血清HBsAg水平評價替比夫定治療慢性HBV中的研究

李杰花 顧浩

乙型肝炎血清標志物是乙型肝炎患者的臨床診斷標準，其檢測方法是臨床技術人員一直以來高度重視的方面[1]。慢性乙型肝炎臨床療效的判斷通常靠監測患者血清中HBeAg和HBV DNA水平，而某些HBV攜帶者因前核心和核心啟動子區域的變異可能存在HBeAg負性波動，很難確定HBeAg陰性患者與HBV DNA水平的相關性[2]。本研究采用化學發光微粒子免疫分析法(CMIA)定量檢測慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平，從而判斷替比夫定的臨床療效。

1 資料與方法

1.1 病例選擇 入組標準:(1)符合中華醫學會傳染病與寄生蟲病學會制定的慢性乙型肝炎的診斷標準[3]；(2)年齡 18～69 歲，血清HBeAg陽性；(3)血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)水平持續升高，且≥2 倍參考值上限；(4)HBeAg陽性患者HBV DNA水平＞2.0×103copy/mL，陰性患者HBV DNA水平＞1.0×103copy/mL；(5)入組前患者未接受過干擾素、核苷類似物抗病毒治療；(6)近12個月內未接受過免疫調節藥物的治療；(7)患者自愿加入本研究，簽訂知情同意書。排除標準：(1)不符合入組標準；(2)合并肝硬化、代謝性肝病或自身免疫性肝炎等；(3)同時感染有其他類型的病毒性肝炎，如甲型、丙型或丁型；(4)處于妊娠或哺乳期婦女；(5)預計生存期不能完成研究者。

1.2 研究對象 研究對象來源于 2009年12月～2012年1月期間在我院接受替比夫定治療的患者80例，男46例。女34例；年齡18～69歲，平均年齡(4.7±8)歲；其中HBeAg陽性患者 48 例、HBeAg陰性患者32例。

1.3 方法 患者均口服替比夫定 600 mg，1 次/d，療程 1 年。治療前和治療后每 3 個月收集 1 次患者血清標本，測定ALT、HBsAg和HBV DNA水平。血清ALT檢測采用GS400 全自動生化分析儀和相應的配套試劑;血清HBsAg和HBeAg測定采用CMIA法試劑盒和KS7041502 型化學發光免疫分析儀，操作步驟嚴格按照說明書進行;HBV DNA測定采用HBV DNA試劑盒和 7300 型實時熒光定量PCR儀。

1.4 統計學方法 數據采用SPSS13.0 進行統計分析，計量資料采用均數±標準差(±s)表示，比較采用t檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 治療前后患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平比較經過 1 年的治療，患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平較治療前下降，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 治療前后患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平比較（±s）

表1 治療前后患者HBsAg、HBV DNA和ALT水平比較（±s）

注：與治療前比較，aP<0.05

時間 HBsAg(IU/mL) HBV DNA（103 copy/mL） ALT(U/L)治療前 1830±329 6.1±1.2 100±12治療后 1026±274 a 3.2±1.0 a 32±11 a

2.2 治療前后患者HBsAg、ALT水平與HBV DNA的相關性 治療前后患者HBsAg水平與HBV DNA均存在相關性(P<0.05)，而ALT水平與HBV DNA無關聯(P>0.05)，見表2。

表2 治療前后患者HBsAg、ALT水平與HBV DNA的相關性（±s）

表2 治療前后患者HBsAg、ALT水平與HBV DNA的相關性（±s）

組別 時間 HBsAg(IU/mL)ALT(U/L)HBeAg陰性組HBV DNA（103copy/mL）治療前 1386±356 5.8±1.1 98±12治療后 1106±290 3.2±1.0 44±10 HbeAg陽性組治療前 2413±322 6.2±1.3 104±13治療后 1000±263 3.0±1.1 29±10

2.3 HBsAg、HBV DNA和ALT與耐藥時間的關系80例患者在治療過程中發現 9 例對替比夫定耐藥，在檢測過程中，HBsAg與HBV DNA水平在治療后3個月開始發生反彈，而血清ALT水平在治療后6個月開始反彈，明顯滯后。

3 討論

慢性乙型肝炎治療終點:HBeAg陽性患者，血清HBsAg清除(理想終點)或血清學HBeAg轉換(滿意終點)，HBV DNA檢測不到；HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者，HBsAg血清清除，HBV DNA檢測不到[4]。替比夫定是天然胸腺嘧啶脫氧核苷的自然L對映體，是人工合成的胸腺嘧啶脫氧核苷類抗HBV藥物。替比夫定在細胞激酶的作用下被磷酸化，變為有活性的代謝產物，并與HBV天然底物胸腺嘧啶的 5’-腺苷競爭，從而抑制HBV DNA多聚酶的活性;然后整合到HBV DNA中，終止HBV DNA鏈的延長，抑制其復制，起到抗病毒的作用。我們采用替比夫定治療 80 例慢性乙型肝炎患者，其中HBeAg陽性患者48例、HBeAg陰性患者32例，1年后患者血清HBsAg、HBV DNA和ALT水平較治療前比較，均顯著下降。結果表明:替比夫定治療慢性乙型肝炎，具有較好的病毒學應答和生化應答，減少病毒對肝臟的攻擊，改善肝功能和延緩病情進展。

定量檢測慢性乙型肝炎患者血清中HBV DNA水平，是判斷臨床治療效果和修正抗病毒治療方案的重要臨床指標，雖然實時熒光定量PCR測定HBV DNA水平具靈敏度高和重現性好等特點，但是一般醫院實驗條件有限，難以開展。有文獻報道[5]，HBeAg定量與HBV DNA存在相關性，與HBV DNA復制的關系緊密，但是很難適用于HBeAg陰性患者。我們通過測定并分析患者血清HBsAg、HBV DNA和ALT水平，結果發現治療前后患者HBsAg水平與HBV DNA均存在正相關性，而ALT水平與HBV DNA無關聯。在治療過程中9例患者對替比夫定耐藥，HBsAg與HBV DNA水平在治療后 3 個月開始發生反彈，而血清ALT水平在治療后6個月開始反彈。結果提示:患者血清HBsAg水平可反映HBV DNA的復制情況，具有較高的敏感性，可以用于指導臨床抗病毒治療的效果評價。

綜上所述，定量HBsAg水平可反映HBV DNA復制情況，為慢性乙型肝炎臨床治療提供客觀依據;CMIA測定HBsAg具有簡單、方便、快捷、高效、準確和自動化程度高等優勢，值得臨床推廣應用。

[1]盧桂香.不同方法學檢測乙型肝炎血清標志物結果評價[J].當代醫學，2012，18(8)：152-153.

[2]毛雄英，王衛華，沈廣宇，等.引物延伸/變性高效液相色譜檢測HBV拉米夫定耐藥突變[J].臨床檢驗雜志，2010，28(3)：11-13.

[3]中華醫學會肝病學分會、中華醫學會感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指南[J].中華內科雜志，2006，45(2)：162-170.

[4]劉巖紅，錢方興.HBsAg和HBeAg定量檢測對乙型肝炎抗病毒治療的評估[J].肝臟，2011，16(4)：326-327.

[5]王貴強.應重視HBeAg陰性慢性乙型肝炎的診斷和治療[J].中華內科雜志，2005，44(9)：643.