肝癌組織中轉化生長因子β1表達與Treg浸潤的關系及臨床意義

梁芳 張青松 柯洋 張小杰

轉化生長因子作為多功能細胞因子，能夠抑制腫瘤細胞生長。而TGF-β則能夠誘導腫瘤局部Treg細胞聚集，從而導致腫瘤局部免疫微環境調節受到影響。部分臨床研究顯示肝癌患者外周血中及肝癌瘤旁組織中treg均呈現出明顯增高表現，同時對患者預后產生一定的影響，而臨床研究已經證實，TGF-β能夠對腫瘤組織旁T細胞產生誘導作用，使之轉化為Treg［1］。然而目前臨床關于轉化生長因子β1表達與Treg浸潤的關系研究尚不能明確，因此作者對鄭州大學附屬鄭州中心醫院5例肝癌患者進行研究，具體研究報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院自2011年1月～2013年1月收治的85例肝癌患者，男63例，女22例，年齡22～73歲，平均年齡(47.62±5.2)歲。患者UICC分期:Ⅰ期44例，Ⅱ期16例，Ⅲ期13例，Ⅳ期12例。所有患者均行根治性手術切除治療，取其肝癌組織及癌旁組織作為研究標本。所有患者均未接受任何免疫治療及抗腫瘤治療，均為原發腫瘤的首次治療。

1.2 方法 采用免疫組化三步法對獲得的患者肝癌及癌旁組織中的Foxp3表達及TGF-β進行檢測，具體如下:將手術標本取出后，用甲醛并固定，石蠟包埋，待拉塊成形后，連續將標本切為4～5μm厚的切片，抗原修復后，37℃孵育，完成后將一抗加入，使用抗體均為bopster生物公司生產，使用抗體均經測試，最佳實驗濃度設為1∶100。Foxp3陽性對照選用人體脾臟，PBS代替一抗后作為陰性對照。所有實驗結果均由本科室主治以上級別病理科醫生分別閱片，并對分值進行計算。

1.3 結果判定 根據TGF-β胞漿染色程度及面積大小進行評分，陽性面積0為1分，陽性面積小于10%為2分，陽性面積10% ～50%為2分，陽性面積51% ～80%為3分，陽性面積大于80%為4分。染色強度，染色為淡黃色、弱陽性為1分，染色為黃色，經仔細辨認能夠看到棕黃色、中陽性為2分，染色棕黃色，強陽性為3分。總評分則采用面積與強度的成績所得積分作為最終得分。4分作為評價分界:高表達組 ＞4分，低表達組≤4分［2］。

1.4 統計學方法 采用SPSS 18.0統計學軟件處理，計量資料采用t檢驗，組間對比采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 肝癌腫瘤組織及癌旁組織中Foxp3表達及TGF-β Foxp3染色陽性細胞較為均勻的分布在肝癌組織中，肝癌組織中Treg平均密度為2.58個/HP，癌旁組織中則基本不存在。肝癌組織及癌旁組織中均無TGF-β表達;肝癌組織及癌旁組織中，高表達組(49)(60)均明顯多于低表達組(36)(25)(P＜0.05)，高表達陽性率分別為57.6%、70.1%;肝癌組織及癌旁組織高表達陽性率間差異有統計學意義，P＜0.05，具體見表1。

表1 肝癌組織及癌旁組織中Foxp3表達及TGF-β情況

2.2 肝癌組織中Foxp3表達及TGF-β與Treg細胞浸潤相關性 經Spearman相關性分析結果顯示，肝癌組織中Foxp3表達及TGF-β呈正相關關系，肝癌組織中TGF-β表達與Treg浸潤呈正相關(r=0.1215，P=0.0136)。

3 討論

TGF-β與細胞分化、增殖、細胞外基質形成有著直接關系，而其在腫瘤中的作用則是十分復雜的，既可促進腫瘤生長，又能對腫瘤生長產生抑制作用，目前臨床關于肝癌組織中TGF-β表達存在一定差異，Bedossa等與Paik之間研究存在較大差異，Paik等研究認為TGF-β在肝癌組織中的表達低于癌旁組織［3］，與本次研究基本一致，對于臨床出現的差異可能與研究人數及使用方法的不同有關。Treg作為T淋巴細胞亞群，能夠通過直接分泌或接觸細胞因子的釋放從而抑制效應性T細胞的功能及增殖，從而參與腫瘤的免疫逃逸。因此通過清除Treg從而實現機體免疫應答的提高是臨床治療的有效手段，然而部分臨床研究顯示，Treg清除一段時間后，水平又重新恢復，影響臨床靶向治療，影響患者康復。本次研究中，通過對患者肝癌組織及癌旁組織標本研究發現，TGF-β表達在肝癌組織中的表達明顯低于肝癌組織，同時肝癌組織中TGF-β表達與Treg浸潤呈正相關，然而本次研究尚未對肝癌組織中轉化生長因子β1表達與臨床特征及預后進行表達，尚需進一步研究。

［1］ 林國和．肝癌組織中TGF-β表達與Treg浸潤的關系及其臨床意義．癌癥，2010，29(04):442-447.

［2］ 張冠華．人腦膠質瘤組織中轉化生長因子β表達與Treg浸潤的關系．細胞與分子免疫學雜志，2011，27(06):680-682.

［3］ 雷玉潔．非小細胞肺癌患者轉化生長因子β水平與機體免疫狀態的關系．中國臨床醫學，2011，18(5):762-763.