老年宮頸癌患者Bmi-1蛋白檢測的臨床意義

桂 影 黃志紅 王麗娟 (河南大學護理學院，河南 開封 475004)

宮頸癌是老年女性常見的一種惡性腫瘤，發生率僅次于乳腺癌〔1，2〕。腫瘤的發病機制極其復雜，目前仍不清楚，探明其發生、發展的機制可以為防治提供準確的治療靶點〔3〕。多梳基因-1(Bmi-1)為多梳基因家族成員，研究顯示Bmi-1蛋白在多種實體腫瘤中高表達，參與了腫瘤的發生、發展過程，是一個新近發現的癌基因〔4，5〕，本研究觀察老年宮頸癌患者標本中Bmi-1蛋白的表達及其相關的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床病例資料 2008年9月至2011年12月我院婦產科治療的老年宮頸癌患者宮頸組織標本90例，均經病理診斷證實，年齡60～79〔平均(71.4±5.9)〕歲。按照TNM分期分為Ⅰ(n=18)、Ⅱ(n=26)、Ⅲ(n=24)、Ⅳ(n=22)四期。另取30例我院因子宮良性病變切除的宮頸組織作為正常對照。

1.2 主要試劑 Bmi-1蛋白抗體購自美國Cell Signalling公司，即用型SP免疫組化超敏試劑盒及DAB顯色試劑盒購自深圳達科為生物科技有限公司。

1.3 Bmi-1蛋白的免疫組化染色 石蠟切片常規脫蠟，3%過氧化氫甲醇溶液室溫浸泡切片10～15 min，高壓修復抗原，1%小牛蛋白室溫孵育切片10～15 min封閉非特異性結合，1∶100稀釋Bmi-1蛋白抗體，4℃濕盒孵育過夜，二抗室溫孵育30 min，DAB試劑盒顯色，常規蘇木精復染，封片，鏡下觀察。染色陽性判斷參照孟秀香等〔6〕的方法，簡述如下:陽性細胞于細胞核呈黃色或棕黃色，高倍鏡下隨機選擇5個視野，每個視野計數100個細胞，陽性細胞≥10%為陽性表達，＜10%則判定為陰性表達。

1.4 統計學處理 采用SPSS16.0統計軟件進行χ2檢驗。

2 結果

2.1 Bmi-1蛋白在宮頸癌組織中的表達 Bmi-1蛋白陽性染色主要定位于細胞核，宮頸癌及正常組織中均可檢測到Bmi-1蛋白的表達，Bmi-1蛋白在宮頸癌組織中的陽性率〔62例(68.9%)〕，明顯高于正常對照組〔7例(23.3%)〕(P＜0.01)。

2.2 宮頸癌組織中Bmi-1蛋白表達與臨床病理指標的關系Bmi-1蛋白的表達與患者的年齡無相關性(P＞0.05)，而與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移和臨床TNM分期之間存在顯著相關性(P＜0.05)。見表1。

表1 宮頸癌患者不同臨床病理指標中Bmi-1蛋白率的比較〔n(%)〕

3 討論

研究宮頸癌的發病機制，明確相關致病基因，有利于宮頸癌的早期診斷和預后判斷〔7〕。腫瘤的發生、發展是一個逐步的多階段的過程，與癌基因的激活與抑癌基因的失活密切相關，Bmi-1基因是幾年來在協同c-myc原癌基因轉化細胞導致腫瘤形成過程中發現的一個新的癌基因，進一步的研究顯示其與人類的多種腫瘤密切相關，例如胃癌、肺癌、乳腺癌等，并且在一些腫瘤中可以預示患者的預后〔8〕，本研究提示Bmi-1蛋白可能參與宮頸癌的致病過程。Bmi-1蛋白調控細胞增殖的機制主要是下調抑癌基因p16和p14，使細胞G1-S期檢測點的功能喪失，從而導致細胞惡性克隆性增生。張愛榮等〔9〕在胃癌中的研究顯示Bmi-1蛋白參與了胃癌的發生、發展過程，并且在胃癌的浸潤、轉移及預后等方面發揮著重要的影響。本研究提示Bmi-1蛋白在宮頸癌的惡性程度判定上是一個敏感指標，且可以作為評估患者預后的一個檢測指標。Zhang等〔10〕使用基因檢測Bmi-1 mRNA在宮頸癌中的表達變化，也發現了Bmi-1對宮頸癌的診斷和預后具有一定的參考價值，具體Bmi-1蛋白在宮頸癌中表達上調的機制以及其所影響的下游靶基因都還有待進一步的研究。

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8 Zhang X，Wang CX，Zhu CB，et al.Overexpression of Bmi-1 in uterine cervical cancer:correlation with clinicopathology and prognosis〔J〕.Int J Gynecol Cancer，2010;20(9):1597-603.

9 張愛榮，梁麗梅，許 穎，等.Bmi-1蛋白在胃癌組織中的表達及其與胃癌患者術后生存的相關性〔J〕.中國老年學雜志，2011;31(18):3612-3.

10 Zhang X，Wang C，Wang L，et al.Detection of circulating Bmi-1 mRNA in plasma and its potential diagnostic and prognostic value for uterine cervical cancer〔J〕.Int J Cancer，2012;131(1):165-72.