非酒精性脂肪性肝炎患者血清L－FABP和TNF－α水平測定及其意義

唐 彬，姚樹坤

（北京協和醫學院研究生院／衛生部中日友好醫院，北京100730）

非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）為非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）較嚴重的病理類型，目前理論認為“二次打擊”學說是其重要發病機制之一［1－2］。“二次打擊”主要是多種原因引起的氧化應激或脂質過氧化損傷［3］。腫瘤壞死因子－α（tumor necrosis factor－alpha，TNF－α）是導致胰島素抵抗（IR）的主要炎癥因子之一［4］，肝型脂肪酸結合蛋白（liver type fatty acid binding protein，L－FABP）是一種脂肪酸轉運蛋白，其作為有效的內源性抗氧化物，有減輕氧化應激損傷的功能［5］，本研究通過檢測NASH患者血清中L－FABP、TNF－α的水平，探討二者在NASH發生發展中的相關性及意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2012年6月來本院門診就診的NASH患者50例（NASH組），其中男40例，女10例；年齡23～66歲，平均（35.20±11.17）歲。入選標準：根據中華醫學會肝病學分會2010年《非酒精性脂肪性肝病診療指南》臨床診斷標準，收集肝功能異常，其中丙氨酸氨基轉移酶（ALT）為40～200IU／L；B超檢查符合彌漫性脂肪肝的診斷標準，并排除酒精性肝病、病毒性肝炎、自身免疫性肝病等。選擇本院同期健康體檢者32例為對照組，男23例，女9例，年齡23～60歲，平均（37.19±10.38）歲。

1.2 方法 測量所有受試者身高、體質量、腰圍及臀圍，并計算體質量指數（BMI）和腰臀比（WHR），并于晨起空腹采集靜脈血標本，檢測空腹血糖（FPG）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、血尿酸（UA）、高敏C反應蛋白（hs－CRP）水平，并采用酶聯免疫吸附測定（ELISA）法檢測血清中L－FABP和TNF－α水平，ELISA檢測試劑盒購自美國Rapidbio（RB）公司，實驗操作按照試劑盒說明書進行。

1.3 統計學處理 所有數據采用SPSS17.0統計軟件進行分析，所有資料進行正態性檢驗，計量資料用±s表示，組間比較采用t檢驗；雙變量相關性采用Spearman相關分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組間各臨床及生化指標的對比分析 NASH組50例的患者中TC升高者23例（46.00%），LDL－C升高者29例（58.00%），TG升高者31例（62.00%），HDL－C降低者26例（52.00%），UA升高者30例你（60.00%），BMI升高者38例（76.00%）。NASH 組患者中 ALT、AST、TC、LDL－C、TG、BMI、WHR、TNF－α、L－FABP和hs－CRP水平均顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1、2。

表1 兩組受試者TC、LDL－C、TG等指標比較（±s，mmol／L）

表1 兩組受試者TC、LDL－C、TG等指標比較（±s，mmol／L）

＊：P＜0.05，與對照組比較。

組別 n 42.60±84.37 5.76±0.32 1.68±0.42 NASH組 50 5.04±0.91＊ 3.25±0.83＊ 3.01±1.58＊ 0.99±0.22 432.70±74.14＊ 5.91±1.24 3.96±0.98 TC LDL－C TG HDL－C UA FBG hs－CRP對照組 32 3.26±0.57 1.02±0.37 1.07±0.55 1.41±0.41 3＊

表2 兩組受試者BMI、ALT、AST等指標比較（±s）

表2 兩組受試者BMI、ALT、AST等指標比較（±s）

＊：P＜0.05，與對照組比較。

組別 n BMI（kg／m2） ALT（IU／L） AST（IU／L） WHR L－FABP（ng／mL） TNF－α（pg／mL）06 46.48±11.78 2.48±1.19 NASH組 50 30.43±3.92＊ 80.25±37.50＊ 42.93±17.52＊ 0.92±0.07＊ 63.49±13.44＊ 4.34±1.06對照組 32 24.26±2.71 17.56±4.61 18.39±3.50 0.85±0.＊

表3 NASH組血清L－FABP與TNF－α及其各臨床指標的相關性分析

表4 TNF－α與各臨床指標的相關性分析

2.2 NASH組血清L－FABP水平與各指標的相關性分析NASH組血清 L－FABP水平與 TNF－α、CHO、LDL－C、ALT、UA、hs－CRP顯著正相關 （P＜0.05），而與 TG、WHR、BMI、FBG、TG無顯著相關性（P＞0.05），見表3。血清TNF－α水平與 ALT、UA、hs－CRP顯著正相關 （P＜0.05），而與 TC、LDLC、TG、FBG無顯著相關性（P＞0.05），見表4。

3 討 論

NAFLD是一種與IR和遺傳易感密切相關的代謝應激性肝臟損傷，疾病譜包括非酒精性單純性脂肪肝（nonalcoholic simple fatty liver，NAFL）、NASH及其相關肝硬化和肝細胞癌。NAFLD是21世紀全球重要的公共健康問題之一，亦是中國愈來愈重視的慢性肝病問題［1－2］，NAFLD病因機制復雜，“多重打擊”學說認為：“初次打擊”主要是IR和脂質代謝紊亂所導致的肝細胞內脂質沉積；“二次打擊”主要是多種原因引起的氧化應激或脂質過氧化損傷［3］。

NAFLD被認為是與IR和氧化應激相關的代謝綜合征，NASH作為NAFLD較嚴重的病理類型，可進展為肝纖維化，肝硬化，甚至肝癌。目前理論認為，氧化應激可能是NASH發生和進展的重要“二次打擊”因素。肝臟是人體新陳代謝的總樞紐，是氧化應激損傷的核心靶器官［6］。NASH患者的肝細胞以線粒體異常為特征，線粒體損傷是肝細胞損傷的重要原因之一，而線粒體中過量游離脂肪酸（FFA）的氧化是導致線粒體損傷的重要原因［7］。

脂肪酸結合蛋白（fatty acid binding protein，FABP）是一組運輸長鏈脂肪酸的低分子量胞漿蛋白超家族，L－FABP是FABP家族成員之一，基本功能包括參與小腸脂肪酸的吸收及轉運、細胞內長鏈脂肪酸的轉運及細胞器內再分布利用、膽汁酸、膽固醇等物質的代謝等。近年發現L－FABP可以結合長鏈脂肪酸的氧化產物，成為有效的內源性的抗氧化物［8－9］。本研究發 現，NASH 患 者 血 清 L－FABP 水 平 與 CHO、hs－CRP、TNF－α、ALT等呈顯著正相關，提示其與脂代謝、肝臟炎癥反應和肝功能損傷的發生發展有著密切聯系。TNF－α是由單核－巨噬細胞分泌的一種關鍵致炎因子，與NASH的發生發展密切相關。TNF－α通過活化神經鞘磷脂酸，抑制線粒體呼吸鏈電子傳遞，使線粒體活性氧（ROS）升高，產生脂質過氧化，導致肝細胞壞死。另一方面，過量的ROS又可促使TNF－α合成增加，引起 NASH致病過程中的“二次打擊”［10－11］。本研究顯示，NASH組TNF－α的水平顯著高于正常組，提示肝臟的氧化應激損傷導致TNF－α的生成增加。

本研究結果還顯示，L－FABP與TNF－α水平呈顯著正相關。已有研究證明，過量的ROS容易導致氧化應激狀態，細胞微環境氧自由基濃度可以升高L－FABP水平，影響細胞內LFABP蛋白水平。肝臟含有豐富的線粒體，是ROS攻擊的主要器官，L－FABP與TNF－α水平的正相關的結果提示，TNF－α可能通過提高線粒體內ROS而上調L－FABP表達水平。LFABP可否成為NAFLD發生、發展的預測因子尚有待于深入研究。可為NAFLD的診斷和治療提供新的研究方向。

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