健康成人尿酶及微量蛋白研究分析

譚 艷，韓曉芳，賈海琴

（內蒙古自治區人民醫院 檢驗科，內蒙古 呼和浩特010017）

尿液酶及微量蛋白的分析檢測，做為一種無創傷性檢驗，在臨床腎臟疾病的早期診斷起著重要的作用［1－2］。本文對120名健康成人尿海藻糖酶（trehalase，T）、尿 N－乙酰－β－D 氨基葡萄糖苷酶 （N－acetyl－D－glucosaminidase，NAG）、r－谷氨酰轉酞酶（gamma－glutamyl transferase，GGT）3種尿酶及尿β2－微球蛋白（β2－MG）進行了研究分析。

1 對象和方法

1.1 病例選擇 在我院院進行健康體檢、均排除肝腎等疾病者120名，男68名，女52名，年齡18－56歲。

1.2 檢測方法

1.2.1 標本采集 留晨尿，離心后進行檢測。檢測儀器：OLYMPUS AU2700

1.2.2 尿T測定 采用Sasai－Takedatsu M［3］測定方法，即將尿液標本經過SephadexG－25凝膠層析柱除去內源性葡萄糖后加入海藻糖，海藻糖被海藻糖酶催化分解生成葡萄糖，檢測生成的葡萄糖，以每小時每升尿液中釋放多少微摩爾的葡萄糖量作為海藻糖酶的活性濃度（μmol／h.L）。葡萄糖測定采用葡萄糖氧化酶和過氧化物酶偶聯法，試劑由北京中生公司提供。

1.2.3 尿 NAG（IU／L）測定采用比色法測定，尿β2－MG（mg／L）采用免疫比濁法測定。由于尿β2－MG受標本存放時間、溫度及pH的影響，因此標本采集后用1mol／L的NaOH調節到pH7－9并及時在2h內進行檢測［4］。尿 GGT（U／L）采用酶速率法測定；尿肌酐（g／L）采用速率比色法測定，試劑由OLYMPUS公司提供。檢測儀器：OLYMPUS AU2700。

1.2.4 為了消除尿量變化對檢測數據的影響，尿T、NAG和GGT結果與尿肌酐（Cr）比值計算。

1.2.5 統計學分析 應用SPSS 11.5統計軟件進行正態性檢驗，呈正態分布數據比較用t檢驗，呈偏態分布數據用中位數表示，數據比較用非參數秩和檢驗（Mann－Whitney檢驗）。P＜0.05為具有顯著性差異。

2 結果

2.1 120例健康者尿T、NAG 、GGT、β2－MG各項目檢測結果

尿T和β2－MG呈正偏態分布（Z＝1.124、1.12；P＝0.16、0.162），結果分別為6.95±3.92 μmol／h.gCr、0.14±0.09（mg／gCr）；尿 NAG、GGT呈偏態分布（Z＝1.626、1.369；P＝0.01、0.047），結果分別為6.2（5.3－7.7）、33.4（18.5－43.4）（U／gCr）［中位數（四分位數）］

2.2 120例健康者按性別分兩組，兩組尿T、NAG、GGT、β2－MG檢測結果男女間比較見附表1。

表1 不同性別尿T、NAG、GGT、β2－MG檢測結果

3 結果

3.1 尿海藻糖酶為近似正態分布，男女間差異無統計學意義，按照95%的的參考范圍（±1.96s）為0－14.6μmol／h.gCr。

3.2 NAG為偏態分布，男女間差異無統計學意義，第95 百分位數為 11.2；其參考范圍為 0－11.2 U／gCr。

3.3 GGT為偏態分布，男女間差異無統計學意義，第95百分位數為56.6，其正常參考范圍為0－56.6 U／gCr。

3.4 尿β2－MG為正偏態分布，男女間差異無統計學意義，按照95%的參考范圍（±1.96s）為0－0.32 U／gCr。

4 討論

尿海藻糖酶是近幾年發展的新的近端腎小管損害指標，它僅產生于近端腎小管和小腸黏膜上皮細胞，由于在正常體液時帶有大量負電荷，血中濃度低、分子量大，故不能從腎小球濾過。因此，尿中海藻糖酶只源于近端腎小管上皮細胞。在腎小管上皮細胞受損時就會發生改變，即能早期、敏感地反映近端腎小管上皮細胞的損害［5，6］。NAG來源于近端小管上皮細胞的溶酶體，當腎臟實質性病變時 腎小管上皮細胞的破壞可使尿中NAG活性顯著增高，對于腎小管間質病變NAG是一個很靈敏且特異性較強的反映腎實質損傷的指標［2，7］。β2－MG是可通過腎小球濾過的低分子量蛋白質，幾乎全部被近曲小管重吸收，在近端腎小管損傷時尿β2－MG升高［2，7，8］。人體大多臟器含豐富的 GGT，但尤以腎臟含量最高。尿GGT是一種細胞分泌酶，主要來自腎近曲小管的刷狀緣，其生理功能是催化谷胱甘肽或其他谷胱酰基的多肽的谷氨基轉移到合適的受體上去。有報道認為GGT可作為診斷早期腎損害的依據［9］。

本研究選擇120例健康者體檢者進行了尿海藻糖酶及尿NAG、尿GGT、尿β2－MG的檢測分析，確立了尿海藻糖酶的正常參考范圍為0－14.6μmol／h.gCr、尿 NAG的正常參考范圍為0－11.2U／gCr、尿GGT的正常參考范圍為0－56.6U／gCr、尿β2－MG的正常參考范圍為0－0.32U／gCr。上述指標正常參考范圍的確立，為其在臨床上合理應用提供了實驗依據，有助于臨床腎臟功能的判斷及腎臟損傷性疾病的診斷及治療。

［1］胡中慧，王全軍，廖明陽.腎損傷的生物標志物研究進展［J］.毒理學雜志，2009，23（6）：490.

［2］趙紅娟，劉 紅，姬佳妮，等.尿 mAlb、NAG、β2－MG、α1－MG 檢測對腎臟疾病的臨床意義［J］.西部醫學，2011，23（2）：234.

［3］Sasai－TakedatsuM，TaketaniS，Nagata N，et al.Human trehalaes：characterization，localization，and its increase in urine by renal proximal tubular damage［J］.Nephron，1996，73：179.

［4］張艷菊，劉吉純.堿性尿貯存溫度、時間對β2微球蛋白穩定性的影響［J］.中華實用診斷與治療雜志，2010，24（3）：268.

［5］Sasai－Takedatsu M，Taketani S，Nagata N，et al.Human trehalaes：characterization，localization，and its increase in urine by renal proximal tubular damage［J］.Nephron，1996，73：179.

［6］彭懷燕，張普山，高應東，等.尿海藻糖酶對近端腎小管損傷的臨床意義［J.中國現代醫學雜志，2005，15（8）：1194.

［7］李熙建，譚同均，朱國文，等.胱抑素C與尿微量蛋白及尿酶聯合檢測在不同程度腎病中的應用價值［J］.現代檢驗醫學雜志，2008，（11）6：70.

［8］蔡剛強，焦連亭 .早期腎損傷標志物檢測及應用［J］.檢驗醫學與臨床，2005，2（3）：124.

［9］高宗玲.高血壓患者γ2谷氨酰基轉移酶和尿微量白蛋白檢測的臨床意義［J］.檢驗醫學，2004，19（2）：145.