不同劑量右美托咪啶輔助椎管內麻醉對直腸癌根治術患者免疫功能的影響

雅健 趙建輝 彭云水 朱芳華 王春平 牛潤嶺 宋鐵鷹 石戰英

手術創傷可誘發多種應激反應及術后炎性反應，強烈的應激反應可抑制免疫功能，免疫功能低下又可加重炎性反應，過度的炎性反應不利于患者預后，增加感染易感性和殘留腫瘤細胞的生存機率。右美托咪啶應用于椎管內麻醉手術中，具有鎮靜效果好，呼吸循環穩定，不良反應少等優點，并可提高麻醉質量，減少鎮痛藥的需求，已得到臨床麻醉醫師的普遍認可［1，2］。然而右美托咪啶對直腸癌根治術患者免疫系統的影響尚未見報道。本研究擬探討不同劑量右美托咪啶輔助椎管內麻醉對直腸癌根治術患者免疫功能的影響，為臨床合理用藥提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究已獲本院醫學倫理委員會批準，并與患者或其家屬簽署知情同意書。擇期行直腸癌根治術患者60例，年齡45～64歲，性別不限，體重指數18～30 kg/m2，美國麻醉師協會(ASA)分級Ⅰ或Ⅱ級。肝腎功能未見異常。采用隨機數字表法，隨機分為4組，每組15例。對照組(C組)、右美托咪啶 0.3μg·kg-1·h-1組(D1組)、右美托咪啶0.5 μg·kg-1·h-1組(D2組)和右美托咪啶 0.7 μg·kg-1·h-1組(D3組)。4組患者的年齡、體重、性別比、手術時間、出血量差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 4組患者一般資料各指標、手術時間及出血量的比較n=15，±s

表1 4組患者一般資料各指標、手術時間及出血量的比較n=15，±s

D2組 56±7 23±6 160±17 279±37 D3組58±8 24±5 157±35 265±46

1.2 方法 術前常規禁食、禁飲。麻醉前肌內注射阿托品0.5 mg和苯巴比妥那100 mg。入室后監測心電圖(ECG)、血壓(BP)、心率(HR)、血氧飽和度(SpO2)。開放靜脈通路。局麻下行橈動脈穿刺置管監測有創血壓，頸內靜脈穿刺置管監測中心靜脈壓(CVP)。行椎管內麻醉，麻醉平面控制在T6～S5時開始手術，常規面罩吸氧(氧流量3 L/min)。麻醉起效后D1～D3組按照0.5μg/kg劑量給予4μg/ml的右美托咪啶(批號：11110734，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司)靜脈輸注(10 min)后分別改為0.3、0.5、0.7μg/kg維持;C組則相同的方式靜脈輸注等量0.9%氯化鈉溶液。

1.3 觀察指標 分別于麻醉前30 min(T0)、麻醉后1 h(T1)、麻醉后2 h(T2)、術畢(T3)、術后24 h(T4)和48 h(T5)采集外周靜脈血樣2 ml，加入EDTAk2抗凝管中待測，檢測時取100μl抗凝全血，加入 CD3FITC/CD8PE/CD45PerCP/CD4APC或CD3FITC/CD16+56PE/CD45PerCP/CD19APC(碧迪醫療器械有限公司，上海)熒光抗體20μl，混勻后室溫避光放置20 min，再加入1∶10稀釋的FACS溶血素2 ml，混勻后室溫避光放置10 min，離心(1 500 r/min)5 min，去上清液，加入 PBS緩沖液2 ml，離心(1 000 r/min)5 min，去上清液，加500 μl PBS 懸浮。采用BD FACSAria流式細胞儀(BD公司，美國)檢測T淋巴細胞亞群(、、、/比值)以及 NK細胞()、B細胞(CD19+)的百分比。檢測前以熒光微球calibrite 4colour校準儀器光路使其分辨率達到最佳工作狀態，采用cellquest pro軟件獲取與分析數據。建立FSC/SSC，SSC/CD45，SSC/CD3熒光點圖，調節FSC、SSC、FL熒光電壓、FSC閾值，熒光補償使細胞在圖中分布在合適的位置，在SSC/CD45圖中圈出淋巴細胞群為R1，SSC/CD3圖中圈出T淋巴細胞群為R2，建立、、、散點圖并分別設置為顯示R1或R2門內的細胞，獲取細胞總數10 000個，設十字門分析、，，，分子的百分比。

1.4 統計學分析應用SPSS17.0統計軟件，計量資料以±s表示，組內比較采用重復測量設計的方差分析，組間比較采用成組t檢驗。計數資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

表2 4組患者各時點T淋巴細胞亞群、B細胞以及NK細胞比較n=15，±s

表2 4組患者各時點T淋巴細胞亞群、B細胞以及NK細胞比較n=15，±s

注：與T0比較，*P ＜0.05;與D1組比較，#P ＜0.05;與D2組比較，△P ＜0.05

D3組 12±4 6±47±38±47±47±5

3 討論

直腸癌根治手術時間長、損傷范圍大，術中存在輸血、低體溫、高血糖等因素，這些應激因素可直接作用于免疫系統或激活交感-腎上腺髓質系統，使T細胞以及NK細胞的數量或活性降低，從而造成免疫抑制［3］。某些麻醉藥物也可影響免疫活性細胞的功能以及炎性介質的基因表達和分泌，尤其對腫瘤患者，麻醉藥抑制NK細胞及淋巴細胞功能可能加速殘余腫瘤細胞的轉移［4］，因而長時間的麻醉就可能對腸道腫瘤患者的免疫功能造成更不利的影響。本研究結果顯示，與T0比較，4組患者在T1～4的、、/比值以及的百分比均下降(P＜0.05)，D1～D3組患者在T5的、、/比值以及的百分比下降(P＜0.05)，說明右美托咪啶和直腸癌根治術手術創傷對患者都存在免疫抑制作用。

有研究表明，右美托咪啶可降低炎性細胞的反應性，抑制促炎因子的釋放［5，6］。其可能機制為：右美托咪啶可抑制環氧合酶-2、誘導型一氧化氮合酶、TNF-α、IL-6及凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3等的表達［5，7-9］。本研究結果顯示，隨右美托咪啶劑量的上升 T淋巴細胞亞群(、/比值)、NK細胞()及B淋巴細胞()的百分比在一定范圍內呈下降趨勢，表明右美托咪啶對直腸癌根治術患者免疫功能的抑制作用，在一定范圍內存在劑量依賴性。

綜上所述，右美托咪啶對直腸癌根治術患者的免疫功能有抑制作用，在一定范圍內存在劑量依賴性。

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