兩相體系中固定化黏紅酵母CCZU-G5催化合成(R)-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯

汪 云 ， 王利群 ，2，何玉財 ，2，朱 劼 ，卿 青 ，王明慧

（1常州大學制藥與生命科學學院，江蘇 常州 213164；2常州市藥品制造與質量控制工程重點實驗室，江蘇 常州 213164）

（R）-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯[(R)-HPBE]是合成眾多普利類系列血管緊張肽轉化酶抑制劑（ACEI）類抗高血壓和充血性心力衰竭藥的關鍵手性中間體[1]，其制備方法主要有化學法和生物法[2-7]。其中利用生物催化劑直接對前手性酮進行不對稱還原，理論上可將前體100%轉化為目標產物，是目前高效合成(R)-HPBE的最有效方法之一。

目前，已有不少研究者報道了通過篩選微生物菌株不對稱還原 2-氧代-4-苯基丁酸乙酯合成(R)-HPBE，何春茂等[5]篩選出一株對OPBE具有良好還原能力的菌株Bacillus pumilusPhe-C3，在 25 mmol/L的底物濃度下產率達74.5%，e.e.值達97%。Zhang等[2]以Candida kruseiSW2026為催化劑，在底物濃度為12 mmol/L時，獲得的產率和e.e.值分別為 95.1%和 99.7%。由于底物和產物在水中溶解度較低，同時高濃度的底物和產物對細胞具有一定的毒性，因此在水相中微生物對OPBE的催化還原僅能在低濃度下進行，難以達到滿意的催化效果。Shi等[6]用面包酵母為催化劑，研究了在水/苯兩相體系中催化OPBE制備(R)-HPBE，產率和e.e.值分別達到67.1%和96.2%。汪慶等[7]采用固定化細胞催化拆分得到(R)-HPBE，連續轉化 12次后細胞活性未明顯下降。

因此，篩選出具有高立體選擇性還原OPBE微生物菌株及建立合適的生物催化反應體系對于高效合成高光學純(R)-HPBE有著重要的意義。本研究從土壤中篩選出一株對OPBE具有更高催化活性和立體選擇性還原酶微生物菌株，通過將細胞進行固定化并在水/有機溶劑兩相體系中不對稱還原 OPBE合成(R)-HPBE，為生物催化合成(R)-HPBE工業化提供參考。……