整合素連接激酶（ILK）在早期肝病、肝硬化及肝細胞癌組織中表達及臨床意義

河北省滄州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院（000）李雙標(biāo) 李勝水 許華

河北省滄州市人民醫(yī)院（061001）李秀清3

河北省滄州市青縣人民醫(yī)院（062650）李麗4 李翠萍5

原發(fā)性肝癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，其病理類型90%以上是肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）[1]。國內(nèi)外研究表明，其發(fā)生與肝病、肝硬化有著密切的因果關(guān)系。近年來，ILK在惡性腫瘤發(fā)展中的作用日益受到人們關(guān)注，ILK是整合素和生長因子受體信號傳導(dǎo)途徑中的一個重要效應(yīng)物，調(diào)節(jié)細胞的粘著、生存、分化和凋亡活動[2][3][4]。本研究的目的是檢測ILK在肝細胞癌變中的作用，并探討其與臨床病理特征之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料 選擇我院病理科收檢的外科手術(shù)標(biāo)本共103例，其中肝細胞癌43例、肝硬化30例、早期肝病30例。肝細胞癌患者年齡33～75歲、平均年齡55.5歲，肝硬化患者平均年齡50歲及早期肝病患者平均年齡42.9歲。

1.2 試劑 ILK為美國Santa Cruz公司產(chǎn)品，含標(biāo)記的抗鼠二抗SP免疫組化染色試劑盒為美國Vector公司產(chǎn)品，購于福建邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.3 方法 采用免疫組化SP法檢測各指標(biāo)表達情況，嚴格按說明書操作。免疫組化染色中以PBS代替一抗作為陰性對照，用已知陽性切片作陽性對照。

1.4 結(jié)果判定 ILK染色陽性細胞為胞漿上表達，染成棕黃色；陽性切片判斷標(biāo)準(zhǔn)有四種：每張切片僅有＜5%細胞（-）；每張切片僅有6～25%細胞明顯（+）；26～60%細胞明顯陽性（++）；＞60%細胞強陽性（+++）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 ILK在肝病、肝硬化和肝細胞癌中的表達 ILK在肝病、肝硬化和肝細胞癌中陽性表達呈棕黃色且主要定位于細胞漿。從肝病、肝硬化到肝細胞癌，ILK陽性表達率呈漸進性增高（見附表1）。肝細胞癌ILK表達率明顯高于輕度、中度、重度肝病、肝硬化，差異具有顯著性（P＜0.05），同時ILK的表達在不同時期肝病中的表達隨著肝病程度的增加而增加，并且呈顯著的正相關(guān)性。

2.2 ILK的表達與肝細胞癌臨床病理特征的關(guān)系 ILK在肝細胞癌中的表達隨著癌細胞的分化程度的降低（惡性程度增高）而表達率增加，隨著腫物的增大而表達率增加（見附表2），有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義。

3 討論

整合素連接激酶（integrin-linked kinase，ILK）是一種新近發(fā)現(xiàn)的絲氨酸/蘇氨酸（Ser/Thr）蛋白激酶。它能通過與整合素β1和β3亞單位的結(jié)合介導(dǎo)細胞與細胞外基質(zhì)的連接。目前研究證據(jù)顯示，ILK的過度表達與多種惡性腫瘤密切相關(guān)。如ILK表達量高低與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展呈正比，而與5年生存率成反比，這一結(jié)果提示ILK表達激增可作為某些前列腺腫瘤的復(fù)發(fā)指標(biāo)[5]。另有研究表明，在胃癌細胞株和胃癌組織中ILK和ILK mRNA的表達與惡性程度、侵襲性和淋巴轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)[6]，且在黑色素瘤、惡性膠質(zhì)瘤、卵巢癌的研究中也得到證實[7][8][9]。研究表明，許多腫瘤病人在其腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移過程中均有ILK的過度表達和基因擴增，并可作為癌前病變、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及評估預(yù)后的重要標(biāo)志物。

本實驗通過對103例肝病、肝硬化和肝細胞癌中ILK的表達進行檢測，探討其在肝細胞癌發(fā)生、發(fā)展中的意義。結(jié)果顯示50例肝病樣本中表達率為54%，+為30%，++為24%，表達程度弱；肝硬化24例表達率83.3%，+為33%，++～+++為50%，表達程度中等；肝細胞癌30例表達率100%，+為20%，++～+++為80%，表達程度強。

附表1 肝細胞不同類型病變組織中的ILK表達情況

附表2 ILK的表達與肝細胞癌臨床病理特征的關(guān)系

根據(jù)附表1及附表2數(shù)據(jù)統(tǒng)計，顯示ILK的表達在不同時期肝病中的表達隨著肝病程度的增加而增加，并且呈顯著的正相關(guān)性。在肝細胞癌中的表達隨著癌細胞的分化程度的降低（惡性程度增高）表達率增加，隨著腫物的增大表達率增加，有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義。這提示ILK作為一項較好的細胞增殖標(biāo)記物，對區(qū)分不同時期肝病與肝硬化病變及肝細胞癌有一定參考價值。

在肝細胞癌中ILK的表達與臨床病理特征關(guān)系方面，在肝細胞癌中的表達隨著癌細胞的分化程度的降低（惡性程度增高）表達率增加，隨著腫物的增大表達率增加，有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義。這些結(jié)果提示ILK的表達與肝細胞癌的生物學(xué)行為及惡性程度有關(guān)，ILK的檢測將有助于臨床評估肝細胞癌患者的預(yù)后。