MMP-9在胃腺癌中的表達意義

張穎 張古林 胡建功

胃癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，位居癌癥死因的第二位［1］。胃癌的發生涉及腫瘤細胞與宿主之間復雜的相互作用，多個基因及其產物參與了過程的調控。基質金屬蛋白酶(matrix m etalloproteinases，MMPs)是一類結構中含有Zn2+的肽鏈內切酶家族，是腫瘤細胞突破基底膜屏障的主要執行者。其中MMP-9為明膠酶，可選擇性降解ECM和基底膜的主要成分O型膠原和明膠，為腫瘤細胞浸潤和轉移創造必需條件，并同時促進腫瘤中新生血管的形成［2］。本研究通過檢測胃癌組織中MMP-9蛋白的表達及其與胃癌臨床病理學特征之間的相關性，旨在探討其在胃癌發生發展中的作用，為胃癌預后的判斷及臨床治療提供一定的理論參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取手術切除標本60例(胃癌組)及其癌旁組織(距離癌組織5 cm處)20例(癌旁組)和10例胃鏡下取的正常黏膜(對照組)。胃癌組中男33例，女27例;＜50歲18例，≥50歲42例;中分化16例，低分化44例;浸潤黏膜下層6例，肌層11例，漿膜層33例;淋巴結轉移42例，無轉移18例。所有病例均經病理診斷證實，資料完整，且均未做過放化療。

1.2 檢測方法 兔抗人MMP-9單克隆抗體，稀釋濃度為1∶50，即用型免疫組化試劑盒，均購自福州邁新生物技術有限公司。所有標本均經10%中性甲醛溶液固定。采用免疫組化S-P法，DAB顯色，具體操作按說明書進行。以PBS代替一抗作為陰性對照，以已知喉癌陽性切片作為陽性對照。

1.3 結果判定 以特定著色部位出現棕黃色顆粒視為陽性著色，MMP-9染色陽性物質位于細胞質。以表達陽性率的形式表示染色陽性率。選取細胞分布均勻的視野，計數每個視野中陽性腫瘤細胞數與細胞總數，每例計數10個視野，計算其中平均陽性細胞數，以百分數表示。即表達陽性率=(陽性細胞數/瘤細胞總數)×100%。

1.4 統計學分析應用SPSS11.0統計軟件，計量資料以±s表示，采用方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MMP-9在胃癌中的表達 MMP-9的表達陽性率在胃腺癌組顯著高于對照組及癌旁組(P＜0.01)，在癌旁組中顯著高于對照組(P＜0.05)。見表1。

表1 CD147、MMP-9在胃癌中的表達率%，±s

表1 CD147、MMP-9在胃癌中的表達率%，±s

注：與對照組比較，*P＜0.05;與癌旁組織比較，#P＜0.05

癌旁組(n=20)胃腺癌組(n=60) 72.6±8.1*#

2.2 MMP-9表達與胃癌臨床病理特征的關系 MMP-9表達陽性率低分化癌組顯著高于中分化癌組(P＜0.05)，浸潤肌層及浸潤漿膜層組顯著高于浸潤黏膜下層組(P＜0.05)，浸潤肌層及浸潤漿膜層組差異無統計學習意義(P＞0.05);在淋巴結轉移組顯著高于無淋巴結轉移組(P＜0.05)。MMP-9的表達陽性率與患者性別、年齡、腫瘤體積等無關(P＞0.05)。見表2。

3 討論

MMP-9可由腫瘤細胞及間質細胞以酶原的形式分泌，被激活后形成Ⅳ型膠原酶，降解、破壞靠近腫瘤表面的膠原和明膠，導致腫瘤細胞沿著破損的基底膜向周圍組織浸潤轉移［2］。腫瘤細胞對細胞外基質成分及基底膜的降解是腫瘤浸潤轉移的關鍵步驟，MMP-9能降解包括Ⅳ型膠原在內的多種基質成分。

研究顯示，MMP-9在多種腫瘤中表達增強，并與腫瘤的浸潤轉移及患者的預后有關。茍小霞等［3］檢測發現，MMP-9在喉鱗癌的陽性表達率明顯高于喉炎組，與喉癌臨床分期和淋巴結轉移密切相關。MMP-9表達陰性組5年生存率明顯高于MMP-9表達陽性組。提示其表達增強與喉癌侵襲、轉移有關，MMP-9是喉癌預后的危險因子。Tamamura等［4］發現，MMP-9在正常及增生口腔黏膜缺乏表達，原位癌呈弱表達，浸潤癌表達陽性率明顯增高，差異有顯著性。提示MMP-9與口腔鱗癌的發生及演進有關。Yang等［5］檢測發現，MMP-9在胃腺癌中表達陽性率明顯高于正常黏膜中，并與腫瘤體積、組織學分級、浸潤深度、淋巴結轉移、病理分期有關，與患者性別、年齡無關。

本研究結果顯示，MMP-9表達陽性率在胃腺癌組織中顯著高于正常胃黏膜上皮及癌旁組織中;MMP-9表達陽性率在低分化癌組織中顯著高于中分化癌組織中，在浸潤肌層及浸潤漿膜層組織中顯著高于浸潤黏膜下層組織中，在淋巴結轉移組顯著高于無淋巴結轉移組。MMP-9的表達陽性率與患者性別、年齡、腫瘤體積等無關。本研究與Yang等［5］研究結果一致。提示MMP-9促進了胃癌的侵襲、轉移，與胃癌的發生發展有關。故推測MMP-9可能促進了胃癌的演進與發展。同時也表明，針對MMP-9靶向治療可能對胃癌的臨床治療具有重要意義。

表2 MMP-9表達胃癌臨床病理特征的關系%，±s

表2 MMP-9表達胃癌臨床病理特征的關系%，±s

注：與黏膜下層比較，*P ＜0.05;與肌層比較，#P ＜0.05

≥50(n=42) 72±9＜50(n=18) 75±10 1.000腫瘤直徑(cm)≥5(n=43) 70±10＜5(n=17) 79±9 1.000分化程度中(n=16) 62±10低(n=44) 77±10 0.025浸潤深度黏膜下層(n=6) 55±9肌層(n=11) 71±9* 0.033漿膜層(n=43) 76±7*# *0.019，△1.000淋巴結轉移無(n=18) 62±8有(n=42)77±8 0.022

1 徐飚，王建明.胃癌流行病學研究.中華腫瘤防治雜志，2006，13：1-7.

2 Groblewska M，Siewko M，Mroczko B，etal.The role of matrix metalloproteinases(MMPs)and their inhibitors(TIMPs)in the development of esophageal cancer.Folia Histochem Cytobiol，2012，50：12-19.

3 茍小霞，金鳳，陳海霞，等.喉癌中細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子和基質金屬蛋白酶2、9的表達及其臨床意義.中華醫學雜志，2010，90：1264-1265.

4 Tamamura R，Nagatsuka H，Siar CH，etal.Comparative analysis of basal lamina type IV collagen α chains，matrix metalloproteinases-2 and-9 expressions in oral dysplasia and invasive carcinoma.Acta Histochem，2012，Epub ahead of print.

5 Yang S，Zhao Z，Wu R，Expression and biological relationship of vascular endothelial growth factor-A and matrix metalloproteinase-9 in gastric carcinoma.JInt Med Res，2011，39：2076-2085.