實驗用大白鼠蟯蟲感染狀況調查

王 菲，曹淑禎，崔立云，張霄霄，楊毅梅

（大理學院基礎醫學院，云南大理 671000）

實驗動物被譽為“活的試劑”〔1〕，常用于醫學、藥學、生物學、獸醫學等的研究。動物感染寄生蟲后，除了被奪去營養影響生長、發育和繁殖外，還會產生機械損害、毒性損害等，使動物機體的生理、生化及免疫學指標發生變化，再用于精密的現代生命科學研究時，有可能干擾實驗的正常結果，也可能降低實驗的可重復性、準確性及可信度。有些鼠類寄生蟲還可傳染給人〔2〕。這就要求我們對實驗動物質量進行控制，而質控的重點就是對其攜帶的微生物和寄生蟲進行控制〔1〕。

為初步了解某校實驗大鼠寄生蟲感染情況，我們對部分開放系統飼養的大白鼠做了調查。現將結果報道如下：

1 材料和方法

1.1 材料 SD大白鼠，自制顆粒飼料開放飼養于有不銹鋼絲網蓋的塑料盒中，墊料為清潔刨木屑，每天定量添加飼料和清潔飲水，每周更換塑料盒、墊料。

1.2 方法 按國家質量技術監督局檢驗標準〔3〕中“對于100～500只生產繁殖單元大鼠，取樣數量不能少于10只”要求進行取樣。本次共隨機抽取大白鼠69只，其中2月齡大白鼠33只，雄性14只，雌性19只，離乳大白鼠（1月齡）36只，雄性19只，雌性17只。每只大鼠用小動物專用秤稱重（二月齡大白鼠體重48～138 g，平均90.8 g；初離乳大白鼠28～51 g，平均40.9 g）。提起大鼠尾部，收集新鮮糞便1～3顆，分別裝入一次性帶蓋塑料管中，用記號筆在管壁記錄性別、體重等。帶回實驗室采用生理鹽水直接涂片法〔4〕檢查，每份糞便涂兩張涂片，當日檢完。

2 結果

2.1 大白鼠蟯蟲感染狀況 69只大白鼠，檢出蟯蟲鼠17只，陽性率25%。其中雄性31只，陽性10只，陽性率32%；雌性36只，7只檢出幼蟲，陽性率19%。雄性和雌性大白鼠陽性率的差異無統計學意義。見表1。

表1 雌雄大白鼠鼠蟯蟲糞檢情況

2月齡大白鼠33只，8只檢出幼蟲或成蟲，陽性率24%。1月齡大白鼠36只，9只檢出幼蟲，陽性率25%，差異無統計學意義。見表2。

表2 不同月齡大白鼠鼠蟯蟲糞檢情況

2.2 蟲種鑒定 測量蟲卵20個，見圖1，平均大小82.6 μm×31.9 μm，與國家標準〔4〕中鼠管狀線蟲（Syphacia.muris）75 μm×29 μm類似。成蟲長約1.4 mm，寬約126 μm，頸翼膜清晰，食道球呈圓形，陰門位置靠近身體前端，尾部尖細，據文獻描述〔5-6〕，初步判定本次檢到的蟲體為鼠管狀線蟲。另外我們還在部分鼠糞內觀察到了雌性成蟲排卵的整個過程，見圖2，盡管已有文獻做過描述〔7〕，但不如圖片直觀。圖2中可以清晰看到雌蟲陰門突出，鏡下蟲卵隨子宮收縮不斷沖擊陰門并排出。糞便生理鹽水涂片法檢查整個涂片，蟲體有1-6條不等。

圖1 鼠管狀線蟲蟲卵（40×10）

圖2 排卵中的雌性成蟲（10×10）

3 討論和建議

科研常用的實驗動物有大白鼠、小白鼠、地鼠等，根據不同目的，選用適宜的動物。此次調查大白鼠蟯蟲感染率較文獻報道〔8〕低，可能與每周更換墊料和籠具并嚴格消毒以及本次調查蟲種單一有關。鼠蟯蟲分隸2屬（無刺屬Aspiculuris及管狀屬Syphacia）4種（四翼無刺線蟲A.tetraptera、隱藏管狀線蟲S.Obvelata、鼠管狀線蟲S.muris及地鼠管狀線蟲S.mesocriceti）。

Syphacia muris宿主為實驗用大鼠，生長于結腸與盲腸腸道黏膜，一般并不引起臨床癥狀，嚴重感染時可引起下痢、生長遲緩、皮毛粗剛，腸阻塞、腸套疊，使動物品質低落且不適于營養學、免疫學、血液學研究。生活史為直接型，蟲卵直接或間接被動物食入而造成感染，進入鼠體后以其頭部附著于腸粘膜上。10～11 d后，發育成熟的雌蟲與雄蟲交配后爬到肛周皮膚產卵，故在肛周用透明膠紙法能查到蟲卵。蟲卵可在空氣中漂浮，并可在動物房條件下存活數周。蟯蟲的蟲荷數與動物的年齡、性別和免疫狀態有關。對鼠蟯蟲感染的控制，以預防為主，定期進行健康監測，嚴格消毒，保證飼料與墊料的清潔，增加換籠的頻度都可以有效的控制蟯蟲癥的感染。85℃干烤20 min以上或70%酒精全面噴灑才可完全殺滅蟲卵。一般不主張對實驗動物用藥治療。徹底凈化時，可用腸蟲清，治療量為10 mg/只，加250 mL水，3 d用完，2周為1療程，連用3個療程〔9〕。

國家標準規定〔3〕在實驗鼠的等級分類中取消普通級，而分為清潔級、無特定病原體級（SPF）和無菌級。清潔級鼠中必須排除體外寄生蟲、弓形蟲和全部蠕蟲感染，但文獻回顧發現清潔級、SPF級均有不同程度的寄生蟲感染〔10-12〕。因為安全防護不到位，已有實驗動物致人感染的報道〔13-15〕。醫藥院校學生進行動物實驗時，應充分認識到動物安全的重要性。此外，部分文獻用SPF級鼠建立寄生蟲感染動物模型等實驗時〔16-17〕未見有關對實驗用鼠進行體檢的描述。筆者認為，實驗動物的質量不僅要靠動物房工作人員控制，也需要廣大科研人員積極參與，發現問題及時溝通，而且實驗前對動物進行體檢了解其健康狀態對于提高實驗的準確度、嚴謹性、可重復性還是十分有幫助的。

〔1〕李學勇，李根平，賀爭鳴，等.2006—2008年北京地區常用實驗動物微生物和寄生蟲檢測結果分析〔J〕.實驗動物科學，2009，26（5）：35-38.

〔2〕Tanideh N，Sadjjadi SM，Mohammadazadeh T，et al.Helminthic Infections of Laboratory Animals in Animal House of Shiraz University of Medical Sciences and the Potential Risks of Zoonotic Infections for Researchers〔J〕.IRCMJ，2010，12（2）：151-157.

〔3〕GB14922.1-2001，實驗動物寄生蟲學等級及監測方法〔S〕.

〔4〕GB/T18448.1～18448.10-2001，實驗動物寄生蟲學檢測方法〔S〕.

〔5〕National Research council.Infectious Diseases of Mice and Rats〔M〕.Washington,D.C.:National Acadmies Press，1991：156-158.

〔6〕Stahl W.Studies on the life cycle of syphacia muris，the rat pinworm〔J〕.The Keio Journal of Medicine,1963，12：55-60.

〔7〕邱華峰，吳食.鼠管狀線蟲蟲卵孵化過程觀察〔J〕.中國寄生蟲病防治雜志，1990，3（4）：301.

〔8〕劉偉銘，洪花，劉兆銘.嚙齒類實驗動物蟯蟲活蟲體的簡易收集法〔J〕.白求恩醫科大學學報，2000，26（2）：141.

〔9〕陳國懷，寧磊，景志忠，等.蘭州地區實驗動物寄生蟲攜帶情況調查〔J〕.中國獸醫科技，1997，27（12）：26-27.

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〔11〕吳玉娥，張鈺，趙維波，等.廣東省2007-2008年實驗動物寄生蟲檢測結果分析〔A〕.第九屆中南地區實驗動物科技交流會論文匯編〔C〕，2009：159-162.

〔12〕王艷蓉，劉先菊，黃瀾，等.隱匿管狀線蟲的鏡下形態學研究〔J〕.醫學動物防制，2010，26（6）：499-502.

〔13〕中國新聞網.東北農大28名師生因實驗染傳布氏桿菌病〔J〕.中國動物保健，2011（10）：90.

〔14〕尹萍，李志軍.實驗室人員因動物實驗感染流行性出血熱九例〔J〕.中華勞動衛生職業病雜志，2007，25（7）：428-429.

〔15〕魯連城.實驗動物致病性真菌感染引起的人畜共患病〔J〕.中國實驗動物學雜志，2002，7（5）：75.

〔16〕劉和香，張儀，呂山，等.廣州管圓線蟲生活史的實驗室構建與觀察〔J〕.中國病原生物學雜志，2009（11）：836-839.

〔17〕任一鑫，秦元華，戴曉冬，等.不同方法建立卡氏肺孢子蟲大、小鼠動物模型的比較〔J〕.中國病原生物學雜志，2012，7（5）：369-370.