心臟手術患者檢測心臟型脂肪酸結合蛋白含量變化及其臨床意義

詹克勤 ，彭衛華 ，詹長欣 ，洪智海 ，吳欽生

(1、婺源縣人民醫院檢驗科，江西 婺源333200；2、南昌大學第一附屬醫院檢驗科，江西 南昌330006)

心臟型脂肪酸結合蛋白(heart fatty acid-binding protein,H-FABP)是心肌細胞胞漿中含量最豐富的蛋白質之一[1]。當心肌細胞因缺血缺氧發生不可逆損害時，細胞膜破裂，胞漿中的H-FABP進人細胞間質，從而使H-FABP在心肌細胞中的含量減少呈脫失狀態[2]。近年來，H-FABP作為一種新的心臟手術后觀察的標志蛋白，日益受到重視和關注。本文對53例行心臟手術患者進行了H-FABP的觀察，并對其結果分析報告如下。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象 選取2011年10月至2012年12月在南昌大學第一附屬醫院胸外科住院行心臟手術的53例患者，其中男性25例，女性28例，年齡為17~48歲，平均年齡為38.7歲。對照組為在南昌大學第一附屬醫院體檢科40名健康體檢者，其中男性18例，女性26例，年齡為22~53歲，平均年齡為35.6歲。

1.2 方法

1.2.1 標本采集與保存 在患者主動脈阻斷前、主動脈阻斷開放后30min、主動脈阻斷開放后3h、主動脈阻斷開放后12h、主動脈阻斷開放后24h分別取靜脈血2～3ml，對照組為健康體檢者，采集空腹血，常規分離血清標本，于-20℃保存。集中檢測H-FABP。

1.2.2 試劑與測定方法 H-FABP采用美國MARKET INC公司生產的酶聯免疫吸咐試驗試劑。嚴格按我室SOP標準操作程序進行檢測：將5μl樣本血清加入500μl樣本稀釋液中，將10μl標準系列H-FABP和10μl已稀釋的樣品分別加入反應孔，每孔再加入100μl酶標物，混勻10s，置室溫反應45min，用緩沖液洗滌5次，拍板后每孔加100μl TMB顯色液，室溫20min后加終止液，在450nm波長下比色。根據同標準H-FABP比較進行計算得標本中H-FABP含量。

1.2.3 手術 麻醉后，對患者施行開胸手術，關閉主動脈并建立體外循環，在心肌暫時缺血缺氧的情況下施行心內直視手術，手術后開放主動脈恢復心臟血供，并閉胸腔。

1.3 統計方法 數據以(x±s)表示，各組與對照組之間的比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。均應用SPSS 11.5軟件進行數據分析。

2 結果

53例心臟手術患者手術過程中不同時刻外周血及40例健康對照組檢測血清H-FABP結果詳見表1。

表1 手術過程中不同時刻外周血H-FABP濃度的改變(x±s，ng/ml)

3 討論

體外循環心內直視手術時，是在心肌暫時性缺血缺氧的情況下施行，心肌的切割和術后心肌的縫合會對心肌有一定的損傷，手術后開放主動脈恢復心臟血供，由于缺血后恢復氧合血灌注，心肌損害會較缺血時更為明顯和嚴重，稱為缺血再灌注損傷[3]。

H-FABP是存在于心肌細胞漿內的小分子可溶性蛋白質，相對分子質量為(14KD～15KD)，其作用是在細胞內攝取游離脂肪酸，將其轉運至線粒體，從而進入能量代謝體系并最終生成三磷酸腺苷，后者是心肌收縮的主要能量來源[4]。在臨床上，心肌損傷的標記物先后應用了CK-MB、肌紅蛋白、心肌肌鈣蛋白 T(cardiac troponinT，cTnT)、cTnI等。其中，H-FABP具有很高的組織特異性，非常符合心肌損傷的理想標記物所具有的特征。由于心肌細胞對缺血、缺氧的高度敏感性，因此，在缺血缺氧狀態下，心肌細胞損傷，動員脂肪酸進行氧化供能，使心肌細胞內的H-FABP相應地迅速上升，而且由于H-FABP的相對分子質量小，可快速釋放入血，因而是檢測心臟手術時心肌損傷的理想標記物，目前已鑒定出有9種不同類型的FABP，主要分布在哺乳動物脂肪酸代謝活躍的組織如心肌、肝臟、小腸、脂肪細胞等[5,6]，但不同類型的FABP具有不同的免疫學特征。H-FABP在脂肪酸代謝旺盛的心肌中含量高達骨骼肌的3～10倍，從而依據血中的H-FABP與肌紅蛋白(Mb)之比可以區別心肌損傷和骨骼肌損傷[7]。心臟手術主動脈阻斷開放后，血清中H-FABP逐漸升高。結果顯示主動脈阻斷放開后3h開始H-FABP增高，與文獻報道基本一致[8]。

綜上所述，血清H-FABP可作為心臟手術后心肌損傷的理想標記物之一，也可對心肌細胞缺血、缺氧后造成的心肌損傷控制具有非常重要的價值。

[1]季鵬,顧春榮,卞智萍,等.人心臟型脂肪酸結合蛋白的純化與鑒定[J].中國組織工程研究與臨床康復,2007,11(27):5387-5390.

[2]Mcmahon CG,Lamont JV,Curtin E,et al.Diagnostic accuracy of heart-type fatty acid-binding protein for the early diagnosis of acute myocardial infarction[J].Am J Emerg Med,2012,30(2):267-274.

[3]Sbarouni E,Georgiadou P,Koutelou M,et al.Heart type fatty acid binding protein in relation to pharmacologic scintigraphy in coronary artery disease[J].Clin Chem Lab Med,2012,50(2):387-390.

[4]Aldous S,Pemberton C,Troughton R,et al.Heart fatty acid binding protein and myoglobin do not improve early rule out of acute myocardial infarction when highly sensitive troponin assays are used[J].Resuscitation,2012,83(2):e27-e28,e29-e30.

[5]Hayabuchi Y,Inoue M,Watanabe N,et al.Serum concentration of heart-type fatty acid-binding protein in children and adolescents with congenital heart disease[J].Circ J,2011,75(8):1992-1997.

[6]Charpentier S,Maupas-Schwalm F,Cournot M,et al.Diagnostic accuracy of quantitative heart-fatty acid binding protein assays compared with Cardiodetect((R))in the early detection of acute coronary syndrome[J].Arch Cardiovasc Dis,2011,104(10):524-529.

[7]Garcia-Valdecasas S,Ruiz-Alvarez MJ,Garcia DTJ,et al.Diagnostic and prognostic value of heart-type fatty acid-binding protein in the early hours of acute myocardial infarction[J].Acta Cardiol,2011,66(3):315-321.

[8]Figiel L,Wraga M,Bednarkiewicz Z,et al.Direct comparison of the diagnostic value of point-of-care tests detecting heart-type fatty acid binding protein or glycogen phosphorylase isoenzyme BB in patients with acute coronary syndromes with persistent ST-segment elevation[J].Kardiol Pol,2011,69(1):1-6.