.2 不同實驗組間TK1陽性檢出率比較

惡性腫瘤患者化療前TK1的陽性檢出率明顯高于健康人群組，與2周期化療后進展組及部分緩解組間差異亦有統計學意義，見表2。

表2 各組TK1陽性檢測率比較(例,%)

2.3 ROC曲線分析血清TK1濃度在惡性腫瘤早期診斷中的價值

本實驗中，TK1檢測惡性腫瘤的靈敏度為74%，特異度為95%。經ROC分析，其曲線下面積為0.943，95%可信區間為(0.891，0.994)，經檢驗，差異有統計學意義(P<0.001)。結果表明：TK1對惡性腫瘤的早期診斷具有較高的準確性，見圖1。

圖1 TK1診斷惡性腫瘤的ROC曲線分析

3 討論

早在上個世紀60年代，Weissman等已證實TK是胸腺嘧啶核苷合成DNA的關鍵酶[4]。后期的研究表明，TK有TK1和TK2二種同工酶，其中，TK1的水平與細胞周期中的S期(DNA合成期)的DNA合成密切相關，被稱為是DNA合成期的特殊酶。TK1參與細胞周期的調控，并與細胞分裂密切相關。在1個完整細胞增殖周期中，TK1在G1期(DNA合成前期)時含量比較低，到S期以后逐漸升高，至G2期(DNA合成后期)時達到最高[5,6]。TK1水平與細胞增殖狀態密切相關，可以作為細胞增殖標記物來檢測細胞的增殖活性[7]。同時，基于惡性腫瘤細胞的高增殖特點，TK1還可作為1種敏感特異的腫瘤標記物來反映惡性腫瘤的增殖狀態[8～10]。目前，TK1不僅作為惡性腫瘤的療效判斷和預后指標，同時也是惡性腫瘤篩查和診斷的良好標志物[11,12]，在肺癌、乳腺癌、膀胱癌、大腸癌等惡性腫瘤中已有相關報道[13,14]。

本實驗表明，TK1在惡性腫瘤患者中的濃度是(3.65±2.31)pmol/L，與健康人群組相比，其差異有顯著性(P<0.01)；其作為惡性腫瘤的輔助篩查指標，特異度為74%，靈敏度為95%，ROC曲線下面積為0.943，可信度較高。與本實驗結果相近，國內一項納入35000例患者的大宗研究結果同樣顯示，血清TK1可以作為1個可靠的指標，對惡性腫瘤有著預測及早期診斷的意義[15]。同時，在化療過程中，TK1的表達水平變化與腫瘤的控制率有一定的關系，表現為，腫瘤部分緩解組的TK1水平下降，而進展組的TK1水平升高，其原因與腫瘤細胞的增殖程度高低有關。本實驗結果與相關文獻的報道一致[16～18]。

TK1的表達水平與某些腫瘤的預后存在密切聯系。Sergej等的研究證實，在慢性淋巴細胞白血病患者中，血清高TK1濃度提示患者預后不佳，部分患者發展為大B細胞淋巴瘤[19]。Yan Xu等的研究證實，組織中TK1表達強度與病理學基質侵犯程度有一定相關，兩者聯合，可以更好的判斷分期為T1的肺腺癌患者的預后，高TK1表達的患者提示預后不佳[20]。在本實驗中，可以發現，隨著腫瘤病期的發展，血清TK1濃度有升高趨勢，但因為入組病例數不足，且大部分病例均為中晚期患者，因而不能夠進行統計學分析。今后的研究可以通過納入足夠的病例數，判定分析兩者間的關系。

綜上所述，血清TK1表達水平對惡性腫瘤的診斷及療效評價具有重要的參考價值，在臨床上可以作為惡性腫瘤患者常規的血清學標志物檢查指標。

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