腸桿菌科細菌ESBLs和AmpC酶檢測及耐藥性分析

張俊峰 許現偉

近幾年在臨床上抗菌藥物得到了廣泛的應用，然而隨著應用率的增加，使得細菌耐藥性也逐漸增強，給臨床治療和醫院感染的控制菌構成了嚴重威脅。目前在臨床上腸桿菌屬于常見耐藥菌，為抗感染治療中的重點［1］。本次研究中出于對腸桿菌科細菌ESBLs和AmpC酶檢測結果與耐藥性情況進行分析探討的目的，對我院收集的236株菌株展開了ESBLs和AmpC酶檢測實驗和藥敏實驗，現匯報實驗結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 資料來源于我院患者標本培養的腸桿菌，抽取236株作為研究對象，包括大腸埃希菌85株，克雷伯菌67株，沙雷菌屬26株，檸檬酸桿屬18株，耶爾森菌屬14株，變形菌屬9株，其他17株。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 對以上統計菌株分別采取用雙紙片氯唑西林增效試驗和雙紙片確診試驗對AmpC酶與ESBLs表型進行檢測，統計檢出率，而后展開藥敏試驗，對比分析產酶均與非產酶菌的實驗結果。

1.2.2 檢測方法 ESBLs檢測:采取雙紙片確診試驗進行檢測，即紙片擴散法進行表型篩選，經確證實驗進行檢測，在篩選時頭孢他啶抑菌環直徑≤22 mm，頭孢噻肟抑菌環直徑≤27 mm，則表明菌株可能產ESBLs，在確證實驗時，在上述藥物中加入克拉維酸后同沒有加克拉維酸抑菌環進行比較，增加值在5 mm或以上者證實為產ESBLs。

AmpC酶檢測:采取雙紙片氯唑西林增效試驗進行檢測，即紙片擴散法進行表型篩選，而后經改良Hodge試驗進行確證。篩選時紙片擴散法頭孢西丁抑菌圈直徑不超過18 mm者可能產AmpC酶，確證試驗時頭孢西丁抑菌圈變化值在2 mm以上者證實產AmpC酶［2］。

1.2.3 藥敏試驗 藥敏試驗采取紙片擴散法，對臨床常用抗生素的耐藥性進行測定，質控菌為大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.3 統計學方法 研究中所得到的相關數據采用SPSS 14.0統計學數據處理軟件進行處理分析，針對計數資料和組間對比分別進行t檢驗和χ2檢驗，在P＜0.05時，視為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 ESBLs和AmpC酶檢測結果 經統計，本組236株菌株中檢出AmpC酶菌102株，檢出率為43.22%;檢出ESBLs菌120株，檢出率為 50.85%。其中單產 AmpC酶菌 92株(38.98%)，單產 ESBLs菌110株(46.61%)，產 AmpC酶和ESBLs菌 10株(4.24%)，不產 AmpC酶、ESBLs均 24株(10.17%)。

2.2 藥敏試驗 單產AmpC酶菌、單產ESBLs菌以及產AmpC酶+ESBLs菌對氨曲南、氨芐西林、阿米卡星以及頭孢噻肟的耐藥率較非產AmpC酶菌高(P＜0.05)，所有腸桿菌對青霉素均有較強耐藥性(P＞0.05)。詳見表1。

表1 不同菌株藥敏試驗結果比較(例，%)

3 討論

ESBLs為質粒介導的，可以對青霉素類、頭孢菌素類及單環內酰胺類抗生素產生水解作用的一種β-內酰胺酶，其能夠在菌株間轉移以及傳播。AmpC酶則是由腸桿菌、不動桿菌、銅綠假單胞菌等一些革蘭陰性桿菌所產生的一種β-內酰胺酶，且可以對第三代頭孢菌素、單環類以及頭霉素類等β-內酰胺類抗生素產生顯著的耐藥性，其底物譜較ESBLs更寬，并且對酶抑制劑不敏感［3］。臨床研究證實產生酶的菌株一般在病情重、住院時間長以及一些惡性腫瘤患者中比較多見，并且在經常使用免疫抑制劑或者是免疫缺陷者中的檢出率也較高。目前在臨床上腸桿菌為常見的一種耐藥菌，本次研究中出于對其耐藥性原因進行探討的目的，對236株菌株展開了AmpC酶與ESBLs表型檢測，并對比分析了不同菌株的藥敏試驗結果，最終發現，本組AmpC酶檢出率為43.22%，ESBLs檢出率為50.85%，且單產AmpC酶菌、單產ESBLs菌以及產AmpC酶+ESBLs菌對氨曲南、氨芐西林、阿米卡星以及頭孢噻肟的耐藥率較非產AmpC酶菌高。由此可知導致腸桿菌產生耐藥性的主要因素為產AmpC酶與ESBLs，因此在今后的臨床用藥治療過程中，應對其給予關注，合理使用抗生素，以提高治療效果，降低耐藥率。

［1］ 嚴子禾.雙紙片氯唑西林增效試驗檢測高產AmpC酶的大腸埃希菌和克雷伯菌．臨床檢驗雜志，2008，26(06):450．

［2］ 周志慧．兩種檢測陰溝腸桿菌AmpC酶方法的比較．中華檢驗醫學雜志，2012，25(05):88-90．

［3］ 羅蘭．腸桿菌科菌持續產AmpC酶的檢出及耐藥分析．臨床檢驗雜志，2010，22(01):41-42．