自建檢測(cè)系統(tǒng)常用生化項(xiàng)目校準(zhǔn)周期的建立

黃秀珍，呂賽平，劉琴，鄒學(xué)森

(江西省腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330029)

校準(zhǔn)是生化檢驗(yàn)過(guò)程中最常用的操作程序之一，多種情況下需要對(duì)項(xiàng)目進(jìn)行重新校準(zhǔn)，如更換試劑批號(hào)；儀器重要部件如電極、光源燈被更換；對(duì)儀器進(jìn)行了比較大的維護(hù)，如清洗樣本針、試劑針、比色杯等[1]。值得注意的是，當(dāng)某個(gè)生化項(xiàng)目被校準(zhǔn)后，即使上述情況均未發(fā)生，由于試劑有效成分的穩(wěn)定性較差、試劑中某些成分與空氣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、試劑揮發(fā)導(dǎo)致有效成分濃縮等因素的存在[2]，有必要對(duì)該項(xiàng)目進(jìn)行再次校準(zhǔn)，從而保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。由于不同項(xiàng)目的試劑成分各不相同，因此不同項(xiàng)目亦各有其獨(dú)自的校準(zhǔn)周期，本研究即旨在建立本科室自建檢測(cè)系統(tǒng)24個(gè)生化項(xiàng)目的校準(zhǔn)周期，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑 (1)儀器：日本東芝公司生產(chǎn)的TBA-120FR全自動(dòng)生化分析儀。(2)試劑：電解質(zhì)項(xiàng)目Na+、K+、Cl-等3個(gè)項(xiàng)目的稀釋液、參比液均由日本東芝公司生產(chǎn)，其余21個(gè)項(xiàng)目的試劑均由上海執(zhí)誠(chéng)生物科技股份有限公司生產(chǎn)，在本研究過(guò)程中，需保證所有試劑的批號(hào)維持不變。(3)校準(zhǔn)品：所有校準(zhǔn)品均由英國(guó)朗道實(shí)驗(yàn)診斷有限公司生產(chǎn)。(4)質(zhì)控品：所有項(xiàng)目質(zhì)控品均由英國(guó)朗道實(shí)驗(yàn)診斷有限公司生產(chǎn)，由于試驗(yàn)過(guò)程中需要使用低值濃度水平的質(zhì)控品，因此TP、ALB、Pche等3個(gè)項(xiàng)目采用異常值質(zhì)控品，批號(hào)為498UN，其余21個(gè)項(xiàng)目采用正常值質(zhì)控品，批號(hào)為790UN。

1.2 各項(xiàng)目測(cè)定方法 TP、ALB測(cè)定分別采用雙縮脲法、BCG法，TBIL、DBIL測(cè)定均采用釩酸鹽氧化法，ALT、AST、ALP、GGT、Pche、CK、LDH、HBDH 測(cè)定均采用速率法，UA、Cr、BUN、GLU、TG、TC、Ca2+、Mg2+、P3-測(cè)定分別采用尿酸酶-過(guò)氧化物酶偶聯(lián)法、肌氨酸氧化酶法、酶偶聯(lián)速率法、GOD法、GPOPAP法、COD-PAP法，Ca(甲基麝香草酚藍(lán)比色法)、Mg(染料比色法)、P(紫外分光光度法)，K+、Na+、Cl-測(cè)定采用電極法。

1.3 校準(zhǔn)周期判斷方法 步驟如下：(1)更換研究項(xiàng)目的試劑，對(duì)研究項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn)。(2)在距離校準(zhǔn)時(shí)間0h、4h、8h、24h測(cè)定低值濃度水平質(zhì)控品4次，此后每24h測(cè)定1次，連續(xù)測(cè)定至第30d。(3)在研究過(guò)程中，定期對(duì)儀器進(jìn)行保養(yǎng)，同時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)用水、實(shí)驗(yàn)室溫度及濕度，并保證上述指標(biāo)符合實(shí)驗(yàn)室相關(guān)要求。(4)剔除離群點(diǎn)，本研究以13s、R4s作為離群點(diǎn)的判斷標(biāo)準(zhǔn)。(5)當(dāng)TEa以相對(duì)數(shù)表示時(shí)，計(jì)算第n天以及此前所有質(zhì)控結(jié)果的CCVn(n的取值范圍為1~30)；當(dāng)TEa以絕對(duì)數(shù)表示時(shí)，計(jì)算第n天所有質(zhì)控結(jié)果均值與第1天所有質(zhì)控結(jié)果均值之差QCn-QC1(n的取值范圍為2~30)。(5)以1/6TEa作為校準(zhǔn)周期的判斷閾值[3,4]，當(dāng)某項(xiàng)目第n天的CCVn或QCn-QC1超過(guò)其判斷閾值時(shí)，該項(xiàng)目的校準(zhǔn)周期即為(n-1)天。

2 結(jié)果

TP、ALB、TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、GGT、Pche、UA、Cr、CK、HBDH、GLU、TG、K+、Cl-、Mg、P 的校準(zhǔn)周期≥30d，Na+、TC、Ca、LDH、BUN 的校準(zhǔn)周期分別為 12d、9d、7d、7d、1d，結(jié)果見(jiàn)表 1。

表1 本科室自建檢測(cè)系統(tǒng)不同項(xiàng)目的校準(zhǔn)周期

3 討論

建立合適的校準(zhǔn)方案是保證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要前提，這項(xiàng)工作包括選擇合適的校準(zhǔn)品、確定適宜的校準(zhǔn)周期等兩個(gè)方面[5，6]，前者要求校準(zhǔn)品應(yīng)盡可能溯源至參考物質(zhì)和(或)參考方法，而后者則要求根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的原理、試劑、TEa等因素確定其獨(dú)自的校準(zhǔn)周期。

在本研究中，我們確定各項(xiàng)目校準(zhǔn)周期的方法已經(jīng)在國(guó)內(nèi)得到了廣泛應(yīng)用[3，4，7]，但是在選擇實(shí)驗(yàn)樣本方面，本研究有著其獨(dú)自的特點(diǎn)。由于質(zhì)控品濃度越高，試驗(yàn)得到的CCVn或QCn-QC1就越小，故選擇高值質(zhì)控血清作為實(shí)驗(yàn)樣本得到的校準(zhǔn)周期極有可能假性偏高，因此本研究只需選擇一個(gè)低值濃度水平質(zhì)控品作為實(shí)驗(yàn)樣本即可。值得注意的是，TP、ALB、Pche等3個(gè)項(xiàng)目異常值質(zhì)控品的濃度水平低于正常值質(zhì)控品，而其他21個(gè)項(xiàng)目正常值質(zhì)控品的濃度水平低于異常值質(zhì)控品，因此本研究選擇異常值質(zhì)控品用于TP、ALB、Pche校準(zhǔn)周期的研究，而選擇正常值質(zhì)控品用于其他21個(gè)項(xiàng)目校準(zhǔn)周期的研究。此外，在本研究過(guò)程中，我們還對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行了離群點(diǎn)檢查，離群點(diǎn)判斷標(biāo)準(zhǔn)主要是13s、R4s這兩個(gè)質(zhì)控規(guī)則，因?yàn)檫@兩個(gè)規(guī)則檢測(cè)偶然誤差的靈敏度較高，如果偶然誤差數(shù)據(jù)保留在整個(gè)數(shù)據(jù)中，那么該項(xiàng)目的CCVn或QCn-QC1易得到大幅度提高，得到校準(zhǔn)周期假性偏低。當(dāng)偶然誤差數(shù)據(jù)被剔除以后，當(dāng)CCVn或QCn-QC1超過(guò)判斷閾值時(shí)即判斷校準(zhǔn)周期的結(jié)束。

由本研究結(jié)果可知，本科室電解質(zhì)項(xiàng)目的校準(zhǔn)周期顯著長(zhǎng)于其他文獻(xiàn)[3~5]報(bào)道，這可能是由于我們?cè)谶M(jìn)行本研究之前更換了新電極所致。此外，本研究結(jié)果還顯示我科BUN該項(xiàng)目的校準(zhǔn)周期較短，這主要是由試劑的穩(wěn)定性所決定。BUN試劑穩(wěn)定性差的原因是由于BUN試劑中存在NADH，該成分易被氧化，導(dǎo)致吸光度下降，且目前尚無(wú)好的方法以維持BUN試劑中的NADH的穩(wěn)定性[8]。從本研究結(jié)果與其他文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果可知，不同文獻(xiàn)報(bào)道之間生化項(xiàng)目的校準(zhǔn)周期存在一定的區(qū)別，為保證臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，有必要建立自己實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)周期。

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