天南星提取物的抗炎作用及機制研究

李 楊，陸 倩，錢金栿*

（1.大理學院，云南大理 671003；2.大理學院藥學與化學學院，云南大理 671000）

天南星為天南星科天南星屬植物，以塊莖入藥，其中云南資源最為豐富。其味苦、辛溫、有毒，具有燥濕化痰、祛風止痛、散結消腫等功效，用于咳嗽，眩暈，驚風等；外用治癰腫，蛇蟲咬傷〔1〕。天南星具有抗腫瘤、抗驚厥、鎮痛、鎮靜、祛痰、抗心律失常、抗氧化、殺滅釘螺、抗菌和抗炎等多種藥理活性〔2-5〕。但目前尚未見報道天南星提取物對急、慢性炎癥的作用研究，本實驗對天南星提取物抗炎作用及機制研究進行初步探討，以期為其臨床應用和新藥開發提供實驗依據。

1 實驗材料

1.1 藥材 實驗用天南星采自云南大理蒼山，經大理學院藥學與化學學院夏從龍副教授鑒定為天南星科天南星屬植物天南星（Arisaemaerubescens（Wall.）Schott）。

1.2 實驗動物 昆明種小白鼠，6～8周齡，體重18～22 g，雌雄各半。由昆明醫科大學實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK（滇）2011-0004。

1.3 實驗儀器及試劑 紫外分光光度儀（TU-1901，北京譜析通用儀器有限責任公司）；旋轉蒸發儀（R-210，瑞士Buchi公司）；電子天平（AL204-1C，梅特勒-托利多儀器有限公司）；低速離心機（上海手術器械廠）；醋酸（上海申博化工有限公司，批號：1103101）；二甲苯（汕頭市達濠精細化學品有限公司，批號：20080919）；阿司匹林腸溶片（南京白敬宇制藥有限責任公司，批號：110904）。

2 實驗方法

2.1 天南星提取物樣品的準備 取天南星植株地下部分塊莖經清洗、去皮、切片、干燥、粉碎，經95%乙醇回流提取，再經70%乙醇回流提取，過濾，減壓濃縮得醇提取物，加水溶解后經乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯提取物。取天南星塊莖粉末經蒸餾水回流提取，過濾，得天南星水提取物。取天南星果實粗粉，經甲醇回流提取6次，過濾后合并濾液，減壓濃縮得甲醇提取物，加水溶解后經石油醚萃取，得到石油醚提取物。將上述提取物分別冷凍干燥后備用〔6〕。

將上述提取物用生理鹽水溶解后，加入0.5%CMC-Na（羧甲基纖維素鈉）后制成口服制劑，加入凡士林后攪拌均勻得外涂制劑（凡士林加熱熔化，放置，冷卻至50℃左右）。

2.2 對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 取小鼠60只，雌雄各半，隨機分為空白對照（生理鹽水）組、陽性對照（阿司匹林）組、果實石油醚提取物組，塊莖醇提取物組、塊莖乙酸乙酯提取物組和水提取物組，每組10只。灌胃給藥，連續3 d，末次給藥1 h后，于每只小鼠左耳雙面均勻涂抹二甲苯0.02 mL，右耳不涂作為對照，30 min后頸椎脫臼處死，用6 mm打孔器分別在雙耳相同位置打下耳片并稱重，以同一小鼠左右兩耳片重量差值為腫脹度，并計算腫脹抑制率〔7-8〕。

腫脹抑制率=〔（空白對照組腫脹度-給藥組腫脹度）/空白對照組腫脹度〕×100%

2.3 對小鼠棉球肉芽腫增生的影響 昆明種小鼠60只，分組同“2.2”項。將10 mg棉球種植于小鼠皮下，自手術后每日足部涂藥1次，連續7 d。末次給藥后24 h后頸椎脫臼處死，剝離棉球肉芽組織，置恒溫70 ℃烘箱烘至恒重，計算肉芽腫重量（mg）〔9-10〕。

肉芽腫重量=肉芽腫干重-棉球重量

2.4 對醋酸致小鼠毛細血管通透性的影響 取小鼠60只，分組同“2.2”項。灌胃給藥，1 次/d，連續7 d，末次給藥1 h后，尾靜脈注射0.5%伊文思藍生理鹽水溶液0.1 mL，并立即腹腔注射0.6%醋酸0.1 mL/10 g，20 min后頸錐脫臼處死，5 mL生理鹽水沖洗，洗液以3000 r/min離心15 min，取上清液于590 nm處測吸光度〔11〕。

3 實驗結果

3.1 對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 天南星塊

莖醇提取物、乙酸乙酯提取物、天南星果實石油醚提取物與生理鹽水組相比，小鼠耳廓腫脹度明顯下降（P＜0.01）。與阿司匹林組比較，天南星乙酸乙酯提取物差異無統計學意義，提示其能顯著抑制二甲苯致小鼠耳腫脹。見表1。

表1 天南星提取物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（±s，n=10）

表1 天南星提取物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（±s，n=10）

注：與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與阿司匹林組比較﹟P＜0.05，﹟﹟P＜0.01。

組別 劑量/(g/kg) 腫脹度/mg 腫脹抑制率/%生理鹽水 - 1.92±0.69 -阿司匹林 0.30.86±0.53** 55天南星塊莖醇提取物 201.30±0.43**﹟ 32天南星塊莖乙酸乙酯提取物 200.99±0.35** 48天南星塊莖水提取物 201.54±0.47*﹟﹟ 18天南星果實石油醚提取物 201.24±0.62**﹟ 35

3.2 對小鼠棉球肉芽腫增生的影響 與生理鹽水組比較，天南星塊莖醇提取物、乙酸乙酯提取物、水提取物、天南星果實石油醚提取物肉芽腫質量顯著下降（P＜0.01），說明上述幾組對小鼠棉球肉芽腫有明顯的抑制作用。見表2。

3.3 對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響 與生理鹽水組比較，天南星塊莖乙酸乙酯提取物、天南星果實石油醚提取物（P＜0.01）以及天南星塊莖醇提取物（P＜0.05）伊文思藍滲出量顯著下降，提示能抑制冰醋酸所致的小鼠毛細血管通透性。見表3。

表2 天南星提取物對小鼠棉球肉芽腫增生的影響（±s）

表2 天南星提取物對小鼠棉球肉芽腫增生的影響（±s）

注：與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與阿司匹林組比較﹟P＜0.05，﹟﹟P＜0.01。

組別 劑量/(g/kg) n 肉芽腫干質量/mg生理鹽水 - 887.52±11.89阿司匹林 0.31031.18±9.46**天南星塊莖醇提取物 201050.26±8.21**﹟﹟天南星塊莖乙酸乙酯提取物 201045.87±9.20**﹟﹟天南星塊莖水提取物 201057.12±9.64**﹟﹟天南星果實石油醚提取物 201049.54±8.82**﹟﹟

表3 天南星提取物對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響（±s）

表3 天南星提取物對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響（±s）

注：與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與阿司匹林組比較﹟P＜0.05，﹟﹟P＜0.01。

組別 劑量/(g/kg) n 吸光度/A生理鹽水 - 100.25±0.04阿司匹林 0.390.04±0.06**天南星塊莖醇提取物 20100.08±0.01*﹟﹟天南星塊莖乙酸乙酯提取物 20100.05±0.07**﹟天南星塊莖水提取物 20100.18±0.03﹟﹟天南星果實石油醚提取物 2090.06±0.05**﹟﹟

4 討論

炎癥發展一般分為三期，早起以毛細血管擴張、通透性亢進為主，中期表現為血小板吸附及白細胞游走，晚期為肉芽組織增生〔12〕。二甲苯致小鼠耳腫脹模型和毛細血管通透性實驗屬于炎癥反應的早期，棉球肉芽腫試驗屬于炎癥反應的晚期〔13〕。

前期研究了天南星提取物不同給藥方式對于致炎動物的影響。對于炎癥早期（二甲苯致小鼠耳廓腫脹）模型，天南星提取物內服、外涂均表現出顯著的抗炎作用。對于炎癥晚期（棉球致小鼠肉芽腫）模型，天南星提取物內服無明顯作用，而外涂則表現出顯著的抗炎作用；這也和傳統及現代臨床對天南星使用的表述相符（如“生南星可治療腮腺炎、外涂可治療肋軟管炎，天南星復方口服，治療急性牙周炎、牙周膿腫。”等）。天南星這種藥效作用的差異性可能和給藥途徑、藥物的作用機制與作用靶點等有關系，提示有必要做進一步深入的探討和研究。

實驗表明天南星塊莖醇提取物、乙酸乙酯提取物，天南星果實石油醚提取物均能明顯抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹度；對小鼠棉球肉芽腫增生都有抑制作用（外涂）；且能明顯抑制冰醋酸所致的小鼠毛細血管通透性。說明上述提取物對于炎癥前期、炎癥后期均顯示明顯的作用，抗炎作用可能與抑制毛細血管通透性有關。通過本次研究細化了天南星抗炎的活性部位，為其臨床應用和進一步研究開發提供實驗依據。

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