雌激素受體與肺耐藥相關(guān)蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義

王素霞 張曉麗 嚴(yán)小桐 周雪芹 趙秀芳

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，轉(zhuǎn)移是其死亡的主要原因。國內(nèi)外的研究表明ER、LRP是較公認(rèn)的估測預(yù)后，指導(dǎo)治療的重要指標(biāo)。目前國內(nèi)外對ER為陽性的患者大多采用內(nèi)分泌的治療方法，效果較為明顯;LRP是化療耐藥蛋白的一種，關(guān)于其在乳腺癌中的表達(dá)程度及與ER的關(guān)系尚不清楚［1］。因此我們采用免疫組化化學(xué)方法研究ER、LRP與乳腺癌臨床病理特征以及兩者表達(dá)與乳腺癌的生物學(xué)行為及預(yù)后的關(guān)系，以討論ER、LRP在預(yù)測乳腺癌的轉(zhuǎn)移潛能及預(yù)后和治療中的生物學(xué)意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2005至2008年河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院62例乳腺癌術(shù)后標(biāo)本，均為女性患者，術(shù)前均未進(jìn)行化療、放療、內(nèi)分泌治療，術(shù)后均有明確的病理診斷，年齡32～76歲，平均年齡48.6歲;浸潤型癌44例，非浸潤型癌18例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者35例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者27例。

1.2 方法 ER、LRP單克隆抗體、SP免疫組化試劑盒、DAB顯色劑均購自武漢博士德生物有限公司。標(biāo)本10%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋切片。主要免疫組化步驟：二甲苯脫蠟、梯度酒精脫水，3%雙氧水滅活內(nèi)源性過氧化酶，PBS緩沖液沖洗，微波抗原修復(fù)，正常山羊血清封閉、一抗4℃過夜，DAB鏡控顯色10～15 min，復(fù)染核，脫水透明，中性樹膠封片。陽性對照采用已知的ER、LRP陽性片，PBS代替一抗為陰性對照。

1.3 結(jié)果判定 陽性物質(zhì)呈棕色或金黃色。ER陽性部位主要集中在細(xì)胞核，LRP陽性部位主要集中在細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。高倍鏡視野下觀察金黃色陽性部位，根據(jù)視野中陽性細(xì)胞占全部細(xì)胞的比例，以10個高倍鏡視野中陽性細(xì)胞＞15%者為陽性病例，小于則為陰性病例。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 14.0統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料采用χ2檢驗，相關(guān)性分析采用四格列聯(lián)表法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

ER、LRP在乳腺癌中的陽性表達(dá)率分別是62.9%、61.3%，ER、LRP在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中陽性表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);浸潤型患者中的ER表達(dá)陽性率高于非浸潤型患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，但LRP則無明顯差異(P＞0.05);乳腺癌患者ER、LRP在不同年齡段，不同部位表達(dá)陽性率接近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。ER和LRP在乳腺癌中表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.31，P ＜ 0.05)。見表1、2。

表1 ER和LRP的表達(dá)與乳腺癌生物學(xué)特性的關(guān)系例(%)

表2 ER和LRP在乳腺癌中表達(dá)的相關(guān)性 例

3 討論

ER是調(diào)節(jié)性器官細(xì)胞生長發(fā)育的雌激素受體，它的靶器官是乳腺，雌激素對正常的乳腺上皮的生長和發(fā)育起著調(diào)控作用。在正常的乳腺上皮細(xì)胞的胞核內(nèi)，均含有此受體，并且乳腺癌細(xì)胞仍保留著對ER的表達(dá)［2］。ER是公認(rèn)的內(nèi)分泌治療的標(biāo)記物，已有的研究資料表明：ER陽性表達(dá)的患者，抑制激素合成，降低雌激素水平，阻斷雌激素與ER的結(jié)合，部分或全部阻斷ER的活性等，可抑制雌激素依賴性乳腺癌的細(xì)胞生長，從而使腫瘤消退，可達(dá)到治療腫瘤的目的［3］。說明ER陽性的乳腺癌對內(nèi)分泌治療較敏感，術(shù)后不易復(fù)發(fā)，其預(yù)后好于ER陰性的患者，因此，在乳腺癌組織中ER的高表達(dá)，被視為乳腺癌患者預(yù)后良好的評價指標(biāo)［4，5］。在本實驗中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者中ER的陽性表達(dá)率明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，這與國內(nèi)有關(guān)文獻(xiàn)報道結(jié)果相符［6］。另外，結(jié)果還表明ER還與病理類型差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，可能與標(biāo)本數(shù)量較少有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。檢測ER表達(dá)程度對判斷預(yù)后，指導(dǎo)內(nèi)分泌治療具有一定的指導(dǎo)意義。

LRP是從非小細(xì)胞肺癌SW-1573/2R120耐藥細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)的一種耐藥相關(guān)蛋白，是人的穹窿體蛋白。其LRP基因定位在染色體16p13.1～11.2間，定位在核孔復(fù)合物上，LRP作為該復(fù)合物的轉(zhuǎn)運單位基本控制著多種底物的雙向核質(zhì)轉(zhuǎn)運，編碼一相對分子質(zhì)量110 000的蛋白［7］。穹隆體蛋白具有兩種功能：能封閉核孔阻止抗癌藥物進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，并將進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的抗癌藥運入胞質(zhì)囊泡，進(jìn)而將藥排出細(xì)胞，造成細(xì)胞內(nèi)藥物濃度下降，從而使細(xì)胞發(fā)生耐藥［8，9］，影響預(yù)后效果。在本實驗結(jié)果中，LRP在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性表達(dá)率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P＜0.05)，預(yù)后較差。當(dāng)然腫瘤發(fā)生要經(jīng)歷多基因、多階段作用，腫瘤耐藥亦是多因素參與的過程。單純以某一耐藥基因為靶探討其臨床意義，勢必以偏概全［10］，因而結(jié)合多種耐藥基因并參照患者耐藥基因具體表達(dá)情況，可能會更全面、準(zhǔn)確的選擇敏感藥物。

本實驗對62例乳腺癌病例進(jìn)行了ER、LRP的聯(lián)合檢測，分析兩種基因相互間的表達(dá)情況及其與年齡、病理類型、部位及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。結(jié)果表明，ER、LRP的陽性表達(dá)率分別為62.9%、61.3%，ER、LRP的表達(dá)均與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05)。對于其治療，ER陽性表達(dá)的患者可以用他莫西芬;而LRP的功能抑制則可以應(yīng)用維拉帕米、吡啶類化合物PAK-104P以及一些中藥，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)部分腫瘤細(xì)胞多藥耐藥，提高臨床上化療治愈率［11］。國內(nèi)外有關(guān)腫瘤耐藥基因LRP和雌激素受體ER在乳腺癌中的表達(dá)情況及其臨床意義的研究較少，有待進(jìn)一步研究。

1 林方才，李秋陽，孫欣，等.肺耐藥蛋白在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及與EGFR、HER-2的相關(guān)性.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2009，3：282-284.

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