血清谷氨酸脫氫酶活性檢測在肝膽疾病中的臨床價值

趙元明

(濟寧醫學院附屬醫院檢驗科，山東 濟寧 272029)

谷氨酸脫氫酶(GLDH)是1種含鋅線粒體酶，主要分布于肝臟、心肌和腎細胞線粒體的基質及內膜中，而以肝組織活性最高[1]。分布于肝細胞線粒體內的GLDH在肝細胞受損害時會明顯升高[2]。天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)則主要存在于心、肝和骨骼肌中，其中肝中的AST大部分存在于線粒體中，所以AST的檢測也可作為肝細胞損害的輔助性指標[3]。本研究測定了各種肝病患者的 GLDH、AST和丙氨酸氨基轉移酶(ALT)活性，以評價臨床應用價值。

材料和方法

一、研究對象

1.正常對照組 選取2011年1月至8月在濟寧醫學院附屬醫院進行健康體檢的健康人120名，男69名，女51名，年齡16～57歲，各種理化指標均正常，并且排除心、腦、骨、腎及肝膽等系統的疾病。

2.肝膽疾病組 選取2011年1月至12月濟寧醫學院附屬醫院住院的患者180例，男102例，女78例，年齡8～67歲，均以臨床癥狀結合血清病毒學標志及其他臨床輔助綜合判斷，其中急性肝炎40、肝癌32例、肝硬化28例、膽道腫瘤25例、膽結石25例、其他肝膽疾病30例(包括肝膿腫、膽結石及膽囊炎等)。所測樣本均合格。

二、儀器與試劑

儀器為日立7600-120全自動生化分析儀。GLDH試劑由羅氏公司提供，AST、ALT試劑均由德國 CENTRONIC公司提供，質控品由英國RANDOX公司提供。采用試劑說明書推薦的參數進行相關測定。

三、測定方法

GLDH、AST和ALT測定均采用酶速率法，并分別采用低、中、高值進行精密度檢測，嚴格按照試劑盒說明書進行操作和結果判定。原理:α-酮戊二酸+NADH+NH4+谷氨酸+NAD++H2O。在上述反應中，NADH被氧化生成NAD+的速率與GLDH的活性成正比。在340 nm波長下測定NADH的下降速率，即可計算出GLDH的活性。

四、統計學方法

陽性判斷界值采用正常對照組95%水平確定參考范圍，計量數據以表示，采用SPSS17.0進行t檢驗和相關性分析。P＜0.05表示差異有統計學意義。

結 果

一、精密度測定

低、中、高值質控品的批內變異系數(CV)值分別為 2.36%、3.24%和 2.75%。

二、各組GLDH、AST和ALT測定結果

不同肝膽疾病組血清GLDH、AST和ALT活性均有不同程度升高，與正常對照組比較，差異均有統計學意義 (P＜0.05);GLDH的平均升高倍數(8.8倍)高于AST(4.2倍)。急性肝炎組ALT的平均升高倍數(67.3倍)遠高于 GLDH(11.6倍);肝癌組GLDH的平均升高倍數(15.4倍)高于ALT(4.8倍);其他疾病組二者的升高倍數相當。結果見表1、圖1。

表1 正常對照組和肝膽疾病各組GLDH、AST和ALT活性比較(，U/L)

表1 正常對照組和肝膽疾病各組GLDH、AST和ALT活性比較(，U/L)

注:與正常對照組比較，*P ＜0.05、＊＊P ＜0.01

組別 例數GLDH AST ALT正常對照組120 4.37 ±2.88 26.80 ±6.32 23.21 ±5.22急性肝炎組 40 45.32±28.31＊＊ 150.21±73.33＊＊ 1023.55±732.21肝硬化組 28 37.66±12.33＊＊ 105.56±60.02＊＊ 168.03±77.03＊＊肝癌組 32 66.27 ±32.21＊＊ 159.34 ±66.88＊＊ 95.43 ±55.06＊＊膽道腫瘤組 25 17.46 ±10.03* 90.01 ±34.33* 168.32 ±64.31＊＊膽結石組 25 30.31±16.22＊＊ 76.30±39.39* 155.82±70.01＊＊其他疾病組 30 22.23±8.03＊＊ 63.31±26.43*33.23 ±13.09

三、各肝膽疾病組GLDH和AST的相關性分析

從表1可見，肝膽疾病患者GLDH活性升高均伴隨不同程度AST活性增高，但AST活性增高并不都有GLDH活性升高。GLDH和AST的相關性分析顯示:肝癌、膽結石患者二者活性變化有明顯相關性(r=0.86，P ＜0.01)，急性肝炎和膽道腫瘤患者二者有相關性(r=0.72，P ＜0.05)，而肝硬化及其他肝膽疾病患者二者無相關性(r=0.41，P ＞0.05)。

討 論

本研究精密度試驗顯示，GLDH、AST和ALT試劑的批內精密度＜5%，表明檢測結果有很好的重復性。

健康人正常情況下血中GLDH含量很低，但在肝細胞損傷或壞死時可進入血流，使血清中GLDH活性明顯增高[4]。GLDH活性無季節性波動，個體差異小，不受其他因素影響。因此，測定血清GLDH活性可作為診斷肝細胞病變的重要指標[5]。

將ALT、AST與GLDH聯合檢測表明，GLDH反映肝實質損傷的特異性高于 ALT和 AST[6]。本研究結果顯示，ALT在肝臟輕度病變時即明顯升高，而在中、重度肝臟病變時則升高不明顯。雖然ALT在肝病早期即可出現改變，但特異性較差，其升高幅度亦不一定完全反映肝細胞損害的程度。ALT同時存在于線粒體及細胞漿，相對分子質量約為105。GLDH只存在于線粒體，而不存在于細胞漿，相對分子質量約為106[7]。因此，肝細胞病變僅為細胞膜通透性改變時，血清GLDH不升高，而當細胞壞死與線粒體崩解時，GLDH解離并逸出細胞。所以，GLDH正常不能排除肝細胞的輕度損害，而GLDH異常提示則肝細胞壞死，GLDH與ALT二者同時測定將有助于肝細胞損傷及其嚴重程度的判定[8]。

本研究結果顯示，不同肝膽疾病血清中GLDH、AST和ALT活性都明顯高于正常對照組。表明在不同肝膽疾病中，3種酶的活性均升高，但升高幅度不同，GLDH的升高幅度均高于AST。這種差異在肝癌和肝硬化患者中表現更明顯。在膽道疾病、膽結石和其他疾病中GLDH活性亦較AST升高幅度高，但差異相對肝癌和肝硬化較低。這可能與GLDH在正常情況下血清含量較低，當肝細胞損傷累及線粒體時，血清GLDH活性明顯升高有關。AST同時存在于肝細胞胞質中，當肝細胞損傷時升高不如GLDH明顯，本研究結果證明了這一點。

對肝膽疾病各組的GLDH和AST活性進行相關性分析，結果顯示肝癌和膽結石患者的GLDH和AST活性變化有明顯相關性(r=0.86，P＜0.01)，而在肝硬化和其他疾病患者中則無相關性(r=0.41，P ＞0.05)，表明 GLDH 在診斷肝實質性損傷時特異性優于AST。

由于GLDH在體內的生物半衰期為16 h，所以當病情得到良好控制或改善后，GLDH活性隨即降低，故 GLDH可作為療效判定的指標。GLDH持續高水平，提示肝細胞線粒體破壞持續存在，表明預后不良。因此，測定GLDH的活性對肝病早期診斷、掌握病情、判斷預后有其重要臨床意義[9]。

綜上所述，測定血清中GLDH活性可作為診斷肝細胞病變，特別是壞死性肝病的重要指標之一。而對于其他一些疾病GLDH也有診斷價值，并且有應用和開發前景。

[1]曹 燕，王柏山，牛廣華，等.谷氨酸脫氫酶檢測在慢性肝炎中的應用[J].上海醫學檢驗雜志，2003，18(4):247-248.

[2]張立江，王佳楠，高俊芬.速率法檢測血清 GLDH 120例臨床分析[J].中國社區醫師，2008，9(11):90.

[3]高 玲，孫艷紅，王勇強.幾種肝膽疾病血清中谷氨酸脫氫酶和AST活性變化的研究[J].實用醫學雜志，2004，20(2):201-202.

[4]李 倩，陳蔚銘，康向東.谷氨酸脫氫酶、膽堿酯酶在高血清丙氨酸轉氨酶肝病患者鑒別診斷中的應用[J].檢驗醫學，2005，20(5):437-438.

[5]潘 峰，李榮斌，張麗霞.血清GLDH和AST-m在診斷幾種肝臟疾病中的意義[J].中國實驗診斷學，2005，9(6):986-987.

[6]黃慧謙，呂 寧，侯志平，等.肝損傷酶活性聯合檢測在肝膽疾病診斷中的相關分析[J].檢驗醫學與臨床，2008，5(8):453-454.

[7]劉金濤.谷氨酸脫氫酶活力變化在肝損傷中的應用[J].國際檢驗醫學雜志，2011，32(2):270-271.

[8]邢 俊，李江華.血清谷氨酸脫氫酶檢測在肝細胞損傷性疾病中的臨床應用價值[J].黑龍江醫藥科學，2007，30(5):34-35.

[9]雷 鳴，朱志斌.血清GLDH和(AST+ALT)/GLD比值對肝病診斷的臨床探討[J].實用醫技雜志，2007，14(28):3842-3844.