低溫脅迫時間對4種幼苗生理生化及光合特性的影響

邵怡若，許建新，，薛 立，* ，張 柔，吳彩瓊，盧廣超

(1.華南農業大學林學院，廣州 510642;2.深圳市鐵漢生態環境股份有限公司，深圳 518040)

低溫影響植物生長發育、生理和光合特性［1］。植物在長期適應低溫脅迫過程中，逐步形成獨特的生理生化特性，例如積累滲透物質，葉綠素含量、抗氧化酶系統發生變化［［2］，調整光合特性［1］。因此，生理和光合指標成為評價植物抗寒性的重要指標［3］。

近年來，隨著城鎮化的快速發展，人類大量消耗石材資源形成了許多礦山廢棄地。礦山廢棄地缺少表土以及地表植被，直接暴露于光照之下，蒸發加強，溫度變化劇烈，冬季低溫通過改變色素組成，降低葉綠素熒光以及損害葉綠體發育［4］而影響植物的光合［5］，限制植物的定居［6］，因而寒害成為采礦石廢棄地植被恢復的主要環境脅迫之一。因此，研究低溫對礦山植被恢復植物的生理和光合特性影響具有重要的價值。鹽膚木(Rhus chinensis)、假連翹(Duranta repens)、老鴨嘴(Thunbergia grandiflora)、葛藤(Pueraria lobota)是熱帶、亞熱帶地區重要的礦山植被恢復植物，但是鮮有對這4種植物抗寒性研究的報道。本研究以這4種植物幼苗為研究對象，人工模擬低溫環境，從葉綠素、滲透調節物質、抗氧化酶系統和光合特性等方面比較研究了它們的耐寒性強弱，以期為礦山廢棄地的植被恢復提供科學依據。

1 研究方法

1.1 試驗材料

本試驗在華南農業大學林學院三樓進行。以來自深圳市林科院種苗示范基地的1年生鹽膚木、假連翹、老鴨嘴和葛藤的實生容器苗為材料，營養袋直徑9 cm，高9 cm，基質用林下表土與黃心土，比例3∶7。幼苗的基本情況見表1。

1.2 試驗方法

每種植物選生長良好和長勢基本一致的容器苗24株，移入RXZ智能型人工氣候箱進行低溫處理(自然生長為對照)。光照時間設為8:00—17:00，光照強度為120μmol·m－2·s－1，相對濕度保持在80%—85%。以30℃為對照，進行第0 h測定。人工氣候箱以6℃/h降溫，幼苗在氣候箱內經歷約4 h降至(6.0±0.5)℃，保持該溫度為處理溫度。在第0、24、48、72小時以及恢復48 h(R)(低溫解除)時進行各項指標測定。

表1 4種幼苗的基本情況(平均值±標準差)Table1 Characteristics of seedlings of four examined plant species(mean±SD)

1.3 樣品采集

采樣時間為8:00，以從植株頂芽開始的第3—8片完全展開葉為供試材料，用蒸餾水擦凈表面污物，將葉片剪碎、混合均勻后，進行不同生理指標測定，每個指標做3個重復。

1.4 生理指標的測定

生理生化指標 葉綠素含量的測定用分光光度法，脯氨酸含量的測定用酸性茚三酮法，SOD活性的測定用氯化硝基四氮唑藍(NBT)光化還原法，MDA含量的測定用硫代巴比妥酸比色法(TBA)［7］，可溶性蛋白質含量的測定用考馬斯亮藍法［8］，可溶性糖含量的測定用蒽酮比色法［9］。

光合指標 選擇每株幼苗的第3位至第8位功能葉(6枚葉片)掛牌標記，于早晨9:00—12:00采用美國Li-Cor公司生產的Li-6400便攜式光合系統分析儀測定幼苗葉片的凈光合速率(Pn)、氣孔導度(Gs)、細胞間隙CO2濃度(Ci)、蒸騰速率(Tr)，每枚葉片測定3次。測定條件:葉室溫度控制在20—25℃，光強為1000 μmol·m－2·s－1，CO2濃度為400μmol/mol，流速為500μmol/s。

1.5 數據分析與處理

數據統計分析和作圖由Excel和SAS8.1軟件系統完成。用Duncan多重比較檢驗同一幼苗在不同處理時間后差異顯著性，檢驗顯著性水平為0.05。

主成分分析法能夠較少損失原有信息的前提下，將原來個數較多且彼此相關的指標轉換成新的個數較少且彼此獨立的綜合指標［10］。按下列公式對各指標數值進行標準化，

式中，X為標準化后所得數據，xi為某項指標的原始數據，ˉx為某項指標的平均值。對標準化后的數據進行主成分分析。以累積貢獻率達85%以上為參考值，確定主成分個數。因主成分之間相互獨立且有著不同的貢獻率，所以每個主成分得分是其加權值，其中權重是主成分對應的貢獻率，由主成分的特征向量計算出每種幼苗的主成分得分［11-12］。本研究運用主成分計算各個抗寒指標的得分，按得分多少評定各植物的抗寒能力。

2 結果分析

2.1 不同低溫脅迫時間對幼苗生理生化指標的影響

2.1.1 不同低溫脅迫時間對幼苗葉綠素含量的影響

低溫脅迫處理期間，鹽膚木、老鴨嘴和葛藤幼苗的葉綠素含量持續下降，低溫24 h時分別下降為對照的96.4%、87.2%和 96.3%，低溫72 h時分別下降為對照的71.0%、57.3%和73.0%，均顯著小于后者(P＜0.05)(圖1)。假連翹幼苗的葉綠素含量先升后降，低溫24 h時上升為對照的134.0%，低溫72 h時比對照顯著下降了13.6%(P＜0.05)。4種幼苗恢復48 h時的葉綠素含量均顯著大于低溫72 h時的值(P＜0.05)(圖1)。

2.1.2 不同低溫脅迫時間對幼苗脯氨酸含量的影響

隨低溫脅迫時間的延長，鹽膚木和假連翹幼苗的脯氨酸含量均持續上升，在低溫72 h時與對照相比顯著上升了38.6%和42.8%(P＜0.05)(圖2)。老鴨嘴幼苗的脯氨酸含量下降后趨于平穩，低溫72 h時顯著小于對照(P＜0.05)。葛藤幼苗的脯氨酸含量上升后趨于平穩。4種幼苗恢復48 h時的脯氨酸含量與低溫72 h時相比均無顯著差異。

圖1 低溫脅迫下對幼苗葉片葉綠素含量的影響Fig.1 Effect of low temperature stress on the chlorophyll content in seedling leaves of the examined plants

圖2 低溫脅迫下對幼苗葉片脯氨酸含量的影響Fig.2 Effect of low temperature stress on the content of free proline in seedling leaves of the examined plants

2.1.3 不同低溫脅迫時間對幼苗可溶性蛋白質含量的影響

隨低溫脅迫時間的延長，鹽膚木、假連翹、老鴨嘴幼苗葉片的可溶性蛋白質含量均顯著上升(P＜0.05)，在低溫72 h時分別為對照的219.4%，271.6%和228.7%。葛藤幼苗葉片的可溶性蛋白質含量先升后降，在低溫72 h時為對照的160.3%。恢復48 h時，葛藤幼苗葉片的可溶性蛋白質含量與低溫72 h時相比有所降低，其余幼苗有所增加(圖3)。

2.1.4 不同低溫脅迫時間對幼苗可溶性糖含量的影響

隨低溫脅迫時間的延長，鹽膚木葉片的可溶性糖含量顯著上升后小幅波動，其余幼苗持續增加。鹽膚木、假連翹、老鴨嘴和葛藤幼苗葉片的可溶性糖含量在低溫72 h時分別增加167.9%、224.0%、196.5%和124.0%(圖4)。恢復48 h時與連續低溫72 h時相比鹽膚木和老鴨嘴幼苗的可溶性糖含量有所上升，其余幼苗有所下降。

2.1.5 不同低溫脅迫時間對幼苗丙二醛含量的影響

低溫脅迫處理期間，4種幼苗的丙二醛(MDA)含量均持續上升，鹽膚木增幅較小，在低溫72 h時增幅為66.4%，假連翹、老鴨嘴和葛藤的增幅分別為112.7%、161.4%、165.2%(圖5)。恢復48 h時，4種幼苗的MDA含量與低溫72 h時相比，鹽膚木和假連翹的MDA含量有所下降，老鴨嘴和葛藤有所上升。

圖3 低溫脅迫下對幼苗葉片可溶性蛋白質含量的影響Fig.3 Effect of low temperature stress on the content of soluble protein in seedling leaves of the examined plants

圖4 低溫脅迫下對幼苗葉片可溶性糖含量的影響Fig.4 Effect of low temperature stress on the content of soluble sugar in seedling leaves of the examined plants

圖5 低溫脅迫下對幼苗葉片丙二醛含量的影響Fig.5 Effect of low temperature stress on the content of MDA in seedling leaves of the examined plants

2.1.6 不同低溫脅迫時間對幼苗SOD活性的影響

低溫脅迫處理期間，鹽膚木和老鴨嘴幼苗葉片的SOD活性先升后降，在低溫72 h時分別降至對照的133.7%和144.9%，而假連翹和葛藤持續上升，在低溫72 h時分別增至對照的148.8%和123.9%(圖6)。恢復48 h時，鹽膚木幼苗的SOD活性比低溫72 h時略有上升，其余幼苗的SOD活性下降顯著(P＜0.05)。

圖6 低溫脅迫下對幼苗葉片SOD含量的影響Fig.6 Effect of low temperature stress on the activity of SOD in seedling leaves of the examined plants

2.2 不同低溫脅迫時間對幼苗光合特性的影響

2.2.1 不同低溫脅迫時間對幼苗凈光合速率(Pn)的影響

隨低溫脅迫時間的延長，4種幼苗的Pn持續下降，經72 h低溫處理時，鹽膚木、假連翹、老鴨嘴和葛藤分別下降到對照的13.3%、18.5%、3.8%和2.9%。恢復48 h時假連翹的Pn與低溫72 h時相比略有回升，其余幼苗顯著回升(P＜0.05)(圖7)。

圖7 低溫脅迫下對幼苗葉片凈光合速率(P n)的影響Fig.7 Effect of low temperature stress on the net photosynthetic rate(P n)in seedling leaves of the examined plants

2.2.2 不同低溫脅迫時間對幼苗氣孔導度(Gs)的影響

隨低溫脅迫時間的延長，4種幼苗的Gs持續下降，低溫72 h時鹽膚木、假連翹、老鴨嘴和葛藤幼苗的Gs分別下降到對照的3.3%、7.1%、2.3%和1.8%。恢復48 h時假連翹和老鴨嘴的Gs與低溫72 h時相比有所回升，鹽膚木和葛藤顯著回升(P＜0.05)(圖8)。

2.2.3 不同低溫脅迫時間對幼苗胞間CO2濃度(Ci)的影響

隨低溫脅迫時間的延長，除假連翹幼苗的Ci持續上升外，其余幼苗均先下降后上升。低溫72 h時，鹽膚木、假連翹、老鴨嘴和葛藤幼苗的Ci分別上升為對照的101.1%、152.3%、151.2%和131.3%。恢復48 h時4種幼苗的Ci均顯著小于低溫72 h的值(P＜0.05)(圖9)。

圖8 低溫脅迫下對幼苗葉片氣孔導度(G s)的影響Fig.8 Effect of low temperature stress on the stomatal conductance(G s)in seedling leaves of the examined plants

圖9 低溫脅迫下對幼苗葉片胞間CO2濃度(C i)的影響Fig.9 Effect of low temperature stress on the Intercellular CO2 concentration(C i)in seedling leaves of the examined plants

2.2.4 不同低溫脅迫時間對幼苗葉片蒸騰速率(Tr)的影響

隨低溫脅迫時間的延長，4種幼苗的Tr顯著下降，低溫72 h時鹽膚木、假連翹、老鴨嘴和葛藤幼苗的Tr分別下降為對照的16.6%、24.1%、13.2%和9.0%，恢復 48 h 時均顯著回升(P＜0.05)(圖10)。

表2 低溫脅迫幼苗的生理指標主成分分析Table2 Principal component result of physiological indicators for seedlings under drought stress

2.3 抗寒性綜合評價結果

對4種幼苗低溫脅迫的生理指標進行主成分分析，結果如表2。低溫脅迫下前2個主成分的方差累計貢獻率達到87.6%，故前2個主成分足夠描述植物低溫脅迫下的情況。由表2可知，第1主成分中葉綠素和脯氨酸系數較大，說明二者是反映低溫脅迫最重要的生理指標。

根據生理指標的數據，由主成分的特征向量計算出4種幼苗的生理指標得分，表明4種幼苗的抗寒性為葛藤＞鹽膚木＞老鴨嘴＞假連翹(表3)。

圖10 低溫脅迫下對幼苗葉片蒸騰速率(T r)的影響Fig.10 Effect of low temperature stress on the transpiration rate(T r)in seedling leaves of the examined plants

表3 低溫脅迫下4種幼苗的生理生化指標得分Table3 Cold resistance scores of four species seedlings under low temperature

表4列出4種幼苗低溫脅迫的光合指標主成分分析。低溫脅迫下前2個主成分的方差累計貢獻率達到91.85%，故采用前2個主成分。由表4可知，第1主成分中Pn和Tr的系數較大，說明二者是反映低溫脅迫最重要的光合指標。

表4 低溫脅迫幼苗的光合指標主成分分析Table4 Principal component result of photosynthetic indicators for seedlings under drought stress

根據光合生理指標的數據，由主成分的特征向量計算出4種幼苗的光合生理得分(表5)，表明4種幼苗的抗寒性為葛藤＞鹽膚木＞老鴨嘴＞假連翹。

表5 低溫脅迫下4種幼苗光合指標得分Table5 Cold resistance scores of four species seedlings under low temperature

3 結論與討論

3.1 幼苗抗寒性與葉片生理生化指標

3.1.1 幼苗抗寒性與葉片葉綠素含量

溫度影響葉綠素合成，進而植物的光合和生長。本研究低溫處理的假連翹幼苗假葉片的葉綠素含量上升后下降，其余幼苗葉片的葉綠素含量持續下降。解除低溫脅迫恢復48 h時4種幼苗的葉綠素含量均顯著增加，這與光合速率的變化一致，說明解除低溫脅迫后葉綠體色素合成有所恢復，光合作用加強。大部分植物在低溫脅迫下葉綠素含量降低，一方面可能是葉綠體色素合成酶活性降低，葉綠體合成受阻而造成;另一方面也可能是低溫引起了葉綠體功能的紊亂［13］，或加速了葉綠素的分解和葉綠體形態結構的受損使植物葉片內含量減少［14］。此外，低溫使植物體代謝緩慢，合成葉綠素的原料不足，也可能會造成葉綠素含量減少［15］。

3.1.2 幼苗抗寒性與葉片的滲透調節物質含量

植物體內游離脯氨酸是細胞質重要的滲透調節物質，可以降低質膜受凍害的程度［16］。在各低溫脅迫階段除了老鴨嘴幼苗的脯氨酸含量低于對照之外，其余幼苗均大于對照，這有利于緩解低溫對植株造成的傷害。

可溶性蛋白質的吸水性很強，有助于提高細胞內的束縛水，降低冰點，減少原生質內結冰而傷害致死的機會［17］。本研究的葛藤幼苗的可溶性蛋白質含量上升后相對穩定，其余幼苗的可溶性蛋白質含量均呈上升趨勢，有利于抗寒。

可溶性糖是理想的滲透調節物質，可以緩解逆境對膜系統的傷害［18］。在低溫脅迫下，鹽膚木幼苗的可溶性糖含量上升后保持穩定，其余幼苗持續上升，可以加大細胞的原生質濃度，增強細胞液的流動性而起到抗脫水的作用，有利于抗冷性的增加。在低溫脅迫解除后，鹽膚木和老鴨嘴幼苗的可溶性糖含量有不同幅度的增加，說明其對低溫有較強的適應性。

3.1.3 幼苗抗寒性與葉片MDA含量和SOD活性

低溫脅迫破壞細胞內活性氧代謝平衡被而產生活性氧，造成細胞膜系統的損害，引發或加劇膜質過氧化的作用，最終產物主要為丙二醛［19］。本研究結果表明，隨低溫脅迫時間的延長，4種幼苗的MDA含量都呈增加趨勢，其中鹽膚木和葛藤在低溫脅迫24 h時增幅小，說明這兩種幼苗低溫脅迫初期的膜脂過氧化程度弱，表現出較強的抗寒性。恢復48 h時，4種幼苗的MDA含量與低溫72 h時相比無顯著差異，說明在解除低溫脅迫后，幼苗的細胞膜脂過氧化程度變化不大。

SOD是植物重要的耐冷保護酶系統［20］。與對照相比，4種幼苗在受到低溫脅迫24 h時，SOD活性都有不同程度的上升，說明幼苗細胞內活性氧含量超出了正常水平，促發細胞內SOD活性增強，其活性的上升說明在低溫脅迫下其清除自由基的能力增強。在降溫初期幼苗對低溫具有一定的防御反應，來減緩細胞內多余的自由基對細胞傷害的速度與程度，是4種幼苗對低溫脅迫的適應性反應。隨著低溫脅迫時間的延長，假連翹的SOD活性保持穩定，葛藤持續增加，說明低溫沒有減弱假連翹，特別是葛藤的清除自由基的能力，有利于這些幼苗的抗寒。

3.2 幼苗抗寒性與葉片光合特性指標變化

凈光合速率是光合系統功能的直接體現，也是植株光合系統工作正常與否的指標［21］。氣孔是植物與大氣進行水汽和CO2交換的通道，影響著植物的光合與蒸騰。隨低溫脅迫的延長，4種幼苗的凈光合速率(Pn)、氣孔導度(Gs)和蒸騰速率(Tr)均持續下降，假連翹的Ci持續上升，其余幼苗均先下降后上升。4種幼苗的Pn降低有利于抗凍。低溫脅迫期間，假連翹幼苗的Gs持續下降，且Ci持續上升，所以其Pn下降主要有非氣孔因素引起。其余3種幼苗的Gs持續下降，Ci先降后升，其Pn前期下降的原因主要是氣孔因素，Gs的下降限制了外界CO2通過氣孔進入細胞間隙，導致光合速率下降，后期轉變為非氣孔因素［22］。從光合生理指標來看，假連翹幼苗的抗寒性最差，其他3種幼苗較強。恢復48 h時Pn、Gs和T r均有不同程度的回升，Ci有不同程度的下降，說明4種幼苗均有一定的抗寒能力。

綜上所述，幼苗抗寒性是受滲透調節物質和保護酶活性等共同調節的。低溫4種幼苗的脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白質含量的增加和SOD活性的穩定或增加，減輕了幼苗葉片細胞，特別是葛藤和鹽膚木葉片細胞的膜脂過氧化程度，維持了細胞膜的完整性，減輕了低溫對幼苗的傷害，是幼苗對低溫脅迫的適應性反應的重要調節機制。

研究植物抗寒有重要的應用價值［3］。從生理生化指標和光合生理指標的主成分得分可知，4種幼苗的抗寒性均為葛藤＞鹽膚木＞老鴨嘴＞假連翹，這一結果可為采礦石廢棄地植被恢復植物的篩選提供科學依據。幼苗定居后，通過凋落物和根系分泌物來增加有機質［23-24］和有效養分，減輕水蝕和風蝕的形成和程度，減少土壤養分的流失，改善土壤特性［25］，促進植被的生長和植被覆蓋度的增加，從而營造一個植物群落環境，加速群落內養分的累積和其它種類的入侵，從而促進物種豐富度的不斷增加。

［1］ Guo SH，Xue L，Zhang R，Yang Z Y.Photosynthetic response of four species seedlings to low temperature stress.Journal of South China Agricultural University，2012，33(3):373-377.

［2］ He Y J，Xue L，Ren X R，Cao H，Liang L L，Xu Yan.Effects of low temperature stress on physiological characteristics of six tree species seedlings.Chinese Journal of Ecology，2008，27(4):524-531.

［3］ Xu Y，Xue L，Qu M.Physiological and ecological mechanisms of plant adaptation to low temperature.Scientia Silvae Sinica，2007，43(4):88-94.

［4］ Farooq M，Aziz T，Wahid A，Lee D J，Siddique KHM.Chilling tolerance in maize:agronomic and physiological approaches.Crop and Pasture Science，2009，60(6):501-516

［5］ Zhu X C，Song F B，Xu H W.Arbuscular mycorrhizae improves low temperature stress in maize via alterations in host water status and photosynthesis.Plant and Soil，2010，331(1/2):129-137

［6］ Yang Z Y，Xue L，Xu J X.Advances in ecology restoration of abandoned quarries.Acta Ecologica Sinica，2012，32(16):5264-5274.

［7］ Chen J X，Wang X F.Guideline of Experiments in Plant Physiology.Guangzhou:South China University of Technology Press，2002:31-32，117-120.

［8］ Gao JF.Guideline of Experiments in Plant Physiology.Beijing:Higher Education Press，2006:142-143

［9］ Li H S.Principle and technology on physiological and bio-chemical test of plant.Beijing:Higher Education Press，2000:195-197.

［10］ Wang SG，Wang Z L，Wang P，Wang H W，Li F，Huang W，Wu Y G，Yin Y P.Evaluation of wheat freezing resistance based on the responses of the physiological indices to low temperature stress.Acta Ecologica Sinica，2011，31(4):1064-1072.

［11］ Feng H F，Xue L，Ren X R，Fu JD，Zheng W G，Shi X L.Physiological responses of four broadleaved seedlings to drought stress simulated by PEG.Acta Ecologica Sinica，2011，31(2):371-382.

［12］ Tan X H，Gao Y P，Guo X P，Zhao T N，Wang L.Physiological characteristics and comprehensive evaluation of drought resistance in five plants used for roadside ecological restoration.Acta Ecologica Sinica，2012，32(16):5076-5086.

［13］ Wang Y，Yang H F，Li SD.Studies on chilling injury and cold hardiness of horticultural crops:a literature review.Acta Horticulturae Sinica，1994，21(3):239-244.

［14］ Liang L H，Mei X，Lin F，Xia J，Liu SJ，Wang JH.Effect of low temperature stress on tissue structure and physiological index of cashew young leaves.Ecology and Environmental Sciences，2009，18(l):317-320.

［15］ Wang C G，Wang X，Cang J，Yang L J.Effect of low temperature stress on cold resistance ability of rice seedlings.Journal of Northeast Agricultural University，2004，35(2):205-207.

［16］ He B，Chen Q B，Pan Y Z，L iu Y G.Research on physiology characteristic performance of several euphorbia pulcherrima Willd.cultivars under low temperature stress.Journal of Sichuan Agricultural University，2004，22(4):332-334，360.

［17］ Gao Y，Qi X H，Yang J H，Zheng M F.The response mechanism of cold stress in higher plants.Northern Horticulture，2007(10):58-61.

［18］ Yin C X，Yao R X，Qiao A M.The response to cold stress and evaluation of cold resistance of five cassava varieties.Guangdong Agricultural Sciences，2012，11:30-33.

［19］ Chen SY.Injury of membrane lipid peroxidation to plant cell.Plant Physiology Communications，1991，27(2):84-90.

［20］ Liu H Y，Zhu ZJ，Lu GH.Effect of low temperature stress on chilling tolerance and protective system against active oxygen of grafted watermelon.Chinese Journal of Applied Ecology，2004，15(4):659-662.

［21］ Zhou J，Yang L F，Hao F G，You Y.Photosynthesis and chlorophyll-fluorescence of Magnolia grandiflora seedlings under low temperature stress.Acta Bot.Boreal.-Occident.Sin，2009，29(1):0136-0142.

［22］ Farquhar G D，Sharkey T D.Stomatal conductance and photosynthesis.Annual Review of Plant Physiology，1982，33(3):317-345.

［23］ An Z S，Zhan J，Sun Q Y.Changes of nitrogen components in wastelands of copper mine tailings with the formation of natural plant communities.Acta Ecologica Sinica，2010，30(21):5958-5966.

［24］ Li Y，Chen M L.Effects of the inhabitation by Hippochaete ramosissimum on heavy metal speciations and enzyme activities in copper mine tailing soil.Acta Ecologica Sinica，2010，30(21):5949-5957.

［25］ Xue S，Liu G B，Dai Q H，Wei W，Hou X L.Evolution of soil microbial biomass in the restoration process of artificial Robinia pseudoacacia under erosion environment.Acta Ecologica Sinica，2007，27(6):909-917.

參考文獻:

［1］ 郭淑紅，薛立，張柔，楊振意.4種幼苗對低溫脅迫的光合生理響應.華南農業大學學報，2012，33(3):373-377.

［2］ 何躍君，薛立，任向榮，曹鶴，梁麗麗，徐燕.低溫脅迫對六種幼苗生理特性的影響.生態學雜志，2008，27(4):524-531.

［3］ 徐燕，薛立，屈明.植物抗寒性的生理生態學機制研究進展.林業科學，2007，43(4):88-94.

［6］ 楊振意，薛立，許建新.采石場廢棄地的生態恢復研究進展.生態學報，2012，32(16):5264-5274.

［7］ 陳建勛，王曉峰.植物生理學實驗指導.廣州:華南理工大學出版社，2002:31-32，117-120.

［8］ 高俊風.植物生理學實驗指導.北京:高等教育出版社，2006:142-143.

［9］ 李合生.植物生理生化實驗原理和技術.北京:高等教育出版社，2000:195-197.

［10］ 王樹剛，王振林，王平，王海偉，李府，黃瑋，武玉國，尹燕枰.不同小麥品種對低溫脅迫的反應及抗凍性評價.生態學報，2011，31(4):1064-1072.

［11］ 馮慧芳，薛立，任向榮，傅靜丹，鄭衛國，史小玲.4種闊葉苗木對PEG模擬干旱的生理響應.生態學報，2011，31(2):371-382.

［12］ 譚雪紅，高艷鵬，郭小平，趙廷寧，王亮.五種高速公路邊坡綠化植物的生理特性及抗旱性綜合評價.生態學報，2012，32(16):5076-5086.

［13］ 王毅，楊宏福，李樹德.園藝植物冷害和抗冷性的研究——文獻綜述.園藝學報，1994，21(3):239-244.

［14］ 梁李宏，梅新，林鋒，夏軍，劉術金，王金輝.低溫脅迫對腰果幼苗葉片組織結構和生理指標的影響.生態環境學報，2009，18(l):317-320.

［15］ 王晨光，王希，蒼晶，楊麗娟.低溫脅迫對水稻幼苗抗冷性的影響.東北農業大學學報，2004，35(2):205-207.

［16］ 何兵，陳其兵，潘遠智，劉應高.幾個一品紅品種低溫脅迫的生理特性研究.四川農業大學學報，2004，22(4):332-334，360.

［17］ 高媛，齊曉花，楊景華，張明方.高等植物對低溫脅迫的響應研究.北方園藝，2007，(10):58-61

［18］ 尹彩霞，堯瑞霞，喬愛民.5個木薯品種對低溫脅迫的響應及其抗寒性評價.廣東農業科學，2012，11:30-33.

［19］ 陳少裕.膜脂過氧化對植物細胞的傷害.植物生理學通訊，1991，27(2):84-90.

［20］ 劉慧英，朱祝軍，呂國華.低溫脅迫對嫁接西瓜耐冷性和活性氧清除系統的影響應用.應用生態學報，2004，15(4):659-662.

［21］ 周建，楊立峰，郝峰鴿，尤揚.低溫脅迫對廣玉蘭幼苗光合及葉綠素熒光特性的影響.西北植物學報，2009，29(1):0136-0142.

［23］ 安宗勝，詹婧，孫慶業.自然植物群落形成過程中銅尾礦廢棄地氮素組分的變化.生態學報，2010，30(21):5958-5966.

［24］ 李影，陳明林.節節草生長對銅尾礦砂重金屬形態轉化和土壤酶活性的影響.生態學報，2010，30(21):5949-5957.

［25］ 薛萐，劉國彬，戴全厚，衛偉，侯喜祿.侵蝕環境生態恢復過程中人工刺槐林(Robinia pseudoacacia)土壤微生物量演變特征.生態學報，2007，27(6):909-917.