家兔靜脈注射左氧氟沙星后的眼內組織分布及其藥動學研究

鄒 澤，李 飛，黃曉宏，謝 飛，袁建平（重慶市黔江中心醫院，重慶 409000）

左氧氟沙星（Levofloxacin，LOX）是臨床應用中不良反應報道相對較少、抗菌活性較高的一種安全、有效、經濟的氟喹諾酮類藥物，目前在臨床應用較廣泛。其滴眼液局部應用的眼組織分布及藥動學已有文獻[1-2]報道；筆者在前期也對家兔灌服LOX后的眼內各組織中的分布及藥動學進行了研究[3]。在本文中，筆者將研究家兔靜脈注射LOX后在眼內各組織的分布及其藥動學情況，為其臨床合理使用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

1100系列高效液相色譜（HPLC）儀，包括泵系統、可調波長紫外檢測器和工作站（美國Agilent公司）。

1.2 藥品與試劑

乳酸LOX氯化鈉注射液（以下簡稱LOX注射液，浙江醫藥股份有限公司新昌制藥廠，批號：100550，規格：100ml∶0.2g）；內標環丙沙星（CF，重慶藥友制藥有限公司，批號：1101010，純度：99%，使用時用甲醇溶解并制備成336μg/ml的貯備液及33.6μg/ml的工作液）；甲醇、磷酸二氫鉀、四丁基溴化銨為分析純，二氯甲烷為色譜純，水為三蒸水。

1.3 動物

健康合格新西蘭家兔27只，體質量2.5～3.0kg，♀♂兼用，由重慶醫科大學實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK（渝）2002-0001。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與色譜行為

色譜柱：Phenomenex C18（250mm×4.6mm，10μm）；固定進樣環體積：100μl；流動相：甲醇-0.008mol/L磷酸鹽緩沖液-0.5mol/L四丁基溴化銨（25∶75∶4），流速：1.0ml/min；紫外檢測波長：290nm；柱溫：室溫；內標：CF。

按“2.2”項下方法制備未給藥的空白組織勻漿，并取此勻漿及空白組織勻漿+LOX（1.952μg/ml）+CF（0.672μg/ml）及靜脈注射后2h樣品勻漿進樣分析。結果，在本實驗條件下，LOX與CF及眼組織中雜峰分離良好，見圖1。

2.2 標本制備

選取27只家兔，無眼疾，隨機分為9組，每組3兔6眼。參照文獻[4]，按人體用量換算得各組家兔靜脈注射LOX 24mg/kg，分別于注射后0.125、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0h空氣栓塞處死，迅速摘取眼球，用生理鹽水反復沖洗。抽取房水、玻璃體，然后刨開眼球，取出角膜、虹膜-睫狀體、晶體，經濾紙吸干后稱質量，置于試管中剪碎、勻漿。取勻漿1ml，置于10ml試管中，依次加CF 20μl、二氯甲烷4ml，振蕩1min，離心1min（4500r/min）。取二氯甲烷層3.0ml，置于5ml離心管中，50℃水浴下氮氣吹干，100μl流動相復溶，即制作得進樣樣品。

圖1 高效液相色譜圖A.空白組織；B.空白組織+LOX+CF；C.樣品；1.LOX；2.CFFig 1 HPLC chromatogramsA.blank tissue；B.blank tissue+LOX+CF；C.samples；1.LOX；2.CF

2.3 含量測定方法學考察[4]

本實驗中，以LOX峰面積與CF峰面積之比為縱坐標（Y），以LOX濃度為橫坐標（X），得眼組織混合勻漿標準曲線方程為Y＝1.8710X－0.04383（r＝0.9994），LOX檢測線性范圍為0.03904～3.904μg/ml，低、中、高濃度平均回收率為（93.26±1.99）%（n＝15）；日內RSD為1.92%～6.72%（n＝15），日間RSD為4.09%～7.29%（n＝15）；凍融穩定性良好（RSD＝3.15%，n＝5），最低定量限為0.03904μg/ml（RSD＝19.51%，n＝5）。

2.4 LOX在眼內各組織中含量測定結果

家兔單劑量靜脈注射LOX（24mg/kg）后不同時間取樣測定房水、角膜、虹膜-睫狀體、玻璃體和晶體中藥物含量，結果見表1。

表1 家兔單劑量靜脈注射LOX后眼內各組織中平均藥物含量Tab 1 Mean concentration of levofloxacin in various ocular tissues of rabbits after single dose of LOX by iv.

表1結果表明，家兔眼內各組織中LOX的含量均在1.0h達峰，8.0h內均保持較高含量，其中角膜和虹膜-睫狀體含量較高。

2.5 LOX在各組織中的藥動學參數

將所測得的LOX含量（質量濃度）-時間數據經3p97自動擬合得藥動學參數值。藥-時曲線見圖2，藥動學參數值見表2（表中“＊”表示實測值）。

從圖2可見，家兔單劑量靜脈注射LOX后，藥物除在房水中呈二室模型分布外，其余均呈一室模型分布。從表2可見，各組織中LOX的t1/2β均為3.0h左右，表明藥物在組織中保留時間相對較短，尤其是房水和晶體較為明顯。

3 討論

圖2 家兔單劑量靜脈注射LOX后眼內各組織平均藥-時曲線Fig 2 Mean concentration-time cures of levofloxacin in various ocular tissues of rabbits after iv.single dose of levofloxacin

文獻[5]報道，LOX對眼內各組織常見細菌的90%最低抑菌濃度（MIC90）為金黃色葡萄球菌0.25～0.5μg/ml、表皮葡萄球菌 0.25～0.41μg/ml、肺炎球菌 0.06～1.0μg/ml、大腸桿菌0.12～0.39μg/ml、綠膿桿菌1.0～4.0μg/ml；而本研究結果表明，LOX靜脈注射后在房水、角膜、虹膜-睫狀體、玻璃體和晶體的cmax均明顯高于上述菌的MIC90。提示LOX對眼內各組織中的常見菌均有較強的抗菌作用，因此靜脈注射LOX對眼內感染有較好的防治作用。

表2 家兔單劑量靜脈注射LOX后眼內各組織藥動學參數結果Tab 2 Pharmacokinetic parameters of levofloxacin in various ocular tissues of rabbits after iv.single dose of LOX

此外，本研究結果表明，LOX靜脈注射給藥后與局部點眼給藥后比較[6]，前者房水、角膜、虹膜-睫狀體、玻璃體和晶體各組織中的tmax較短，表明達峰時間快；AUC在角膜和虹膜-睫狀體中最高，并與灌服給藥后結果一致[3]，表明本品靜脈注射給藥后對眼內各組織感染具有較好的防治作用。

綜上所述，LOX靜脈注射給藥后在眼內各組織有較高的藥物濃度、達峰時間快，可用于眼內各組織嚴重感染的治療。

[1] 王文彤，陶遵威，張娜，等.鹽酸左氧氟沙星滴眼液在兔眼房水內的藥動學[J].中國醫藥工業雜志，2011，42（2）：115.

[2] 高靜，儲藏，丁雪鷹，等.鹽酸左氧氟沙星眼用即形凝膠在兔眼房水內的藥動學[J].中國醫療前沿，2007（22）：1723.

[3] 鄒澤，岳建農，蘇學勤.家兔灌服左氧氟沙星后眼內組織分布及其藥動學研究[J].中國藥房，2012，23（37）：3493.

[4] 曾洋，肖明朝，周遠大，等.鹽酸特拉唑嗪對細菌性前列腺炎模型大鼠血漿中左氧氟沙星濃度的影響[J].中國藥房，2011，22（5）：408.

[5] Fiscella RG，Nguyen TK，Cwik MJ，et al.Aqueous and vitreous penetration of levofloxacin after oral administration[J].Ophthalmology，1999，106（12）：2286.

[6] 蔡鴻生，羅順德，劉強，等.乳酸左氧氟沙星滴眼液在兔眼中的藥動學[J].中國醫院藥學雜志，2001，21（7）：391.