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魚腥草種子形態及萌發特性初步研究

2013-10-09 05:11:48楊梅李敏卿光明何剛王興貴楊行軍葛亞風
中藥與臨床 2013年6期
關鍵詞:實驗

楊梅,李敏,卿光明,何剛,王興貴,楊行軍,葛亞風

魚腥草為三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的新鮮全草或干燥地上部分[1], 原名“蕺”,始載于《名醫別錄》,列為下品。別名有岑草、俎菜、臭豬巢、臭腥草、側耳根、豬鼻孔、九節蓮等。分布于陜西、甘肅及長江流域以南各地[2],尤以浙江蓬都、青田、松陽,江西永豐,貴州安順、貴陽,福建沙縣,云南會澤,河南正陽,湖南長沙,廣西柳州,四川西昌、雅安、德陽,重慶,安徽績溪等地最為適宜[3,4]。具有清熱解毒,消癰排膿,利尿通淋的功效,臨床用于肺癰吐膿,痰熱喘咳,熱痢,熱淋,癰腫瘡毒等病癥。

《中華本草》中記載[2]:“魚腥草果實為蒴果,卵圓形,具宿存花柱;種子多數,卵形。魚腥草種子發芽率不高,發芽適宜溫度為17~25℃變溫,發芽率為20%左右。”目前對魚腥草藥材的研究主要集中在化學成分、藥理作用、種質資源及栽培技術等方面,而對魚腥草種子的形態及萌發特性的研究未見報道。

1 材料與儀器

1.1 實驗材料

從四川、貴州、云南等5省收集魚腥草種子樣品共計10份。詳見表1。

表1 魚腥草種子樣品來源

1.2 實驗儀器

微型生化培養箱SPX-250B(上海悅豐儀器表有限公司);解剖顯微鏡(ZEISS Stemi 2000-C);電子分析天平BP121S(北京Sartorius天平有限公司);鑷子;培養皿;濾紙等。

2 實驗方法與結果

2.1 種子形態觀察

采用肉眼和解剖顯微鏡觀察果實、種子外觀形態。魚腥草果實為蒴果,卵圓形,黃綠色,頂端開裂,具宿存花柱;種子多數,卵形,表面具方格網紋,黃棕色至紅棕色,具特異芳香氣。如圖1~4。

圖1 魚腥草果穗

圖2 魚腥草果實

圖3 ~4 魚腥草種子

2.2 種子千粒重測定

選擇千粒法測定。先將樣品充分混合,從中隨機取3份,每份1000粒,稱重,精確到0.00001g,取其平均值,即種子的千粒重[5~6]。采用spss18.0統計分析軟件,對種子千粒重進行單因素兩兩比較[7]。結果見表2。結果:由表2可知,YXC-8的千粒重最重(62.69 mg),YXC-5的千粒重最輕(38.17 mg)。由上可知,魚腥草種子極小,平均千粒重為49.19 mg。

表2 魚腥草種子千粒重比較(n=3)

2.3 種子發芽實驗

2.3.1 光照條件的考察 取YXC-4魚腥草種子樣品,置于鋪有兩層濾紙直徑為9 cm的培養皿中,分別于25 ℃的黑暗與光照條件下進行培養,三次重復,每次重復50粒種子,保持濾紙濕潤,每天觀察并記錄種子萌發情況,待種子萌發達到最高時,以后再無萌發種子出現時的天數為末次計數時間,計算種子發芽率[8]。結果見表3。

表3 光照條件初步考察結果

結果:魚腥草種子開始萌發時所需時間為8天,光照條件對魚腥草種子的萌發具有明顯的影響,黑暗條件下,魚腥草種子不發芽。

2.3.2 種子萌發實驗 將魚腥草種子置于鋪有兩層濾紙直徑為9 cm的培養皿中,在25 ℃恒溫光照條件下培養,3次重復,每次重復50粒。每天觀察并記錄種子萌發情況,待種子萌發達到最高時,以后再無萌發種子出現時的天數為末次計數時間[8],計算種子發芽率。結果見表4。并采用解剖顯微鏡觀察魚腥草種子萌發不同階段的形態(如圖5~12)。

發芽率 = 最終種子發芽數/供試種子數×100%

發芽勢 = 規定時間內種子發芽數/供試種子數×100%(本實驗以第17 d作為計算發芽勢的時間)

發芽指數(GI)= ∑(Gt/Dt )(Gt為在t天的種子發芽數,Dt為相對應的種子發芽天數)[5]

表4 不同產地魚腥草種子的發芽情況

圖5 (1-9天,吸脹階段)

圖6 (8-11天,胚根突破種皮)

圖7 (10-13天,根莖迅速生長)

圖8(12-15天,開始生長須根,胚芽發育成兩片嫩葉)

圖9 (14-18天,胚芽發育成的嫩葉見光變綠)

圖10(17-22天,種皮脫落)

圖11 (21-24天,胚芽逐漸發育成莖和葉) 圖12(24-25天,根系更發達)圖5~12 魚腥草種子不同萌發階段

3 結論與討論

3.1 通過本實驗可知,魚腥草種子為光敏感種子,即光照是該種子發芽的基本條件。這種現象在我國現知的三白草科(Saururaceae)4種植物中均未見報道。但究竟光照時間和光照強度是如何影響魚腥草種子發芽,何種光照條件最適合魚腥草種子萌發尚在研究中。

3.2 千粒重表示的是一千粒種子的重量,它是體現種子成熟度及飽滿程度的一項指標[9],千粒重越重,飽滿種子占供試樣品質量的百分率越高,種子品質越好。魚腥草種子極小,其中YXC-8的千粒重為62.69 mg,YXC-5的千粒重38.17 mg。平均千粒重為49.19 mg。其種子千粒重大小是否與魚腥草的種質資源、生長環境等不同有關,尚需更深入的研究。

3.3 YXC-5樣品的千粒重最小,其外觀形態為卵形,淺黃色,且種子的發芽率為0,可能是因為種子還未成熟。

3.4 實驗過程中觀察到YXC-6樣品霉變較多,對比其他樣品貯藏方式及試驗結果表明,YXC-6樣品在收集之前已被病菌感染,導致實驗過程中霉變嚴重,影響到種子的發芽率。

3.5 一般而言,某些種子隨著貯藏時間的延長,種子的活力降低,種子的發芽勢也降低,但種子的發芽率不一定降低。通過本實驗可知,其中YXC-1、YXC-8、YXC-9的發芽率高,但其發芽勢較低,這可能與種子的貯藏年限有關。貯藏時間與貯藏條件對魚腥草種子活力的影響以及何種條件最適合魚腥草種子的貯藏尚在研究中。

目前,魚腥草的繁殖方式為種莖繁殖,但是魚腥草種子實驗證明其發芽率高,60%的樣品發芽率超過70%,遠遠超出《中華本草》記載魚腥草種子發芽率為20%左右的報道,究竟在生產中能否采用種子繁殖,有待進一步通過出苗率等實驗探索魚腥草種子在自然條件下的發芽能力。通過該研究,不僅可以了解魚腥草的種子特性,還為后續進行魚腥草藥材的種質保存、育種等研究奠定基礎。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典2010年版I部[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010:208.

[2] 國家中醫藥管理局.《中華本草》編委會.中華本草.上海:上海科學技術出版社,1999.

[3] 葉榮華,藍云龍,施林妹,等.魚腥草種源試驗初報[J].浙江林業科技,2008,2(28):34.

[4] 楊健,郭書臺,楊學禮,等.不同產地魚腥草質量評價[J].現代中醫藥,2007, 6(27):62.

[5] 國際種子檢驗協會.顏啟傳,畢辛華(譯).國際種子檢驗規程[S].北京:農業出版社,1985.

[6] 盧魏魏,朱再標,郭巧生,等.白花蛇舌草種子質量分級標準研究[J].中國中藥雜志,2012,37(1):1743.

[7] 郭巧生,張賢秀,王艷茹,等.夏枯草種子品質檢驗及質量標準初步研究[J].中國中藥雜志,2009,34(7):812.

[8] 李衛東.益母草種子發芽和生活力檢驗方法的研究[J].中國現代中藥,2010,11(12):15.

[9] 賀玉林,李先恩,淡紅梅,等.遠志種子質量分級標準研究[J].種子,2007,26(1):106.

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